中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
第一部分 文献综述鸡传染性支气管炎病毒793/B 的研究进展 | 第12-37页 |
1. IBV 的分类地位 | 第13页 |
2. IBV 的基因组 | 第13-14页 |
3. IBV 的病毒粒子结构 | 第14-15页 |
4. IBV 的主要结构蛋白及功能 | 第15-19页 |
·纤突蛋白(S 蛋白或E1) | 第15-17页 |
·包膜蛋白(基质蛋白或M 蛋白) | 第17-18页 |
·核衣壳蛋白(N 蛋白) | 第18页 |
·其它蛋白 | 第18-19页 |
5. IBV 的复制 | 第19-21页 |
6. IBV 的血清型 | 第21-26页 |
·国外对 IBV 的分型研究 | 第21-22页 |
·国内对 IBV 分型的研究 | 第22-23页 |
·血清抗体分析 | 第23-26页 |
7. IBV RNA 重组与基因工程苗 | 第26-28页 |
8. IBV 793/B 的特性 | 第28-35页 |
·分子生物学特性 | 第29-31页 |
·793/B 血清亚群 | 第29页 |
·核苷酸序列 | 第29-30页 |
·氨基酸序列 | 第30-31页 |
·致病性 | 第31-32页 |
·流行病学 | 第32页 |
·诊断 | 第32-34页 |
·病毒的分离 | 第32-33页 |
·血清学鉴定 | 第33页 |
·分子生物学诊断方法 | 第33-34页 |
·防制及存在的问题 | 第34-35页 |
9. 研究的意义 | 第35-37页 |
第二部分 研究内容 | 第37-64页 |
第一章 IBV 793/B RT-PCR 检测方法的建立及应用 | 第37-50页 |
1. 材料与方法 | 第38-46页 |
·材料 | 第38-39页 |
·病毒株 | 第38页 |
·载体与受体菌 | 第38页 |
·器材和试剂 | 第38-39页 |
·SPF 鸡胚 | 第39页 |
·主要溶液的配制 | 第39页 |
·方法 | 第39-46页 |
·鸡传染性支气管炎病毒51 基因片段的RT-PCR 扩增 | 第39-41页 |
·PCR 产物的克隆和序列测定 | 第41-45页 |
·PCR 特异性试验 | 第45-46页 |
·PCR 敏感性试验 | 第46页 |
·对疑似分离毒株的检测 | 第46页 |
2. 结果 | 第46-48页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第46页 |
·酶切鉴定及测序结果 | 第46-47页 |
·PCR 特异性试验 | 第47页 |
·PCR 敏感性试验 | 第47-48页 |
·疑似分离毒株的检测 | 第48页 |
3. 讨论 | 第48-50页 |
第二章 IBV 793/B TA03株S1基因的克隆与表达 | 第50-64页 |
1. 材料与方法 | 第50-57页 |
·材料 | 第50-51页 |
·毒株、菌株和质粒 | 第50页 |
·器材和试剂 | 第50页 |
·主要溶液的配制 | 第50页 |
·实验动物 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·S1 基因片段的RT-PCR 扩增 | 第51-52页 |
·原核表达质粒的构建 | 第52-53页 |
·重组质粒的鉴定 | 第53-54页 |
·重组阳性克隆的原核表达 | 第54-56页 |
·S1 蛋白多克隆抗体的制备 | 第56页 |
·重组菌菌体裂解物的免疫印迹(Western blotting)分析 | 第56-57页 |
2. 结果 | 第57-63页 |
·S1 基因片段的RT- PCR 扩增结果 | 第57页 |
·原核表达重组质粒的构建及测序 | 第57页 |
·S1 基因片段的原核表达及活性检测 | 第57-63页 |
·S1 基因片段在大肠杆菌中的表达 | 第57页 |
·Western-blotting 分析 | 第57-63页 |
3. 讨论 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-76页 |
附录 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第79页 |