| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-18页 |
| 缩写 | 第18-19页 |
| 论文正文 | 第19-68页 |
| 第一章 材料 | 第19-23页 |
| 1 细胞及其培养基 | 第19页 |
| 2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 4 主要消耗性材料 | 第21页 |
| 5 主要溶液和缓冲液 | 第21-23页 |
| 第二章 MEKK1/IKK途径介导长春碱类药物诱导肿瘤细胞凋亡 | 第23-32页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·细胞培养和药物 | 第23页 |
| ·DNA降解分析 | 第23-24页 |
| ·PI染色法和流式细胞仪检测 | 第24页 |
| ·制备GST-IκBα溶合蛋白 | 第24页 |
| ·核蛋白提取及EMSAs | 第24页 |
| ·免疫沉淀及IκB激酶检测 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-26页 |
| ·长春碱和长春新碱诱导BCap37、KB细胞凋亡及G_2/M期阻滞 | 第24-25页 |
| ·长春碱和长春新碱降解IκBα蛋白 | 第25页 |
| ·长春碱和长春新碱诱导NF-κB激活 | 第25页 |
| ·长春碱和长春新碱能上调IKK酶活性 | 第25页 |
| ·长春碱类药物能上调MEKK1蛋白水平 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 5 结论 | 第27页 |
| 6 参考文献 | 第27-28页 |
| 7 图表说明 | 第28-32页 |
| 第三章 突变IκB-α基因对长春碱诱导乳腺癌细胞凋亡的影响 | 第32-43页 |
| 1 前言 | 第32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-34页 |
| ·细胞培养和药物 | 第32页 |
| ·构建突变IκB-α-pCDNA3.1(-)载体、转染细胞及克隆选择 | 第32-33页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第33页 |
| ·核蛋白提取及EMSAs | 第33页 |
| ·DNA降解分析 | 第33页 |
| ·PI染色法和流式细胞仪检测 | 第33-34页 |
| ·MTT检测 | 第34页 |
| ·统计检验 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-35页 |
| ·长春碱和长春新碱降解IκB-α蛋白 | 第34页 |
| ·突变IκB-α-pCDNA3.1(-)转染及阳性克隆选择 | 第34页 |
| ·长春碱和长春新碱不能磷酸化降解突变IκB-α蛋白 | 第34页 |
| ·突变IκB-α基因抑制由长春碱和长春新碱诱导的NF-κB激活 | 第34-35页 |
| ·突变IκB-α基因抑制由长春碱和长春新碱诱导的肿瘤细胞的凋亡 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 6 参考文献 | 第37-39页 |
| 7 图表说明 | 第39-43页 |
| 第四章 Parthenolide抑制紫杉醇诱导的肿瘤细胞凋亡 | 第43-51页 |
| 1 前言 | 第43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-45页 |
| ·细胞培养和药物 | 第43-44页 |
| ·DNA降解分析 | 第44页 |
| ·PI染色法和流式细胞仪检测 | 第44页 |
| ·细胞甩片及光镜检查 | 第44页 |
| ·MTT试验 | 第44页 |
| ·核蛋白提取及凝胶阻滞实验(EMSAs) | 第44-45页 |
| ·统计检验 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-46页 |
| ·Parthenolide对细胞增殖的影响 | 第45页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇诱导凋亡 | 第45页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇诱导的NF-κB激活 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46页 |
| 5 结论 | 第46页 |
| 6 参考文献 | 第46-48页 |
| 7 图表说明 | 第48-51页 |
| 第五章 Parthenolide阻断IKK途径抑制紫杉醇诱导的乳腺癌细胞凋亡 | 第51-60页 |
| 1 前言 | 第51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-53页 |
| ·细胞培养和药物 | 第51页 |
| ·PI染色法和流式细胞仪检测 | 第51页 |
| ·细胞甩片法及光镜检查 | 第51-52页 |
| ·免疫细胞化学 | 第52页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第52页 |
| ·免疫沉淀(IP)和IκB激酶检测 | 第52页 |
| ·统计检验 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇诱导凋亡 | 第53页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇诱导NF-κB激活并转移至细胞核 | 第53页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇所诱导的IκB-α蛋白降解 | 第53页 |
| ·Parthenolide抑制紫杉醇所诱导的IKK激活 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-56页 |
| 7 图表说明 | 第56-60页 |
| 第六章 Caspase-3抑制剂减弱紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡 | 第60-68页 |
| 1 前言 | 第60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·细胞培养和药物 | 第60页 |
| ·DNA降解分析 | 第60-61页 |
| ·MTT检测 | 第61页 |
| ·PI染色法和流式细胞仪检测 | 第61页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第61页 |
| ·核蛋白提取及凝胶阻滞实验(EMSAs) | 第61-62页 |
| ·统计学方法 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62页 |
| ·DEVD-CHO能提高细胞生存率 | 第62页 |
| ·DEVD-CHO能抑制紫杉醇诱导的“DNA梯状凋亡条带” | 第62页 |
| ·DEVD-CHO能抑制紫杉醇诱导肿瘤细胞出现亚二倍体峰 | 第62页 |
| ·DEVD-CHO能抑制由紫杉醇诱导的原Caspase-3和PARP裂解 | 第62页 |
| ·DEVD-CHO抑制紫杉醇诱导的NF-κB激活 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-65页 |
| 7 图表说明 | 第65-68页 |
| 综述一 树突状细胞瘤苗在乳腺癌治疗中的前景 | 第68-72页 |
| 综述二 核因子-kappaB在肿瘤治疗中的作用机制及应用前景 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
