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基因工程改良杂交籼稻的抗虫性

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
本文缩略词第10-12页
前言第12-13页
Ⅰ. 文献综述第13-33页
 1. 水稻转基因研究进展第13-22页
  1.1. 水稻遗传转化方法研究进展第13-15页
  1.2. 目的基因研究进展第15-21页
  1.3. 报告基因和筛选标记基因研究进展第21-22页
  1.4. 外源基因表达调控研究进展第22页
 2. 转基因沉默及其控制策略研究进展第22-25页
  2.1. DNA甲基化造成的外源基因沉默及其控制策略第23页
  2.2. 重复序列诱发转基因失活及其控制策略第23-24页
  2.3. 反式失活及其控制策略第24-25页
  2.4. 共抑制引起的基因失活及其控制策略第25页
 3. 核基质结合区(MARs)的研究进展第25-28页
  3.1. MARs的分类第26页
  3.2. MARs的结构第26-27页
  3.3. MARs在转基因中的功能第27-28页
 4. 无选择标记转基因植物研究进展第28-32页
  4.1. 在转基因植物中去除选择标记基因的必要性第28-29页
  4.2. 去除选择标记基因的策略第29-32页
 5. 本文立题思想第32-33页
Ⅱ. 材料与方法第33-51页
 1. 实验材料第33-34页
  1.1. 受体水稻材料第33页
  1.2. 供体质粒第33-34页
  1.3. 供试菌株第34页
 2. 重要仪器设备第34-35页
 3. 重要试剂与溶液第35-39页
  3.1. 重要试剂第35-36页
  3.2. 检测溶液(或试剂)第36-39页
 4. 培养基配制第39-41页
 5. 实验方法第41-51页
  5.1. 水稻愈伤组织的诱导第41-42页
  5.2. 基因枪介导法转化水稻第42-43页
  5.3. 农杆菌介导法转化水稻第43-44页
  5.4. pCDMARUSCK-HPT的构建方法第44页
  5.5. 转基因的分子鉴定第44-46页
  5.6. 外源基因表达产物检测第46-49页
  5.7. 转基因水稻农艺性状考查第49页
  5.8. 子代潮霉素抗性遗传分析第49页
  5.9. 转基因植株抗虫性分析第49-51页
Ⅲ. 试验结果与分析第51-87页
 1. 水稻遗传转化系统的建立和优化第51-57页
  1.1. 愈伤组织的诱导第51-52页
  1.2. 水稻不同外殖体愈伤组织继代活力的比较第52页
  1.3. 水稻愈伤组织的分化能力第52-53页
  1.4. 继代次数对水稻愈伤组织分化能力的影响第53-55页
  1.5. 干燥处理对水稻愈伤组织分化能力的影响第55页
  1.6. 头孢霉素对胚性愈伤组织继代的影响第55页
  1.7. 潮霉素对胚性愈伤组织继代的影响第55-56页
  1.8. 头孢霉素对胚性愈伤组织分化再生的影响第56页
  1.9. 潮霉素对转化胚性愈伤组织分化的影响第56-57页
 2. 潮霉素抗性植株的获得第57-60页
  2.1. 基因枪介导法转基因水稻植株的获得第57-58页
  2.2. 农杆菌介导法转基因水稻植株的获得第58-60页
 3. 去除选择标记基因植物表达载体的构建及水稻转化第60-62页
  3.1. 双T-DNA植物表达载体的构建第60页
  3.2. 双T-DNA载体转化水稻植株的获得第60-61页
  3.3. 转基因T0植株目的基因与选择标记基因共转化频率第61页
  3.4. 转化植株后代目的基因与选择标记基因的分离结果第61-62页
 4. 转基因植株的分子鉴定第62-73页
  4.1. 转基因植株的PCR分析第62-69页
  4.2. 转基因植株的PCR-Southern blotting分析第69-71页
  4.3. 转基因植株基因组Southem blotting检测第71-73页
 5. 转基因的遗传稳定性分析第73-75页
  5.1. 转基因植株的潮霉素抗性分析第73-74页
  5.2. 抗虫基因与潮霉素抗性基因的遗传一致性分析第74-75页
 6. 目的基因表达研究第75-76页
  6.1. 转sck基因水稻的豇豆胰蛋白酶抑制剂活性测定结果第75页
  6.2. Western blotting分析第75页
  6.3. 植物凝集素活性检测第75-76页
 7. 核基质结合区(MARs)对转基因表达的影响第76-77页
 8. 抗性基因的聚合第77-79页
 9. 转基因水稻材料的田间农艺性状第79-81页
  9.1. 转gna恢复系SH527的田间农艺第79页
  9.2. 转sck广亲合系W2008的农艺性状第79-80页
  9.3. 其它转基因植株的一些农艺性状第80-81页
 10. 转基因水稻的抗虫性第81-83页
  10.1. 转基因水稻的室内抗虫性测定结果第81-82页
  10.2. 转基因植株的田间抗虫性第82-83页
 11. 转基因杂交稻的配制第83-87页
  11.1. 转基因杂交稻亲本抗虫基因的纯合第83-84页
  11.2. 转抗虫基因杂交稻的农艺性状第84-85页
  11.3. 杂交稻外源基因的分子检测第85-86页
  11.4. 外源基因在杂交稻中的表达第86-87页
Ⅳ. 讨论第87-94页
 1. 水稻遗传转化受体系统第87-88页
 2. 水稻遗传转化方法第88-89页
 3. 外源基因在转基因植株中的遗传稳定性第89页
 4. 稳定和提高外源基因的表达第89-90页
 5. 克服转基因中选择标记基因的安全隐患第90-91页
 6. 转基因在杂交稻育种中的运用第91-94页
Ⅴ. 结论第94-95页
Ⅵ. 参考文献第95-108页
Ⅶ. 附录第108-122页
 附表1: 水稻转基因一览表第108-116页
 附表2: 转基因水稻的农艺性状第116-120页
 附表3: 含sck转基因水稻的豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)含量第120-121页
 附图1: 双T-DNA植物载体pCDMARUSCKP-HPT的构建过程第121-122页
在学期间发表论文第122-123页
致谢第123页

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