| 第一章 绪论 | 第1-36页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·L-缬氨酸的理化性质及用途 | 第15-17页 |
| ·L-缬氨酸的理化性质 | 第15页 |
| ·L-缬氨酸的用途 | 第15-17页 |
| ·在医药上的应用 | 第16页 |
| ·在食品上的应用 | 第16-17页 |
| ·在饲料上的应用 | 第17页 |
| ·L-缬氨酸的测定方法 | 第17-18页 |
| ·L-缬氨酸的生产方法 | 第18-19页 |
| ·提取法 | 第18页 |
| ·合成法 | 第18-19页 |
| ·发酵法 | 第19页 |
| ·添加前体物发酵法 | 第19页 |
| ·直接发酵法 | 第19页 |
| ·L-缬氨酸的生物合成途径及其代谢调节机制 | 第19-22页 |
| ·L-缬氨酸的生物合成途径 | 第19-20页 |
| ·代谢调节机制 | 第20-22页 |
| ·L-缬氨酸高产菌株的育种思路 | 第22-27页 |
| ·出发菌株的选择 | 第22页 |
| ·切断或改变平行代谢途径 | 第22-23页 |
| ·解除菌体自身的反馈调节 | 第23-24页 |
| ·增加前体物质的合成 | 第24页 |
| ·切断进一步代谢途径 | 第24页 |
| ·选育营养缺陷型回复突变株 | 第24-25页 |
| ·利用基因工程技术构建L-缬氨酸工程菌 | 第25页 |
| ·L-缬氨酸高产菌代谢控制育种实例 | 第25-27页 |
| ·发酵条件的优化 | 第27-29页 |
| ·培养方式 | 第27-28页 |
| ·发酵条件的优化 | 第28-29页 |
| ·培养条件参数的优化 | 第28-29页 |
| ·发酵过程参数的检测 | 第29页 |
| ·论文立题背景及主要研究内容 | 第29-31页 |
| ·立题背景 | 第29-30页 |
| ·主要研究内容 | 第30-31页 |
| ·论文符号说明内容 | 第31-36页 |
| 第二章 发酵液中L-缬氨酸的测定方法 | 第36-51页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要溶液 | 第37-38页 |
| ·纸层析用溶液 | 第37-38页 |
| ·化学比色法用溶液 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·发酵液预处理 | 第38页 |
| ·发酵液L-缬氨酸的定性测定 | 第38-39页 |
| ·纸层析法 | 第38-39页 |
| ·薄层层析法 | 第39页 |
| ·发酵液L-缬氨酸的定量测定 | 第39-40页 |
| ·纸层析-色斑洗脱比色法测定L-缬氨酸含量 | 第39页 |
| ·化学比色法测定L-缬氨酸的含量 | 第39-40页 |
| ·高速氨基酸分析仪测定L-缬氨酸含量 | 第40页 |
| ·研究技术路线 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-49页 |
| ·发酵液氨基酸的定性测定 | 第40-41页 |
| ·纸层析法 | 第40页 |
| ·薄层层析法 | 第40-41页 |
| ·L-缬氨酸的定量测定 | 第41-49页 |
| ·纸层析分离洗脱法 | 第41-44页 |
| ·显色剂的选择 | 第41-42页 |
| ·洗脱时间的确定 | 第42页 |
| ·L-缬氨酸标准曲线的绘制 | 第42-43页 |
| ·方法的回收率和重复性试验 | 第43-44页 |
| ·化学比色法测定L-缬氨酸含量 | 第44-47页 |
| ·茚三酮用量的确定 | 第44-45页 |
| ·反应时间的确定 | 第45页 |
| ·测定波长的确定 | 第45-46页 |
| ·副产氨基酸对测定的影响 | 第46页 |
| ·L-缬氨酸标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| ·方法的回收率和重现性试验 | 第47页 |
| ·高速氨基酸分析仪测定L-缬氨酸的含量 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 L-缬氨酸产生菌的诱变育种 | 第51-73页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料 | 第52-56页 |
| ·菌种 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52-54页 |
| ·培养基 | 第54-55页 |
| ·相关溶液 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-60页 |
| ·菌体生长曲线的测定 | 第56页 |
| ·诱变方法 | 第56-58页 |
| ·原生质体紫外诱变 | 第56-57页 |
| ·菌体前培养 | 第56页 |
| ·原生质体形成 | 第56页 |
