| 前言 | 第1-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-22页 |
| ·基因治疗 | 第7-8页 |
| ·质粒载体 | 第8-10页 |
| ·质粒载体的发酵生产 | 第10-12页 |
| ·质粒菌培养的影响因素 | 第10-11页 |
| ·质粒菌的高密度发酵 | 第11-12页 |
| ·质粒载体的分离纯化 | 第12-16页 |
| ·细胞裂解 | 第13-14页 |
| ·质粒制备液的净化和浓缩 | 第14-15页 |
| ·质粒的纯化策略 | 第15页 |
| ·质粒DNA的其它纯化方法 | 第15-16页 |
| ·色谱纯化质粒的原理及应用特点 | 第16-22页 |
| ·离子交换色谱 | 第17-18页 |
| ·空间排阻色谱 | 第18-19页 |
| ·反相色谱 | 第19-20页 |
| ·离子对反相色谱 | 第20页 |
| ·亲和色谱 | 第20-22页 |
| 第二章 质粒菌摇瓶培养条件的优化 | 第22-31页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌种及质粒DNA | 第22-23页 |
| ·主要的实验药品 | 第23页 |
| ·主要的实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-25页 |
| ·含质粒pcDNA3的大肠杆菌菌株DH5α的摇瓶培养 | 第23-25页 |
| ·质粒菌生长曲线及最佳收获质粒时间的确定 | 第25页 |
| ·摇瓶正交实验结果与讨论 | 第25-31页 |
| ·正交实验结果 | 第25-27页 |
| ·关于摇瓶培养实验结果的讨论 | 第27页 |
| ·质粒菌生长曲线及最佳收获质粒时间的确定 | 第27-31页 |
| 第三章 质粒菌发酵罐高密度培养工艺的研究 | 第31-40页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·质粒、载体及菌株 | 第31页 |
| ·培养基组成 | 第31页 |
| ·实验主要药品 | 第31-32页 |
| ·实验主要设备 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-36页 |
| ·发酵实验过程 | 第32-33页 |
| ·发酵罐监测控制系统 | 第33页 |
| ·分析方法 | 第33-36页 |
| ·发酵结果与讨论 | 第36-40页 |
| ·间歇发酵实验结果与讨论 | 第36-37页 |
| ·流加高密度发酵实验结果与讨论 | 第37-40页 |
| 第四章 质粒的分离纯化 | 第40-46页 |
| ·实验材料与仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·质粒的碱裂解法 | 第40-41页 |
| ·质粒DNA的色谱纯化 | 第41页 |
| ·阴离子交换色谱分离质粒DNA的过程优化结果 | 第41-46页 |
| ·用TE和STE缓冲液作为流动相洗脱质粒 | 第41-43页 |
| ·用KAc－HAc，TSE，Na3PO4缓冲液作为流动相洗脱质粒 | 第43-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·改进实验的设想 | 第46-47页 |
| 附录 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52页 |