| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| ·双组分信号系统概述 | 第10-11页 |
| ·高等植物的双组分信号系统 | 第11-14页 |
| ·细胞分裂素信号途径 | 第11-13页 |
| ·乙烯信号转导通路 | 第13-14页 |
| ·光敏色素的光信号转导 | 第14页 |
| ·渗透调节途径 | 第14页 |
| ·蛋白激酶研究概述 | 第14-15页 |
| ·实验目的意义 | 第15-16页 |
| ·PHK4 基因克隆 | 第15-16页 |
| ·PHK4 基因的序列分析 | 第16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-35页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第16-17页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·主要试剂与药品 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-35页 |
| ·播种大白菜A-81 和拟南芥C 型野生型 | 第17-18页 |
| ·CTAB 法提取植物基因组DNA | 第18-19页 |
| ·反向PCR 扩增 | 第19-23页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第23页 |
| ·连接反应 | 第23-24页 |
| ·转化 | 第24-25页 |
| ·重组克隆的检测 | 第25-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·RNA 的提取及纯度检测 | 第28-29页 |
| ·反转录及PCR 扩增 | 第29-31页 |
| ·染色体步移实验 | 第31-34页 |
| ·利用生物信息学对PHK4 基因的编码蛋白进行功能分析 | 第34-35页 |
| ·进化树分析 | 第35页 |
| 第三章 PHK4 基因的克隆 | 第35-46页 |
| ·PHK4 基因1815 序列的获得 | 第35-37页 |
| ·选取的已知序列 | 第35页 |
| ·从已知序列上设计引物进行反向PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·测序结果分析 | 第36-37页 |
| ·PHK4 基因1056 序列的获得 | 第37-38页 |
| ·实验操作 | 第37-38页 |
| ·测序结果2871 序列分析 | 第38页 |
| ·PHK4 基因1973 序列获得 | 第38-39页 |
| ·从已知序列上设计引物进行反向PCR 扩增 | 第39页 |
| ·测序结果1973 bp 序列分析 | 第39页 |
| ·PHK4 基因2627 序列的获得 | 第39-41页 |
| ·染色体步移方法获得5’端部分序列 | 第39-40页 |
| ·常规PCR 验证测序结果 | 第40-41页 |
| ·PHK4 基因3148 序列的获得 | 第41-42页 |
| ·目的片段克隆 | 第41-42页 |
| ·测序结果 | 第42页 |
| ·PHK4 基因3008 序列的获得 | 第42-44页 |
| ·利用PCR 扩增目的片段 | 第43页 |
| ·测序结果 | 第43-44页 |
| ·PHK4 基因8474 序列 | 第44页 |
| ·反转录PCR 结果 | 第44-46页 |
| ·RNA 提取和反转录结果 | 第44页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第44-45页 |
| ·3’RACE 扩增 | 第45-46页 |
| 第四章 生物信息学分析 | 第46-55页 |
| ·编码序列分析 | 第46页 |
| ·序列相似性分析 | 第46-47页 |
| ·保守结构域的分析 | 第47-49页 |
| ·CHASE 区 | 第47-48页 |
| ·传递结构域 | 第48-49页 |
| ·REC 区 | 第49页 |
| ·进化树分析 | 第49-55页 |
| 第五章 讨论和结论 | 第55-59页 |
| ·未知基因的获得方法比较 | 第55-57页 |
| ·反向PCR 扩增 | 第55页 |
| ·染色体步移法 | 第55-57页 |
| ·基因编码区的获得 | 第57页 |
| ·保守结构域分析 | 第57页 |
| ·细胞分裂素受体基因 | 第57-58页 |
| ·PHK4 基因与细胞分裂素信号通路的关系 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 缩略语表 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |