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鸡传染性支气管炎病毒793/B RT-PCR检测方法的建立与应用及TA03株S1基因的克隆与表达

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
第一部分 文献综述鸡传染性支气管炎病毒793/B 的研究进展第12-37页
 1. IBV 的分类地位第13页
 2. IBV 的基因组第13-14页
 3. IBV 的病毒粒子结构第14-15页
 4. IBV 的主要结构蛋白及功能第15-19页
   ·纤突蛋白(S 蛋白或E1)第15-17页
   ·包膜蛋白(基质蛋白或M 蛋白)第17-18页
   ·核衣壳蛋白(N 蛋白)第18页
   ·其它蛋白第18-19页
 5. IBV 的复制第19-21页
 6. IBV 的血清型第21-26页
   ·国外对 IBV 的分型研究第21-22页
   ·国内对 IBV 分型的研究第22-23页
   ·血清抗体分析第23-26页
 7. IBV RNA 重组与基因工程苗第26-28页
 8. IBV 793/B 的特性第28-35页
   ·分子生物学特性第29-31页
     ·793/B 血清亚群第29页
     ·核苷酸序列第29-30页
     ·氨基酸序列第30-31页
   ·致病性第31-32页
   ·流行病学第32页
   ·诊断第32-34页
     ·病毒的分离第32-33页
     ·血清学鉴定第33页
     ·分子生物学诊断方法第33-34页
   ·防制及存在的问题第34-35页
 9. 研究的意义第35-37页
第二部分 研究内容第37-64页
 第一章 IBV 793/B RT-PCR 检测方法的建立及应用第37-50页
  1. 材料与方法第38-46页
   ·材料第38-39页
     ·病毒株第38页
     ·载体与受体菌第38页
     ·器材和试剂第38-39页
     ·SPF 鸡胚第39页
     ·主要溶液的配制第39页
   ·方法第39-46页
     ·鸡传染性支气管炎病毒51 基因片段的RT-PCR 扩增第39-41页
     ·PCR 产物的克隆和序列测定第41-45页
     ·PCR 特异性试验第45-46页
     ·PCR 敏感性试验第46页
     ·对疑似分离毒株的检测第46页
  2. 结果第46-48页
   ·RT-PCR 扩增结果第46页
   ·酶切鉴定及测序结果第46-47页
   ·PCR 特异性试验第47页
   ·PCR 敏感性试验第47-48页
   ·疑似分离毒株的检测第48页
  3. 讨论第48-50页
 第二章 IBV 793/B TA03株S1基因的克隆与表达第50-64页
  1. 材料与方法第50-57页
   ·材料第50-51页
     ·毒株、菌株和质粒第50页
     ·器材和试剂第50页
     ·主要溶液的配制第50页
     ·实验动物第50-51页
   ·方法第51-57页
     ·S1 基因片段的RT-PCR 扩增第51-52页
     ·原核表达质粒的构建第52-53页
     ·重组质粒的鉴定第53-54页
     ·重组阳性克隆的原核表达第54-56页
     ·S1 蛋白多克隆抗体的制备第56页
     ·重组菌菌体裂解物的免疫印迹(Western blotting)分析第56-57页
  2. 结果第57-63页
   ·S1 基因片段的RT- PCR 扩增结果第57页
   ·原核表达重组质粒的构建及测序第57页
   ·S1 基因片段的原核表达及活性检测第57-63页
     ·S1 基因片段在大肠杆菌中的表达第57页
     ·Western-blotting 分析第57-63页
  3. 讨论第63-64页
结论第64-65页
参考文献第65-76页
附录第76-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间发表论文情况第79页

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