致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-37页 |
一、 双生病毒的基本性质 | 第11-25页 |
1 分类、地理分布及其基本特征 | 第11-17页 |
1.1 玉米线条病毒属 | 第14-15页 |
1.2 曲顶病毒属 | 第15页 |
1.3 番茄伪曲顶病毒属 | 第15-16页 |
1.4 菜豆金色花叶病毒属 | 第16-17页 |
2 症状及传播 | 第17-19页 |
2.1 症状及寄主范围 | 第17-18页 |
2.2 传播 | 第18-19页 |
3 双生病毒基因组成及其功能 | 第19-25页 |
3.1 AC1基因的功能 | 第20页 |
3.2 AC2基因的功能 | 第20-21页 |
3.3 AC3基因的功能 | 第21-22页 |
3.4 AC4基因的功能 | 第22页 |
3.5 AV2基因的功能 | 第22页 |
3.6 AV1(CP)基因的功能 | 第22-23页 |
3.7 BV1和BC1基因的功能 | 第23-24页 |
3.8 双生病毒复制及转录调控的相关序列 | 第24-25页 |
二、 双生病毒的复制及其调控 | 第25-32页 |
1 双生病毒基因组的复制 | 第25-29页 |
1.1 病毒复制的场所 | 第25-26页 |
1.2 病毒复制机制 | 第26-29页 |
2 双生病毒基因组的转录与调控 | 第29-32页 |
2.1 病毒基因组的转录 | 第29-30页 |
2.2 病毒基因组的转录调控 | 第30-32页 |
三、 其它方面研究进展 | 第32-35页 |
1 双生病毒进化变异 | 第32-34页 |
2 基因工程抗病性 | 第34页 |
3 双生病毒作为基因表达载体 | 第34-35页 |
四、 本研究的目的和意义 | 第35-37页 |
第二部分 实验内容 | 第37-68页 |
第一章 材料与方法 | 第38-44页 |
1 试验材料 | 第38-39页 |
1.1 染病杂草材料 | 第38页 |
1.2 抗血清 | 第38页 |
1.3 菌种与质粒 | 第38页 |
1.4 常用缓冲液的配制 | 第38页 |
1.5 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第38-39页 |
2 试验方法 | 第39-44页 |
2.1 免疫学方法—三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA) | 第39页 |
2.2 病毒基因组DNA的提取 | 第39页 |
2.3 一般PCR反应 | 第39-40页 |
2.4 PCR产物纯化 | 第40页 |
2.5 PCR产物的克隆 | 第40-41页 |
2.6 重组克隆的筛选与鉴定 | 第41-43页 |
2.7 序列测定 | 第43页 |
2.8 序列分析 | 第43-44页 |
第二章 杂草上双生病毒的检测 | 第44-49页 |
1 材料与方法 | 第45-46页 |
1.1 染病杂草植物材料 | 第45页 |
1.2 其他材料 | 第45页 |
1.3 植物基因组DNA的提取及PCR扩增 | 第45页 |
1.4 双生病毒的血清学检测 | 第45页 |
1.5 双生病毒的特异性PCR检测 | 第45-46页 |
2 实验结果 | 第46-47页 |
2.1 双生病毒TAS-ELISA检测 | 第46页 |
2.2 双生病毒500bp片段的特异性PCR检测 | 第46-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第三章 杂草上双生病毒的非编码区及外壳蛋白的部分序列分析 | 第49-53页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
1.1 染病杂草材料 | 第49页 |
1.2 其它材料 | 第49页 |
1.3 双生病毒的特异性PCR检测 | 第49页 |
1.4 PAPB扩增产物的克隆测序与分析 | 第49-50页 |
2 实验结果与讨论 | 第50-53页 |
第四章 稀硷(Siegesbeckia orientalis L.)杂草上双生病毒的分子鉴定 | 第53-60页 |
1 材料与方法 | 第53-55页 |
1.1 感病杂草材料 | 第53页 |
1.2 其他材料 | 第53页 |
1.3 PCR扩增及扩增产物克隆 | 第53-54页 |
1.4 DNA序列测定及序列分析 | 第54-55页 |
2 结果 | 第55-59页 |
2.1 X2分离物的全长DNA-A基因组克隆 | 第55页 |
2.2 X2分离物的全长DNA-A序列 | 第55-58页 |
2.3 X2分离物的DNA-A与其它双生病毒的比较 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
第五章 赛葵(Malvastrum coromandelianum)上双生病毒的分子鉴定 | 第60-68页 |
1 材料与方法 | 第60-62页 |
1.1 感病植物材料 | 第60页 |
1.2 其他材料 | 第60页 |
1.3 PCR扩增及扩增产物克隆 | 第60-61页 |
1.4 DNA序列测定及序列分析 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-66页 |
2.1 构建VA2分离物的全长基因组克隆 | 第62页 |
2.2 病毒基因组DNA-A结构分析 | 第62-65页 |
2.3 VA2 DNA-A与其它双生病毒的比较 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
附录 | 第76-81页 |
附录A: 常见缩略符号含义 | 第76-77页 |
附录B: 常用缓冲液的配制 | 第77-80页 |
附录C: 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第80-81页 |