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灰色链霉菌ATCC14811胆固醇氧化酶基因的分子生物学研究

目录第1-5页
中文摘要第5-6页
英文摘要第6-8页
缩略语第8-10页
1 文献综述第10-33页
   ·放线菌简介第10-11页
     ·放线菌及其产生的酶第10-11页
     ·链霉菌作为主要工业微生物的特点第11页
   ·胆固醇氧化酶概论第11-17页
     ·胆固醇氧化酶的研究历史第11-12页
     ·胆固醇氧化酶一般性质第12-15页
     ·胆固醇氧化酶的分离纯化第15-16页
     ·胆固醇氧化酶的活力测定第16-17页
     ·胆固醇氧化酶的生物学功能第17页
   ·胆固醇氧化酶的结构及催化机理第17-25页
     ·胆固醇氧化酶的结构第17-20页
     ·胆固醇氧化酶的催化作用机理第20-24页
     ·底物与一性第24页
     ·抑制剂第24-25页
   ·胆固醇氧化酶的应用第25-28页
     ·临床诊断第25-27页
     ·食品加工第27页
     ·制药工业第27页
     ·工具酶第27页
     ·潜在应用第27-28页
   ·胆固醇氧化酶的遗传改良第28-32页
     ·基因工程改良第28页
     ·蛋白质工程改良第28-29页
     ·DNA Shuffling第29-32页
   ·本研究的立论基础与目的第32-33页
2 材料与方法第33-47页
   ·实验用菌株第33-34页
   ·实验用质粒第34-35页
   ·实验方法第35-47页
3 结果与分析第47-102页
   ·胆固醇氧化酶产生菌的筛选第47-54页
     ·降解胆固醇菌株的检测第48页
     ·胆固醇氧化酶产生菌的确证第48-49页
     ·灰色链霉菌ATCC14811总DNA与异源探针choA的杂交第49-52页
     ·小结第52-54页
   ·灰色链霉菌ATCC14811基因组文库的构建及胆固醇氧化酶基因的克隆第54-78页
     ·灰色链霉菌ATCC14811基因组文库的构建第54-58页
     ·ATCC14811基因组文库质量分析第58页
     ·含胆固醇氧化酶基因重组子的获得第58-61页
     ·胆固醇氧化酶基因的亚克隆、定位及酶谱制作第61-74页
     ·含胆固醇氧化酶基因的DNA片段的来源验证第74页
     ·小结第74-78页
   ·胆固醇氧化酶基因核苷酸序列测定及分析第78-95页
     ·测序用载体第78-80页
     ·外切核酸酶Ⅲ缺失突变体的获得第80-81页
     ·序列测定第81-82页
     ·序列编辑与序列分析第82-94页
     ·小结第94-95页
   ·胆固醇氧化酶的纯化及其性质第95-102页
     ·酶的提纯第95-96页
     ·酶反应初速度第96页
     ·pH对胆固醇氧化酶的影响第96-98页
     ·温度对胆固醇氧化酶的影响第98页
     ·胆固醇氧化酶的酸碱稳定性第98页
     ·胆固醇氧化酶热稳定性第98-100页
     ·酶产量与细胞生长曲线第100页
     ·不同产酶培养基产酶量的比较第100页
     ·小结第100-102页
4 总结与讨论第102-105页
   ·总结第102-103页
   ·讨论第103-105页
     ·choG基因异源宿主中表达第103页
     ·菌种改良及胆固醇氧化酶功能的改良第103-104页
     ·酶学性质研究第104页
     ·灰色链霉菌ATCC14811其它生物学功能的研究第104-105页
参考文献第105-112页
致谢第112页

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