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糖尿病基因治疗的实验研究--人胰岛素基因真核表达质粒的构建、表达和降血糖作用

缩写第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要第9-12页
前言第12-14页
实验材料第14-18页
 一、细菌菌株第14页
 二、细胞株第14页
 三、载体第14页
 四、酶类第14页
 五、细胞培养及试剂第14-15页
 六、主要生化试剂第15页
 七、动物第15页
 八、主要仪器设备第15-18页
实验方法第18-26页
 一、本研究的技术路线第18页
 二、人胰岛素原基因真核细胞表达载体的构建第18-22页
  1.质粒DNA的碱法小量制备第18-19页
  2.质粒DNA的大量制备第19页
  3.质粒的纯化第19-20页
  4.从琼脂糖凝胶中回收DNA片段第20-21页
  5.克隆筛选第21页
  6.感受态细菌的制备第21-22页
  7.质粒DNA的转化第22页
  8.DNA片段的连接第22页
  9.质粒DNA的双链测序第22页
 三、人胰岛素表达细胞株的建立第22-24页
  1.细胞培养第22-23页
  2.细胞转染第23页
  3.阳性细胞克隆的扩增第23-24页
  4.表达蛋白产物的测定第24页
 四、人胰岛素表达细胞株的体内实验第24-26页
  1.糖尿病动物模型的制备第24-25页
  2.接种细胞的准备第25-26页
结果第26-43页
 一、重组质粒的酶切电泳图谱分析及核苷酸序列测定第26-31页
 二、人胰岛素基因真核表达质粒的转染及活性检测第31-35页
 三、人胰岛素表达细胞株的体内实验第35-43页
讨论第43-49页
参考文献第49-53页
致谢第53-54页
综述(Ⅰ)第54-70页
 参考文献第65-70页
综述(Ⅱ)第70-82页
 参考文献第77-82页
个人简历第82-83页
发表文章第83-84页

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