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水疱性口炎病毒N基因克隆表达与诊断技术的研究

中文摘要Ⅰ第1-7页
英文摘要Ⅲ第7-14页
引    言第14-16页
文献综述第16-48页
 第一章 水疱性口炎的病原学特征及流行病学研究进展第16-32页
   ·概述第16页
   ·VSV的病原学特性第16-19页
     ·病原第16-17页
     ·血清型第17-18页
     ·培养特性第18页
     ·病毒的抵抗力第18-19页
   ·VS的流行病学第19-27页
     ·传播媒介第19-20页
     ·易感动物第20-22页
     ·流行特点第22-23页
     ·传播机制第23-24页
     ·临床症状第24-27页
     ·VS与其他类水疱病在临床症状上的区别第27页
   ·致病机理及免疫应答第27-32页
     ·致病机理第27-29页
     ·免疫应答第29-32页
 第二章 水疱性口炎的诊断与防制研究进展第32-41页
   ·样品采集第32页
   ·VS的诊断第32-35页
     ·病原分离与鉴定第32-33页
     ·免疫学试验第33-35页
   ·疫苗免疫第35-38页
     ·疫苗免疫机理第35-37页
     ·疫苗免疫研究进展第37-38页
   ·综合防制第38-41页
     ·卫生措施第39页
     ·封锁和隔离第39-40页
     ·公共卫生第40-41页
 第三章 水疱性口炎的基因结构及分子生物学研究进展第41-48页
   ·VSV基因组各基因的功能第41-43页
     ·先导RNA第41页
     ·N基因第41-42页
     ·NS(P)基因第42页
     ·M基因第42页
     ·G基因第42-43页
     ·L基因第43页
     ·间隔序列第43页
   ·病毒包膜与核衣壳第43页
   ·VSV基因组RNA的转录第43-47页
     ·VSV转录特征第43-44页
     ·VSV转录复制的分子机制第44-47页
   ·VSV的进化第47-48页
     ·体外进化第47页
     ·自然界的序列关系第47-48页
试验研究第48-92页
 第四章 VSV N基因的克隆和序列分析第48-63页
   ·材料第48-51页
     ·病毒第48页
     ·菌种第48页
     ·试剂第48-49页
     ·溶液配制第49-51页
     ·主要仪器第51页
   ·方法第51-56页
     ·RT-PCR第51-52页
     ·PCR产物的回收第52页
     ·N基因的克隆及鉴定第52-54页
     ·重组质粒PGEM-N 的提取与鉴定第54-56页
     ·阳性质粒测序与序列分析第56页
   ·结果第56-62页
     ·RT-PCR产物的电泳结果第56页
     ·目的基因的克隆与测序第56-57页
     ·测序第57-62页
   ·讨 论第62页
   ·小结第62-63页
 第五章 水疱性口炎病毒N基因原核表达载体的构建及表达第63-77页
   ·材料第63-64页
     ·病毒、菌株和质粒第63页
     ·酶与试剂第63页
     ·阳性血清及酶标抗体第63-64页
     ·主要仪器设备第64页
   ·方法与步骤第64-70页
     ·引物的设计与合成第64页
     ·重组表达载体的构建与鉴定第64-67页
     ·N基因编码核蛋白的一级结构分析第67页
     ·表达蛋白的鉴定第67-70页
   ·结果第70-75页
     ·亚克隆结果第70页
     ·重组质粒的电泳、PCR及酶切鉴定第70-71页
     ·N基因编码核蛋白的一级结构分析第71-74页
     ·表达蛋白的SDS-PAGE检测第74-75页
     ·表达蛋白的WESTERN BLOT检测第75页
   ·讨论第75-76页
   ·小结第76-77页
 第六章 N蛋白的纯化及ELISA诊断方法的初步研究第77-88页
   ·材料第77-78页
     ·主要试剂第77页
     ·N蛋白纯化复性主要溶液配制第77-78页
     ·ELISA试验中各种缓冲液的配制第78页
     ·主要仪器设备第78页
   ·方法第78-82页
     ·重组蛋白的大量诱导表达第78-79页
     ·包涵体的分离与纯化第79-81页
     ·间接ELISA方法的初步研究第81-82页
   ·结果第82-86页
     ·重组蛋白的制备及纯化第82页
     ·复性重组蛋白浓度及抗原活性的测定第82-83页
     ·间接ELISA方法的建立第83-86页
   ·讨论第86-87页
   ·小结第87-88页
 第七章 水疱性口炎RT-PCR诊断方法的建立第88-92页
   ·材料第88-89页
     ·种毒第88页
     ·主要试剂第88页
     ·主要仪器设备第88-89页
   ·RT-PCR诊断方法研究第89-90页
     ·病毒核酸的提取第89页
     ·引物的设计与合成第89页
     ·反转录第89页
     ·PCR实验第89-90页
     ·PCR扩增产物的检测第90页
     ·特异性试验第90页
     ·重复性试验第90页
   ·结果第90-91页
     ·PCR扩增产物的鉴定及特异性试验第90-91页
     ·RT-PCR的特异性和重复性实验第91页
   ·讨论第91页
     ·引物的设计第91页
     ·RT-PCR试验第91页
   ·小结第91-92页
结    论第92-93页
参考文献第93-108页
缩略语英汉对照表第108-109页
致    谢第109-110页
作者简介第110-111页

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