中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-23页 |
正文 | 第23-55页 |
1 材料 | 第23页 |
1.1 病毒与血清 | 第23页 |
1.2 试验动物 | 第23页 |
1.3 主要试剂 | 第23页 |
1.4 主要仪器 | 第23页 |
2 方法 | 第23-29页 |
2.1 动物感染试验 | 第23-24页 |
2.1.1 试验动物分组及接毒剂量 | 第23-24页 |
2.1.2 临床症状及病理剖检观察 | 第24页 |
2.2 幼犬的免疫 | 第24-25页 |
2.2.1 抗原的制备 | 第24页 |
2.2.2 免疫部位与免疫程序 | 第24-25页 |
2.2.3 血清的提取 | 第25页 |
2.3 荧光抗体的制备 | 第25-28页 |
2.3.1 饱和(NH_4)_2SO_4法提取免疫球蛋白 | 第25页 |
2.3.2 FITC标记抗体 | 第25-26页 |
2.3.3 荧光抗体的鉴定 | 第26页 |
2.3.4 标记抗体的纯化 | 第26-28页 |
2.4 CCV DXMV荧光检测方法的建立-直接荧光抗体法 | 第28-29页 |
2.4.1 判定标准 | 第28页 |
2.4.2 染色性能的鉴定 | 第28-29页 |
2.4.3 染色方法 | 第29页 |
2.5 组织中病毒抗原的检测 | 第29页 |
3 结果 | 第29-49页 |
3.1 体温变化 | 第29-32页 |
3.1.1 幼犬体温测定结果 | 第30页 |
3.1.2 体温变化曲线 | 第30-31页 |
3.1.3 体温变化值 | 第31页 |
3.1.4 体温变化情况 | 第31-32页 |
3.2 临床症状和病理剖检变化 | 第32页 |
3.2.1 临床症状的观察 | 第32页 |
3.2.2 病理剖检变化 | 第32页 |
3.3 病理组织变化 | 第32-39页 |
3.3.1 攻毒组 A组 | 第32-36页 |
3.3.2 阳性对照B组 | 第36-39页 |
3.4 幼犬的免疫与免疫球蛋白的提取 | 第39页 |
3.5 荧光抗体的制备 | 第39-42页 |
3.5.1 FITC的称量和标记 | 第39页 |
3.5.2 荧光抗体的鉴定 | 第39-40页 |
3.5.3 标记抗体的纯化 | 第40-42页 |
3.6 CCV DXMV荧光检测方法的建立 | 第42页 |
3.6.1 荧光抗体效价的测定 | 第42页 |
3.6.2 荧光抗体的特异性试验 | 第42页 |
3.7 荧光抗体法检测组织中的病毒抗原 | 第42-49页 |
3.7.1 攻毒组 | 第42-45页 |
3.7.2 阳性组 | 第45-48页 |
3.7.3 阴性对照组C | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-54页 |
4.1 关于实验动物模型的建立 | 第49页 |
4.2 关于幼犬的体温变化 | 第49-50页 |
4.3 关于石蜡切片的制作 | 第50页 |
4.4 关于病毒的复制及复制部位 | 第50-51页 |
4.5 关于非特异性荧光的消除 | 第51页 |
4.6 关于缓冲液的选择 | 第51-52页 |
4.7 荧光抗体浓度的选择 | 第52页 |
4.8 关于建立的荧光抗检测方法的评价 | 第52页 |
4.9 关于CCV DXMV和CCV NL-18的亲缘关系 | 第52-53页 |
4.10 关于石蜡切片与荧光抗体染片的关系 | 第53页 |
4.11 关于大熊猫犬冠状病毒的致病性 | 第53页 |
4.12 关于大熊猫的保护 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59页 |