| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩写 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| ·头孢菌素C的生物合成途径 | 第10-18页 |
| ·pcbAB-pcbC-cefD | 第13-15页 |
| ·cefEF | 第15-16页 |
| ·cefG | 第16-18页 |
| ·头孢菌素C的转录调控基因等 | 第18-19页 |
| ·国内研究进展 | 第19页 |
| ·总结 | 第19-20页 |
| ·本工作的立题意义和研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 顶头孢霉中cefG基因的克隆 | 第21-37页 |
| ·材料与方法 | 第21-29页 |
| ·菌种与质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·酶和试剂 | 第23页 |
| ·常用溶液 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·顶头孢霉总DNA的提取 | 第29页 |
| ·顶头孢霉总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·cefG基因的引物设计和RT-PCR | 第30-32页 |
| ·顶头孢霉cefG基因的鉴定 | 第32-33页 |
| ·顶头孢霉cefG基因的序列测定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第三章 cefG基因在大肠杆菌中的表达 | 第37-56页 |
| ·材料和方法 | 第37-43页 |
| ·菌种与质粒 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·酶和试剂 | 第38-39页 |
| ·常用溶液 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·结果 | 第43-53页 |
| ·表达质粒pYG352的构建和蛋白表达 | 第43-44页 |
| ·表达质粒pYG356、pYG357的构建和蛋白表达 | 第44-48页 |
| ·可溶性表达条件的优化 | 第48-51页 |
| ·乙酰转移酶体外测活 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 第四章 酶的纯化和酶学研究 | 第56-70页 |
| ·材料与方法 | 第56-61页 |
| ·常用溶液 | 第56-57页 |
| ·常用试剂和仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-61页 |
| ·结果 | 第61-66页 |
| ·乙酰CoA：DAC乙酰转移酶的纯化 | 第61页 |
| ·乙酰CoA：DAC乙酰转移酶的梯度纯化 | 第61-62页 |
| ·CPC标准曲线 | 第62-63页 |
| ·pH对酶转化效率的影响 | 第63-64页 |
| ·温度对酶转化效率的影响 | 第64页 |
| ·离子缓冲体系对酶转化效率的影响 | 第64-65页 |
| ·酶的Vmax测定及Km值 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 综述报告和发表文章 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-88页 |