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中国葡萄属野生种抗白粉病基因cDNA克隆及序列分析

英文缩略词第1-8页
摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
第一章 文献综述第12-34页
   ·葡萄白粉病第12-15页
     ·白粉病的起源和分布第12页
     ·白粉菌的生物学特性第12页
     ·白粉病的发生第12-13页
       ·症状第12-13页
       ·发生流行规律第13页
     ·白粉病的防治第13-15页
       ·化学防治第13-14页
       ·抗性种质的利用第14-15页
   ·葡萄白粉病抗病性研究第15-19页
     ·抗病性概述第15-16页
     ·组织结构和形态学研究第16页
     ·生理生化学研究第16-17页
     ·遗传学研究第17-18页
     ·分子生物学研究第18-19页
   ·植物抗病基因的研究第19-28页
     ·植物抗病的分子生物学机制第19-20页
       ·抗病基因第19-20页
       ·防卫基因第20页
     ·防卫反应类型第20-21页
     ·抗病基因克隆方法第21-23页
       ·转座子标签第21-22页
       ·图位克隆第22页
       ·抗病基因同源序列克隆第22-23页
     ·植物抗白粉病研究进展第23-25页
       ·小麦抗白粉病基因第23-24页
       ·大麦抗白粉病基因第24-25页
       ·拟南芥抗白粉病基因第25页
     ·分子生物技术在抗白粉病基因研究上的应用第25-28页
       ·分子标记第26-27页
       ·定位作图第27页
       ·基因克隆第27-28页
       ·遗传转化第28页
   ·果树差异表达基因的克隆研究第28-32页
     ·代表性差示分析第29页
     ·抑制消减杂交第29-30页
     ·差异显示技术第30-32页
       ·果树发育基因的克隆研究第31-32页
       ·果树抗性基因的克隆研究第32页
   ·本研究的目的和意义第32-34页
第二章 材料与方法第34-42页
   ·试验材料第34页
   ·实验方法第34-42页
     ·病原菌孢子萌发实验第34页
     ·田间人工接种葡萄白粉病病原菌诱导发病第34-35页
     ·葡萄材料总RNA提取第35-36页
       ·改进的异硫氰酸胍法第35页
       ·改进的市售试剂盒法第35页
       ·改进的SDS/酚法第35-36页
       ·总RNA的纯化和检测第36页
     ·合成cDNA第一链第36-37页
     ·DDRT-PCR第37页
     ·测序胶电泳第37-38页
     ·银染第38页
     ·差异cDNA回收和二次PCR扩增第38页
     ·二次PCR产物回收第38页
     ·Northern杂交分析第38-40页
       ·探针的制备及标记效率的检测第38-39页
       ·RNA甲醛变性电泳第39页
       ·转膜和固定第39页
       ·杂交和洗膜第39-40页
       ·酶联免疫显色第40页
     ·差异cDNA的克隆第40-41页
       ·cDNA与载体的连接反应第40页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第40-41页
       ·连接产物的转化第41页
       ·重组质粒的筛选和鉴定第41页
     ·cDNA测序及同源性分析第41-42页
       ·序列测定第41页
       ·序列结构分析和同源性比较第41-42页
第三章 结果与分析第42-58页
   ·白粉菌室内萌发结果第42页
   ·田间人工接种白粉菌诱导发病的结果第42页
   ·葡萄总RNA提取结果第42-43页
   ·DDRT-PCR反应体系优化第43-45页
   ·葡萄抗白粉病基因差异片段的获得第45-48页
   ·差异cDNA在抗、感病材料间的表现第48-50页
   ·二次PCR扩增结果第50页
   ·Northern杂交分析结果第50-52页
     ·假阳性片段的排除第50-51页
     ·葡萄抗白粉病基因的表达第51-52页
   ·重组子鉴定第52页
   ·cDNA测序结果第52-54页
   ·cDNA序列结构分析和同源性比较第54-58页
第四章 讨论第58-66页
   ·葡萄抗白粉病的研究第58-59页
   ·葡萄抗白粉病基因差异显示技术体系的建立第59-61页
     ·葡萄总RNA的分离提取第59-60页
     ·葡萄差异显示技术体系的建立第60-61页
   ·葡萄抗白粉病基因cDNA克隆和测序分析第61-62页
   ·葡萄抗白粉病基因cDNA序列同源性与功能分析第62-63页
   ·差异显示技术克隆果树功能基因的应用第63-64页
   ·中国葡萄属野生种抗白粉病基因克隆与利用第64-66页
第五章 结论第66-68页
参考文献第68-81页
致谢第81-82页
作者简介第82页

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