中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
引言 | 第9-12页 |
第一部分 B型肉毒毒素重链C端基因的克隆表达与保护作用的初步研究 | 第12-31页 |
1 材料和方法 | 第12-19页 |
·材料 | 第12-13页 |
·B型肉毒毒素重链C-端基因片段的克隆表达及纯化鉴定 | 第13-16页 |
·BoNTB/Hc对小鼠免疫保护作用的初步评价 | 第16-17页 |
·抗B型肉毒毒素重链C-端基因鸡卵黄抗体(IgY)的制备 | 第17-19页 |
2 结果 | 第19-28页 |
·BoNTB/Hc片段的PCR扩增及序列测定 | 第19-21页 |
·BoNTB/Hc天然序列在大肠杆菌中的表达 | 第21-22页 |
·BoNTB/Hc融合蛋白在大肠杆菌中的表达及变复性研究 | 第22-24页 |
·BoNTB/Hc N端修饰蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第24页 |
·金属螯和层析法对BoNTB/Hc蛋白的纯化及鉴定 | 第24-25页 |
·BoNTB/Hc免疫保护作用的初步评价 | 第25-26页 |
·抗B型肉毒毒素重链C-端基因鸡卵黄抗体(IgY)的制备 | 第26-28页 |
3 讨论 | 第28-31页 |
第二部分 鼠源抗BoNT/B抗体库的构建筛选及抗体免疫学活性的初步研究 | 第31-88页 |
一 鼠源抗BoNTB/Hc噬菌体展示抗体库的构建 | 第31-57页 |
1 材料与方法 | 第31-45页 |
·材料 | 第31-32页 |
·大肠杆菌感受态细胞及辅助噬菌体的制备 | 第32-33页 |
·小鼠免疫、总RNA提取及cDNA的合成 | 第33-34页 |
·scFv基因库(scFv repertoires)的构建 | 第34-40页 |
·Fab基因库(Fab repertoires)的构建 | 第40-45页 |
2 结果 | 第45-54页 |
·总RNA的制备及cDNA的合成 | 第45页 |
·scFv基因库(scFv repertoires)的构建 | 第45-49页 |
·Fab基因库的构建 | 第49-54页 |
3 讨论 | 第54-57页 |
二 抗B型肉毒毒素噬菌体抗体的体外亲和筛选及序列分析 | 第57-79页 |
1 材料与方法 | 第57-62页 |
·材料 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-62页 |
2 结果 | 第62-76页 |
·scFv噬菌体抗体库的富集筛选及序列分析 | 第62-68页 |
·Fab噬菌体抗体库的富集筛选及序列分析 | 第68-76页 |
3 讨论 | 第76-79页 |
三 抗B型肉毒毒素鼠源抗体免疫学活性的初步研究 | 第79-88页 |
1 材料与方法 | 第79-82页 |
·材料 | 第79页 |
·实验动物 | 第79页 |
·BoNT/B鼠LD_(50)的测定 | 第79页 |
·相关因子对小鼠试验影响的测定 | 第79-80页 |
·抗BoNT/B鼠源抗体免疫学活性的初步研究 | 第80-82页 |
2 结果 | 第82-87页 |
·BoNT/B半数致死剂量实验 | 第82页 |
·相关因子对小鼠试验影响的测定 | 第82页 |
·噬菌体条件下scFv抗体免疫学活性试验 | 第82-85页 |
·重组scFv抗体免疫学活性的初步研究 | 第85-87页 |
3 讨论 | 第87-88页 |
总结 | 第88-90页 |
综述 | 第90-101页 |
参考文献 | 第101-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
英文缩略词表 | 第109-110页 |
附录一 发表综述(全文) | 第110-113页 |
附录二 发表论文(全文) | 第113-115页 |