| ·原生质体再生 | 第56页 |
| ·原生质体形成率和再生率的计算 | 第56-57页 |
| ·原生质体紫外诱变 | 第57页 |
| ·DES诱变 | 第57-58页 |
| ·目的菌株的筛选 | 第58-59页 |
| ·营养缺陷型菌株的筛选 | 第58-59页 |
| ·药物抗性突变株的选育方法 | 第59页 |
| ·筛选方法 | 第59页 |
| ·产L-缬氨酸菌株的初筛 | 第59页 |
| ·产L-缬氨酸菌株的复筛 | 第59页 |
| ·遗传稳定性检验 | 第59-60页 |
| ·分析方法 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-71页 |
| ·出发菌株的选择 | 第60-61页 |
| ·菌体生长曲线的绘制 | 第61页 |
| ·原生质体的形成与再生 | 第61-64页 |
| ·青霉素浓度的确定 | 第62页 |
| ·青霉素预处理时间的确定 | 第62-63页 |
| ·溶菌酶浓度与原生质体形成和再生的关系 | 第63-64页 |
| ·酶解时间与原生质体形成率与再生率的关系 | 第64页 |
| ·诱变条件的选择 | 第64-66页 |
| ·原生质体紫外诱变 | 第64-65页 |
| ·硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第65-66页 |
| ·目的菌株的筛选 | 第66-69页 |
| ·营养缺陷型菌株的筛选 | 第66-67页 |
| ·亮氨酸缺陷型突变株的选育 | 第66页 |
| ·亮氨酸和异亮氨酸双缺突变株的选育 | 第66-67页 |
| ·抗性突变株的选育 | 第67-69页 |
| ·2-噻唑丙氨酸抗性突变株的选育 | 第67页 |
| ·α-氨基丁酸抗性突变株的选育 | 第67-68页 |
| ·磺胺胍抗性突变株的选育 | 第68-69页 |
| ·黄色短杆菌TV2564的育种谱图 | 第69页 |
| ·遗传稳定性及稳产试验 | 第69页 |
| ·诱变育种机理分析 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-73页 |
| 第四章 L-缬氨酸摇瓶分批发酵条件的研究 | 第73-100页 |
| ·引言 | 第73-74页 |
| ·实验材料 | 第74-75页 |
| ·菌种 | 第74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74-75页 |
| ·培养基 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-76页 |
| ·培养方法 | 第75-76页 |
| ·种子生长曲线的测定 | 第76页 |
| ·分析方法 | 第76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-97页 |
| ·应用神经网络和遗传算法优化种子培养基 | 第76-79页 |
| ·试验设计和数据处理 | 第76-78页 |
| ·神经网络模型训练结果 | 第78页 |
| ·利用遗传算法优化种子培养基 | 第78-79页 |
| ·种子培养条件的研究 | 第79-83页 |
| ·种子培养时间的确定 | 第80页 |
| ·吸光度OD_(620)与菌体干重的关系 | 第80-81页 |
| ·种子培养基pH的确定 | 第81页 |
| ·种子培养基最佳装液量的确定 | 第81-82页 |
| ·种子培养温度的确定 | 第82-83页 |
| ·摇瓶发酵培养基组成的单因素试验 | 第83-87页 |
| ·不同碳源对L-缬氨酸发酵的影响 | 第83-84页 |
| ·不同葡萄糖浓度对L-缬氨酸发酵的影响 | 第84页 |
| ·不同氮源对L-缬氨酸发酵的影响 | 第84-85页 |
| ·生物素对发酵的影响 | 第85-86页 |
| ·添加不同氨基酸对发酵的影响 | 第86-87页 |
| ·摇瓶发酵培养基组成的优化试验 | 第87-92页 |
| ·应用Plackett-Burman试验设计法筛选重要因素 | 第87页 |
| ·试验设计及分析结果 | 第87-88页 |
| ·应用响应面分析试验设计法筛选重要因素最优浓度水平 | 第88-92页 |
| ·摇瓶发酵培养条件的研究 | 第92-95页 |
| ·温度对发酵的影响 | 第92-93页 |
| ·pH控制方式的比较 | 第93-94页 |
| ·供氧对L-缬氨酸发酵的影响 | 第94页 |
| ·接种量的确定 | 第94-95页 |
| ·优化条件与初始条件的摇瓶分批发酵比较试验 | 第95-96页 |
| ·优化条件下的摇瓶分批发酵过程曲线 | 第96-97页 |
| ·本章小结 | 第97-100页 |
| 第五章 L-缬氨酸发酵过程的代谢流分析 | 第100-119页 |
| ·前言 | 第100-101页 |
| ·实验材料 | 第101-102页 |
| ·菌种 | 第101页 |
