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AGP小亚基反义基因导入魔芋研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
第一部分 文献综述第10-22页
 1. 淀粉生物合成的研究概况第10-13页
  1.1 淀粉生物合成的场所和途径第10页
  1.2 参与淀粉生物合成的酶第10-11页
  1.3 ADP葡糖糖焦磷酸化酶及其基因的研究进展第11-13页
 2. 植物反义RNA研究进展第13-15页
  2.1 反义RNA的发现第13页
  2.2 反义RNA的作用机理第13页
  2.3 植物反义RNA技术的应用第13-15页
  2.4 反义RNA技术展望第15页
 3. 基因枪法和农杆菌介导的遗传转化研究进展第15-21页
  3.1 基因枪法介导的植物遗传转化研究进展第16-18页
   3.1.1 基因枪法的提出第16页
   3.1.2 基因枪法的转化机理第16页
   3.1.3 影响因素探讨第16-18页
   3.1.4 基因枪转化技术展望第18页
  3.2 杆曲介导的遗传转化研究进展第18-21页
   3.2.1 转化机理第18-19页
   3.2.2 农杆菌介导的基因转移方法第19页
   3.2.3 影响农杆菌转化效率的因素第19-21页
 引言第21-22页
第二部分 AGPS1反义表达载体的构建第22-30页
 1. 材料与方法第22-26页
  1.1 材料第22页
  1.2 实验方法第22-26页
   1.2.1 大肠杆菌质粒DNA的提取,感受态的制备及转化第22-23页
   1.2.2 质粒DNA酶切,目的片段的回收及连接第23页
   1.2.3 农杆菌感受态细胞的制备,转化及质粒DNA的提取第23-24页
   1.2.4 PCR扩增第24-26页
 2. 结果与分析第26-28页
  2.1 表达载体pBIN—AGPS1的构建及转化第26页
  2.2 表达载体pPAT—AGPS1的构建及转化第26-28页
 3. 讨论第28-30页
第三部 AGPS1反义基因对魔芋的遗传转化第30-45页
 1. 农杆菌介导的魔芋遗传转化第30-39页
  1.1 材料与方法第30-34页
   1.1.1 材料第30页
   1.1.2 方法第30-34页
    1.1.2.1 无菌材料的获得第30-31页
    1.1.2.2 农杆菌的培养与活化第31页
    1.1.2.3 Kan选择压确定第31页
    1.1.2.4 抑菌剂浓度对芽分化的影响第31页
    1.1.2.5 转化方法第31页
    1.1.2.6 抗性植株的PCR检测第31-33页
    1.1.2.7 转化植株的PCR-Southern检测第33-34页
  1.2 结果与分析第34-38页
   1.2.1 转化系统第34-36页
    1.2.1.1 Kan筛选压的确定:第34-35页
    1.2.1.2 抑菌剂(carb)浓度对魔芋愈伤芽分化的影响第35页
    1.2.1.3 预养时间对转化的影响第35-36页
   1.2.2 转化子的初步筛选结果第36页
   1.2.3 抗性植株的PCR检测第36-38页
   1.2.4 转基因植株的PCR—Southern检测第38页
  1.3 讨论第38-39页
   1.3.1 影响农杆菌转化魔芋的因素第38页
   1.3.2 魔芋基因组DNA的提取第38-39页
   1.3.3 抗性植株的PCR和PCR—Southern检测第39页
 2. 基因枪法介导的魔芋遗传转化第39-45页
  2.1 材料与方法第39-41页
   2.1.1 材料第39页
   2.1.2 实验方法第39-41页
    2.1.2.1 微弹的制备第39-40页
    2.1.2.2 基因枪轰击第40页
    2.1.2.3 轰击前后材料的处理第40页
    2.1.2.4 轰击后转化子的筛选第40页
    2.1.2.5 受体材料对Basta的敏感性实验第40页
    2.1.2.6 最适的氦气压力及轰击距离第40页
    2.1.2.7 抗性芽的PCR检测第40-41页
    2.1.2.8 抗性芽的pat基因检测第41页
  2.2 结果与分析第41-44页
   2.2.1 Basta对魔芋愈伤分化的影响第41-42页
   2.2.2 轰击的氦气压力及轰击距离对转化的影响第42页
   2.2.3 转化体的筛选和抗性植株的获得第42-43页
   2.2.4 抗性芽的PCR检测第43-44页
    2.2.4.1 抗性芽的AGPS1反义基因的PCR检测第43页
    2.2.4.2 抗性芽的Pat基因检测第43-44页
  2.3 讨论第44-45页
结论第45-46页
参考文献第46-51页
缩写词第51-52页
发表论文第52-53页
致谢第53页

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