| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-20页 |
| 第一部分 六种rhuGM-CSF／IL-6融合蛋白基因的克隆,表达及纯化 | 第20-51页 |
| 一、实验材料 | 第20-21页 |
| 二、实验方法 | 第21-28页 |
| (一)、引物的设计与合成 | 第21-23页 |
| (二)、PCR扩增获得目的基因 | 第23页 |
| (三)、pUC18融合蛋白基因重组克隆载体的构建,筛选和鉴定 | 第23-26页 |
| (四)、DNA序列分析 | 第26页 |
| (五)、pBV220融合蛋白基因表达载体的构建及表达菌种的获得 | 第26页 |
| (六)、融合蛋白的诱导表达及表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第26页 |
| (七)、融合蛋白表达产物的Western Blot分析 | 第26页 |
| (八)、表达产物的复性及纯化 | 第26-27页 |
| (九)、蛋白纯度,分子量及含量的初步测定 | 第27-28页 |
| 三、结果 | 第28-47页 |
| (一)、PCR产物的鉴定 | 第28-30页 |
| (二)、pBV220融合蛋白基因重组表达载体的构建和鉴定 | 第30-36页 |
| (三)、融合蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
| (四)、融合蛋白在DH5α中表达产物的Western blot分析 | 第37-39页 |
| (五)、六种融合蛋白的纯化及复性 | 第39-47页 |
| 四、讨论 | 第47-51页 |
| 第二部分 六种rhuGM-CSF／IL-6融合蛋白的生物学活性及毒性研究 | 第51-77页 |
| 一、实验材料 | 第51-52页 |
| 二、实验方法 | 第52-55页 |
| (一)、六种融合蛋白体外生物学活性的测定 | 第52-53页 |
| (二)、六种融合蛋白的动物体内药效学实验 | 第53-54页 |
| (三)、毒性实验 | 第54-55页 |
| (四)、统计学处理 | 第55页 |
| 三、结果和分析 | 第55-72页 |
| (一)、六种融合蛋白体外活性测定结果及比较 | 第55-60页 |
| (二)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠体重的影响 | 第60-61页 |
| (三)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠胸腺重的影响 | 第61-63页 |
| (四)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠脾重的影响 | 第63-65页 |
| (五)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠白细胞、红细胞和血小板的影响 | 第65-66页 |
| (六)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠骨髓有核细胞和单核细胞数的影响 | 第66-68页 |
| (七)、六种融合蛋白分别对注射环磷酰胺小鼠CFU-GM的影响 | 第68-71页 |
| (八)、毒性实验 | 第71-72页 |
| 四、讨论 | 第72-77页 |
| 小结 | 第77-79页 |
| 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 论文综述1 | 第91-102页 |
| 论文综述1 参考文献 | 第102-107页 |
| 论文综述2 | 第107-119页 |
| 论文综述2 参考文献 | 第119-125页 |
| 附录 | 第125-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 研究生简介 | 第141页 |
