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大熊猫犬冠状病毒动物感染试验及其荧光检测方法的建立

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
前言第11-23页
正文第23-55页
 1 材料第23页
  1.1 病毒与血清第23页
  1.2 试验动物第23页
  1.3 主要试剂第23页
  1.4 主要仪器第23页
 2 方法第23-29页
  2.1 动物感染试验第23-24页
   2.1.1 试验动物分组及接毒剂量第23-24页
   2.1.2 临床症状及病理剖检观察第24页
  2.2 幼犬的免疫第24-25页
   2.2.1 抗原的制备第24页
   2.2.2 免疫部位与免疫程序第24-25页
   2.2.3 血清的提取第25页
  2.3 荧光抗体的制备第25-28页
   2.3.1 饱和(NH_4)_2SO_4法提取免疫球蛋白第25页
   2.3.2 FITC标记抗体第25-26页
   2.3.3 荧光抗体的鉴定第26页
   2.3.4 标记抗体的纯化第26-28页
  2.4 CCV DXMV荧光检测方法的建立-直接荧光抗体法第28-29页
   2.4.1 判定标准第28页
   2.4.2 染色性能的鉴定第28-29页
   2.4.3 染色方法第29页
  2.5 组织中病毒抗原的检测第29页
 3 结果第29-49页
  3.1 体温变化第29-32页
   3.1.1 幼犬体温测定结果第30页
   3.1.2 体温变化曲线第30-31页
   3.1.3 体温变化值第31页
   3.1.4 体温变化情况第31-32页
  3.2 临床症状和病理剖检变化第32页
   3.2.1 临床症状的观察第32页
   3.2.2 病理剖检变化第32页
  3.3 病理组织变化第32-39页
   3.3.1 攻毒组 A组第32-36页
   3.3.2 阳性对照B组第36-39页
  3.4 幼犬的免疫与免疫球蛋白的提取第39页
  3.5 荧光抗体的制备第39-42页
   3.5.1 FITC的称量和标记第39页
   3.5.2 荧光抗体的鉴定第39-40页
   3.5.3 标记抗体的纯化第40-42页
  3.6 CCV DXMV荧光检测方法的建立第42页
   3.6.1 荧光抗体效价的测定第42页
   3.6.2 荧光抗体的特异性试验第42页
  3.7 荧光抗体法检测组织中的病毒抗原第42-49页
   3.7.1 攻毒组第42-45页
   3.7.2 阳性组第45-48页
   3.7.3 阴性对照组C第48-49页
 4 讨论第49-54页
  4.1 关于实验动物模型的建立第49页
  4.2 关于幼犬的体温变化第49-50页
  4.3 关于石蜡切片的制作第50页
  4.4 关于病毒的复制及复制部位第50-51页
  4.5 关于非特异性荧光的消除第51页
  4.6 关于缓冲液的选择第51-52页
  4.7 荧光抗体浓度的选择第52页
  4.8 关于建立的荧光抗检测方法的评价第52页
  4.9 关于CCV DXMV和CCV NL-18的亲缘关系第52-53页
  4.10 关于石蜡切片与荧光抗体染片的关系第53页
  4.11 关于大熊猫犬冠状病毒的致病性第53页
  4.12 关于大熊猫的保护第53-54页
 5 结论第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59页

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