| ·主要仪器 | 第101页 |
| ·主要试剂 | 第101页 |
| ·培养基 | 第101-102页 |
| ·主要溶液 | 第102页 |
| ·实验方法 | 第102页 |
| ·种子培养 | 第102页 |
| ·5L罐发酵培养 | 第102页 |
| ·分析方法 | 第102页 |
| ·数学计算 | 第102页 |
| ·结果与讨论 | 第102-112页 |
| ·基于物流平衡的代谢流分析(MFA)及其理论基础 | 第103-104页 |
| ·分批培养中TV2564代谢网络的构建 | 第104-105页 |
| ·代谢通量的计算 | 第105-106页 |
| ·L-缬氨酸不同发酵时期代谢流分配 | 第106-109页 |
| ·L-缬氨酸5L罐分批发酵过程曲线 | 第106-107页 |
| ·发酵过程主要参数 | 第107-108页 |
| ·L-缬氨酸发酵过程代谢流分析 | 第108-109页 |
| ·L-缬氨酸发酵后期节点代谢流分析 | 第109-110页 |
| ·GLC6P节点代谢流分析 | 第110页 |
| ·PEP节点代谢流分析 | 第110页 |
| ·PYR节点代谢流分析 | 第110页 |
| ·NADPH的产生和消耗 | 第110-111页 |
| ·ATP的产生与消耗 | 第111-112页 |
| ·估算代谢流与理想代谢流比较 | 第112页 |
| ·小结 | 第112-119页 |
| 第六章 5L罐分批发酵过程控制及发酵动力学研究 | 第119-142页 |
| ·引言 | 第119-120页 |
| ·实验材料 | 第120-121页 |
| ·菌种 | 第121页 |
| ·主要仪器 | 第121页 |
| ·主要试剂 | 第121页 |
| ·培养基 | 第121页 |
| ·主要溶液 | 第121页 |
| ·实验方法 | 第121-122页 |
| ·种子培养 | 第121页 |
| ·5L罐发酵 | 第121页 |
| ·分批发酵动力学模型的建立 | 第121页 |
| ·分析方法 | 第121-122页 |
| ·结果与讨论 | 第122-133页 |
| ·溶氧对L-缬氨酸发酵的影响 | 第122-126页 |
| ·摇瓶溶氧系数的测定 | 第122页 |
| ·5L发酵罐溶氧系数的测定 | 第122-123页 |
| ·TV2564分批发酵过程溶氧变化情况 | 第123-124页 |
| ·不同溶氧对5L罐分批发酵的影响 | 第124-125页 |
| ·分阶段供氧控制模式的提出 | 第125-126页 |
| ·发酵过程的动力学分析 | 第125页 |
| ·分批发酵过程的溶氧控制 | 第125-126页 |
| ·分阶段供氧控制模式的试验验证 | 第126页 |
| ·发酵过程菌体形态变化 | 第126-128页 |
| ·分批发酵动力学模型 | 第128-133页 |
| ·BP网络结构 | 第128页 |
| ·模型的建立 | 第128-132页 |
| ·菌体浓度的神经网络模型Ⅰ | 第128-130页 |
| ·基质浓度的神经网络模型Ⅱ | 第130-131页 |
| ·L-缬氨酸浓度的神经网络模型Ⅲ | 第131-132页 |
| ·模型适用范围的评价 | 第132-133页 |
| ·本章小结 | 第133-142页 |
| 第七章 L-缬氨酸补料分批发酵的研究 | 第142-153页 |
| ·引言 | 第142-143页 |
| ·实验材料 | 第143-144页 |
| ·菌种 | 第143页 |
| ·主要仪器 | 第143页 |
| ·主要试剂 | 第143页 |
| ·培养基 | 第143-144页 |
| ·发酵培养基 | 第143-144页 |
| ·实验方法 | 第144页 |
| ·种子培养方法 | 第144页 |
| ·摇瓶补料发酵方法 | 第144页 |
| ·5L罐补料分批发酵方法 | 第144页 |
| ·分析方法 | 第144页 |
| ·结果与讨论 | 第144-151页 |
| ·分批培养中不同初糖浓度与L-缬氨酸积累的关系 | 第144-146页 |
| ·选择补料分批发酵的依据 | 第146页 |
| ·摇瓶补料分批发酵的研究 | 第146-147页 |
| ·5L罐补料分批发酵的研究 | 第147-149页 |
| ·葡萄糖流加方式对发酵的影响 | 第147页 |
| ·补料分批培养中氮的供给对L-缬氨酸发酵的影响 | 第147-149页 |
| ·不同发酵方式的发酵试验结果比较 | 第149-150页 |
| ·菌株TV2564 L-缬氨酸发酵的最大糖酸转化率 | 第150-151页 |
| ·本章小结 | 第151-153页 |
| 第八章 总结与展望 | 第153-158页 |
| ·全文总结 | 第153-156页 |
| ·本论文创新点 | 第156页 |
| ·展望 | 第156-158页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第158-160页 |
| 致谢 | 第160-161页 |
