目录 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
缩略语 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-33页 |
·放线菌简介 | 第10-11页 |
·放线菌及其产生的酶 | 第10-11页 |
·链霉菌作为主要工业微生物的特点 | 第11页 |
·胆固醇氧化酶概论 | 第11-17页 |
·胆固醇氧化酶的研究历史 | 第11-12页 |
·胆固醇氧化酶一般性质 | 第12-15页 |
·胆固醇氧化酶的分离纯化 | 第15-16页 |
·胆固醇氧化酶的活力测定 | 第16-17页 |
·胆固醇氧化酶的生物学功能 | 第17页 |
·胆固醇氧化酶的结构及催化机理 | 第17-25页 |
·胆固醇氧化酶的结构 | 第17-20页 |
·胆固醇氧化酶的催化作用机理 | 第20-24页 |
·底物与一性 | 第24页 |
·抑制剂 | 第24-25页 |
·胆固醇氧化酶的应用 | 第25-28页 |
·临床诊断 | 第25-27页 |
·食品加工 | 第27页 |
·制药工业 | 第27页 |
·工具酶 | 第27页 |
·潜在应用 | 第27-28页 |
·胆固醇氧化酶的遗传改良 | 第28-32页 |
·基因工程改良 | 第28页 |
·蛋白质工程改良 | 第28-29页 |
·DNA Shuffling | 第29-32页 |
·本研究的立论基础与目的 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-47页 |
·实验用菌株 | 第33-34页 |
·实验用质粒 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-47页 |
3 结果与分析 | 第47-102页 |
·胆固醇氧化酶产生菌的筛选 | 第47-54页 |
·降解胆固醇菌株的检测 | 第48页 |
·胆固醇氧化酶产生菌的确证 | 第48-49页 |
·灰色链霉菌ATCC14811总DNA与异源探针choA的杂交 | 第49-52页 |
·小结 | 第52-54页 |
·灰色链霉菌ATCC14811基因组文库的构建及胆固醇氧化酶基因的克隆 | 第54-78页 |
·灰色链霉菌ATCC14811基因组文库的构建 | 第54-58页 |
·ATCC14811基因组文库质量分析 | 第58页 |
·含胆固醇氧化酶基因重组子的获得 | 第58-61页 |
·胆固醇氧化酶基因的亚克隆、定位及酶谱制作 | 第61-74页 |
·含胆固醇氧化酶基因的DNA片段的来源验证 | 第74页 |
·小结 | 第74-78页 |
·胆固醇氧化酶基因核苷酸序列测定及分析 | 第78-95页 |
·测序用载体 | 第78-80页 |
·外切核酸酶Ⅲ缺失突变体的获得 | 第80-81页 |
·序列测定 | 第81-82页 |
·序列编辑与序列分析 | 第82-94页 |
·小结 | 第94-95页 |
·胆固醇氧化酶的纯化及其性质 | 第95-102页 |
·酶的提纯 | 第95-96页 |
·酶反应初速度 | 第96页 |
·pH对胆固醇氧化酶的影响 | 第96-98页 |
·温度对胆固醇氧化酶的影响 | 第98页 |
·胆固醇氧化酶的酸碱稳定性 | 第98页 |
·胆固醇氧化酶热稳定性 | 第98-100页 |
·酶产量与细胞生长曲线 | 第100页 |
·不同产酶培养基产酶量的比较 | 第100页 |
·小结 | 第100-102页 |
4 总结与讨论 | 第102-105页 |
·总结 | 第102-103页 |
·讨论 | 第103-105页 |
·choG基因异源宿主中表达 | 第103页 |
·菌种改良及胆固醇氧化酶功能的改良 | 第103-104页 |
·酶学性质研究 | 第104页 |
·灰色链霉菌ATCC14811其它生物学功能的研究 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-112页 |
致谢 | 第112页 |