摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词表 | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-30页 |
1.G蛋白偶联受体 | 第15-21页 |
1.1 G蛋白偶联受体的结构 | 第15-16页 |
1.2 G蛋白偶联受体的信号传导 | 第16-18页 |
1.3 G蛋白偶联受体的功能 | 第18-19页 |
1.4 G蛋白偶联受体GPR84 | 第19-21页 |
2.自然杀伤细胞(NK细胞)的发育、成熟和功能 | 第21-27页 |
2.1 NK细胞的简介 | 第21-23页 |
2.2 细胞的发育成熟 | 第23-25页 |
2.3 NK细胞的免疫调控 | 第25-27页 |
3.mTOR信号通路 | 第27-30页 |
第二章 G蛋白偶联受体GPR84对NK细胞发育成熟影响的研究 | 第30-61页 |
引言 | 第30-31页 |
1.实验材料 | 第31-40页 |
1.1 实验动物及饲养 | 第31页 |
1.2 实验细胞及培养 | 第31-33页 |
1.3 实验试剂及配方 | 第33-38页 |
1.4 实验仪器 | 第38-39页 |
1.5 实验耗材 | 第39-40页 |
2.实验方法 | 第40-49页 |
2.1 GPR84基因敲除小鼠的鉴定 | 第40-42页 |
2.2 小鼠脾脏、肝脏、肺脏、骨髓、淋巴结单核细胞的提取 | 第42-44页 |
2.3 小鼠各种免疫细胞流式检测 | 第44-45页 |
2.4 小鼠脾脏NK细胞的流式分选 | 第45页 |
2.5 人外周血PBMC分离与NK细胞的流式分选 | 第45-46页 |
2.6 RNA提取(使用RNase Free耗材) | 第46页 |
2.7 RNA反转录与实时定量PCR | 第46-49页 |
3.实验结果 | 第49-60页 |
3.1 NK细胞在活化后显著上调GPR84基因的表达 | 第49-50页 |
3.2 GPR84基因敲除小鼠免疫细胞的检测 | 第50-52页 |
3.3 GPR84基因敲除使小鼠NK细胞的比例下降 | 第52-55页 |
3.4 GPR84受体显著促进NK细胞的发育与成熟 | 第55-60页 |
4.讨论 | 第60-61页 |
第三章 G蛋白偶联受体GPR84对NK细胞功能的影响及其机制的研究 | 第61-80页 |
引言 | 第61-62页 |
1.实验材料 | 第62页 |
2.实验方法 | 第62-66页 |
2.1 小鼠脾脏来源NK细胞的磁珠分选 | 第62-63页 |
2.2 胞内流式检测小鼠NK细胞的IFN-γ和颗粒酶B | 第63-64页 |
2.3 核内流式检测小鼠NK细胞的T-bet和Eomes | 第64-65页 |
2.4 NK细胞杀伤YAC-1细胞的活性检测 | 第65页 |
2.5 小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建 | 第65-66页 |
3.实验结果 | 第66-78页 |
3.1 GPR84基因敲除小鼠NK细胞表面受体的表达 | 第66-67页 |
3.2 GPR84受体显著促进NK细胞的杀伤效应功能 | 第67-71页 |
3.3 GPR84受体通过促进NK细胞中T-bet和Eomes的表达促进NK细胞的成熟与功能 | 第71-73页 |
3.4 GPR84受体通过促进TOR信号通路的激活调节NK细胞的活化 | 第73-78页 |
4.讨论 | 第78-80页 |
结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-96页 |
附录 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |