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根癌农杆菌介导的Expansin基因转化烟草的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词第13-14页
1 绪言第14-26页
   ·植物基因工程研究进展第14-20页
     ·转基因植物发展概况第14页
     ·植物转化是对植物进行品种改良的有效手段第14-15页
     ·遗传转化方法第15-19页
       ·农杆菌介导法第15-17页
       ·直接转化法第17-19页
     ·转基因植株的筛选与检测第19-20页
       ·转基因植物的筛选第19页
       ·转基因植物的检测第19-20页
   ·Expansin的研究进展第20-25页
     ·Expansin的发现和作用第20-21页
     ·Expansin蛋白分子特征第21-22页
     ·Expansin的作用机理第22页
     ·Expansin与激素的关系第22-24页
     ·Expansin基因的研究状况第24页
       ·Expansin基因的克隆与序列分析第24页
       ·Expansin的基因家族第24页
     ·转Expansin基因的研究进展第24-25页
   ·本研究的内容、目的与意义第25-26页
2 实验仪器、材料与方法:第26-32页
   ·仪器设备第26页
   ·实验材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·菌株、植物转化载体第26-27页
   ·主要试剂及药品第27-29页
     ·培养基第27-28页
       ·植物培养基第27-28页
       ·细菌培养基第28页
     ·常用储存液第28页
     ·主要试剂配方第28页
     ·工具酶及其它分子试剂第28-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·由烟草种子萌发获得无菌苗第29页
     ·烟草高频再生体系的建立第29页
       ·愈伤组织或不定芽的诱导第29页
       ·诱导生根第29页
     ·外植体卡那霉素敏感性实验第29页
     ·利用农杆菌介导的外植体遗传转化第29-30页
       ·菌种活化与菌液制备第29页
       ·外植体的预培养第29-30页
       ·农杆菌浸染转化及共培养第30页
       ·不定芽的诱导与植株再生第30页
     ·转化植株的移栽第30页
     ·转化植株的PCR检测第30-32页
       ·植物总DNA的提取第30-31页
       ·转化植株基因组的PCR扩增第31-32页
3 结果与分析第32-38页
   ·叶外植体再生体系的建立第32-34页
     ·不同芽诱导培养基对叶外植体分化能力的影响第32页
     ·不同生根培养基对不定根的诱导第32-33页
     ·无菌苗苗龄对外植体再生能力的影响第33-34页
   ·卡那霉素对叶外植体敏感性的测定第34页
   ·影响根癌农杆菌转化烟草的因素第34-36页
     ·菌液浓度对转化效率的影响第34-35页
     ·浸染时间对转化效率的影响第35页
     ·共培养时间对转化效率的影响第35-36页
     ·预培养时间对转化效率的影响第36页
   ·转化植株的生根筛选第36页
   ·PCR检测的结果第36-37页
   ·转基因植株的移栽第37-38页
4 结论与讨论第38-42页
   ·结论及创新点第38页
   ·讨论第38-41页
     ·卡那霉素筛选浓度的确定第38-39页
     ·影响农杆菌介导Expansin基因转化烟草的影响因素第39-40页
       ·外植体叶龄第39页
       ·侵染时间第39页
       ·菌液浓度第39页
       ·共培养时间第39-40页
       ·预培养时间第40页
     ·PCR检测第40-41页
   ·有关下一步工作的计划第41-42页
参考文献第42-50页
附图Ⅰ:第50-51页
附图Ⅱ:第51-52页
附图Ⅲ:第52-53页
附图Ⅳ:第53-54页
附图Ⅴ:第54-55页
附图Ⅵ:第55-56页
致谢第56-57页
攻读学位期间的主要学术成果第57页

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