缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要(ABSTRACT) | 第8-10页 |
第一部分 SIRPα在小鼠神经发育过程中的表达 | 第10-40页 |
前言 | 第10-12页 |
试剂与仪器 | 第12-15页 |
1 材料 | 第12页 |
2 主要化学药品和试剂 | 第12-14页 |
3 主要实验仪器 | 第14-15页 |
实验方法 | 第15-28页 |
1 小鼠胚胎模型建立 | 第15页 |
2 取材和切片 | 第15-16页 |
3 感受态细胞制备 | 第16页 |
4 质粒转化 | 第16页 |
5 质粒小量抽提 | 第16页 |
6 质粒大量抽提 | 第16-17页 |
7 GST-SIRPα跑内区片段融合蛋白质体外表达和纯化 | 第17-18页 |
8 兔抗人SIRPα胞内区抗体的制备、纯化和鉴定 | 第18-21页 |
9 抗SIRPα跑内区抗体对小鼠脑组织切片行免疫组织化学染色 | 第21-22页 |
10 组织总蛋白提取和浓度测定 | 第22-23页 |
11 Western Blot | 第23页 |
12 SIRPα引物设计 | 第23页 |
13 SIRPα胞内区序列正义和反义RNA探针合成 | 第23-26页 |
14 原位杂交检测SIRPα表达 | 第26-28页 |
实验结果 | 第28-36页 |
1 兔抗SIRPα抗体的制备、纯化与鉴定 | 第28-29页 |
2 SIRPα原位杂交探针制备 | 第29-31页 |
3 SIRPαmRNA在小鼠脑组织中的表达定位 | 第31-33页 |
4 SIRPα蛋白在脑组织中的定位 | 第33-34页 |
5 SIRPα在脑发育过程中的表达改变 | 第34-36页 |
讨论 | 第36-38页 |
文献 | 第38-40页 |
第二部分 SIRPα在PC12神经分化过程中的作用研究 | 第40-69页 |
前言 | 第40-41页 |
试剂和仪器 | 第41-44页 |
1 材料 | 第41-42页 |
2 主要试剂配置 | 第42-43页 |
3 主要仪器 | 第43-44页 |
实验方法 | 第44-50页 |
1 PC12细胞培养 | 第44页 |
2 建立SIRPαWT基因稳定转染PC12细胞系 | 第44-47页 |
3 细胞增殖实验 | 第47-48页 |
4 NGF诱导PC12细胞神经分化分析 | 第48页 |
5 荧光素酶报告基因分析 | 第48页 |
6 免疫沉淀 | 第48-49页 |
7 细胞免疫荧光染色 | 第49-50页 |
实验结果 | 第50-60页 |
1 SIRPα在NGF诱导PC12细胞神经分化后的表达 | 第50-51页 |
2 稳定表达野生型SIRPαPC12细胞系的建立和鉴定 | 第51-52页 |
3 稳定转染SIRPαPC12细胞增殖能力检测 | 第52-54页 |
4 SIRPα对NGF刺激PC12细胞神经分化反应的影响 | 第54页 |
5 SIRPα胞内区缺失突变体对NGF刺激的PC12神经分化的影响 | 第54-57页 |
6 SIRPα表达对PC12细胞中NF-κB活化的影响 | 第57-58页 |
7 SIRPα对PC12细胞中MAPK通路活化的影响 | 第58-59页 |
8 SIRPα对NGF诱导PC12细胞神经分化过程中ankyrin重复结构域蛋白 | 第59-60页 |
Gankyrin蛋白表达的调节 | 第59-60页 |
讨论 | 第60-66页 |
1 NGF刺激PC12细胞神经分化后SIRPα表达上调的意义 | 第60-62页 |
2 SIRPα对NGF诱导PC12细胞形态分化过程的抑制及其意义 | 第62-64页 |
3 SIRPα对NGF诱导PC12细胞形态分化抑制的机制 | 第64-65页 |
4 SIRPα对PC12细胞中NF-κB活性的调节 | 第65页 |
5 SIRPα对NGF诱导不同信号传导通路的不同效应 | 第65-66页 |
6 SIRPα对NGF诱导神经分化过程中Gankyrin表达上调的促进 | 第66页 |
文献 | 第66-69页 |
第三部分 Gankyrin在NGF诱导PC12神经分化过程中的表达调控研究 | 第69-83页 |
前言 | 第69-70页 |
试剂与仪器 | 第70-71页 |
1 材料 | 第70-71页 |
2 主要化学药品和试剂 | 第71页 |
3 主要实验仪器(同第二部分) | 第71页 |
实验方法 | 第71-74页 |
1 小鼠胚眙模型建立、取材和免疫组化石蜡包埋切片(同第一部分) | 第71页 |
2 组织总蛋白提取和浓度测定(同第一部分) | 第71页 |
3 抗Gankyrin抗体对小鼠脑组织切片行免疫组织化学染色 | 第71-72页 |
4 NGF刺激PC12细胞及MAPK激酶抑制剂处理 | 第72-74页 |
5 Western Blot分析(同第一和第二部分) | 第74页 |
实验结果 | 第74-79页 |
1 Gankyrin在小鼠脑发育过程中的表达改变 | 第74-75页 |
2 Gankyrin在脑组织中表达定位 | 第75-76页 |
3 Gankyrin在神经发育过程中表达调控机制 | 第76-79页 |
讨论 | 第79-81页 |
文献 | 第81-83页 |
[综述一] | 第83-95页 |
信号调节蛋白研究进展 | 第83-95页 |
[综述二] | 第95-112页 |
Current understanding of the signal transduction in HCC | 第95-112页 |
致谢 | 第112页 |