| 缩略词表 | 第1-12页 |
| 第一部分 双基因双靶向溶瘤腺病毒的制备 | 第12-69页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 材料 | 第13-19页 |
| 方法 | 第19-52页 |
| 一、pTD55-IL-24和pTD55-K5构建 | 第19-26页 |
| 二、pTD55-K5-IL-24的构建 | 第26-33页 |
| 三、pTD55-EGFP的构建 | 第33-39页 |
| 四、同源重组法构建重组腺病毒 | 第39页 |
| 五、抽提病毒DNA及鉴定 | 第39-40页 |
| 六、病毒的空斑纯化、大量制备与滴度测定 | 第40-42页 |
| 七、蛋白质印迹(Western Blot) | 第42-44页 |
| 八、RT-PCR | 第44-45页 |
| 九、293细胞的培养 | 第45-52页 |
| 结果 | 第52-60页 |
| 一、重组质粒的鉴定 | 第52-56页 |
| 二、重组腺病毒鉴定 | 第56-58页 |
| 三、携带治疗基因mRNA表达水平的鉴定 | 第58-59页 |
| 四、重组腺病毒的western blot鉴定： | 第59-60页 |
| 讨论 | 第60-69页 |
| 第二部分 双基因双靶向增殖腺病毒治疗肿瘤的体外实验研究 | 第69-102页 |
| 材料 | 第69-70页 |
| 方法 | 第70-75页 |
| 一、主要溶液的配置 | 第70-72页 |
| 二、细胞培养 | 第72页 |
| 三、蛋白质印迹分析(Western Blot) | 第72页 |
| 四、病毒增殖试验(virus progeny assay) | 第72-73页 |
| 五、细胞活力检测(cell viability assay) | 第73页 |
| 六、CPE实验 | 第73页 |
| 七、DNA片断化实验 | 第73-74页 |
| 八、Hoechst33258凋亡细胞染色 | 第74页 |
| 九、肿瘤血管形成实验(tube formation assay) | 第74-75页 |
| 十、荧光显微镜镜检观察病毒增殖情况 | 第75页 |
| 结果 | 第75-86页 |
| 一、病毒增殖试验 | 第75-76页 |
| 二、CPE实验(Cytopathic Effect：细胞病理效应) | 第76-78页 |
| 三、细胞活力检测 | 第78-80页 |
| 四、Hoechst33258凋亡细胞染色 | 第80-81页 |
| 五、肿瘤血管形成实验 | 第81-83页 |
| 六、DNA片断化 | 第83-84页 |
| 七、荧光显微镜镜检观察病毒增值情况 | 第84-85页 |
| 八、Western blot分析Caspase3的活化 | 第85-86页 |
| 讨论 | 第86-90页 |
| 参考文献 | 第90-102页 |
| 第三部分 综述溶瘤腺病毒的靶向性策略 | 第102-107页 |
| 1 腺病毒的性质 | 第102页 |
| 2 腺病毒的靶向性策略基础 | 第102-105页 |
| 3 腺病毒双靶向或多靶向策略 | 第105页 |
| 4 展望 | 第105页 |
| 参考文献 | 第105-107页 |
| 附录 | 第107-113页 |
| 发表文章目录 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
