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农杆菌介导几丁质酶基因转化大豆子叶节主要影响因素的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
1. 前言第8-22页
 1.1 研究的目的及意义第8页
 1.2 文献综述第8-21页
  1.2.1 几丁质酶基因与植物抗病基因工程第8-11页
  1.2.2 大豆再生体系的建立与完善第11-13页
  1.2.3 大豆遗传转化的研究进展第13-21页
 1.3 展望第21-22页
2. 材料与方法第22-30页
 2.1 供试材料第22-23页
  2.1.1 植物材料第22页
  2.1.2 外植体第22页
  2.1.3 农杆菌菌株第22-23页
  2.1.4 PCR检测材料第23页
 2.2 方法第23-30页
  2.2.1 外植体获得第23-24页
  2.2.2 大豆子叶节高效再生体系的建立第24页
  2.2.3 选择压的确定第24-25页
  2.2.4 除菌剂及其浓度的确定第25页
  2.2.5 农杆菌介导大豆子叶节的遗传转化第25-28页
  2.2.6 PCR检测第28-29页
  2.2.7 数据统计分析方法第29-30页
3. 结果与分析第30-46页
 3.1 大豆子叶节高效再生体系的建立第30-33页
  3.1.1 大豆不同基因型子叶节丛生芽分化的差异第30页
  3.1.2 不同的BA浓度对子叶节丛生芽分化的影响第30页
  3.1.3 外植体大小对子叶节丛生芽分化的影响第30-32页
  3.1.4 生根培养基筛选第32-33页
 3.2 作为选择压力的抗生素的种类及浓度的确定第33-38页
  3.2.1 新霉素(Neo)筛选浓度的确定第33-36页
  3.2.2 卡那霉素(Km)的筛选浓度的确定第36-38页
 3.3 除菌剂及其浓度确定第38-39页
  3.3.1 头孢唑啉钠(Cef)对大豆子叶节丛生芽分化的影响第38页
  3.3.2 头孢唑啉钠(Cef)对大豆子叶节丛生芽生根的影响第38-39页
 3.4 农杆菌介导遗传转化第39-45页
  3.4.1 LBA4404和EHA105生长曲线的测定第39-40页
  3.4.2 遗传转化时超声波辅助处理时间范围的确定第40-42页
  3.4.3 不同外植体基因型对遗传转化的影响第42-43页
  3.4.4 不同菌株对遗传转化的影响第43页
  3.4.5 农杆菌介导遗传转化的四个重要影响因素的正交实验第43-45页
 3.5 转化体的PCR检测第45-46页
4. 讨论第46-50页
5. 结论第50-51页
6. 致谢第51-52页
参考文献第52-59页
附录1第59-61页
附录2第61-63页
附录3第63-64页
附录4第64-65页
图  版第65-73页

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