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雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)愈伤细胞悬浮培养生产雷公藤甲素研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
1 前言第13-22页
   ·雷公藤研究概况第13-16页
     ·雷公藤地理分布及形态特征第14页
     ·雷公藤药用历史第14-15页
     ·雷公藤植株药用成分第15-16页
   ·雷公藤甲素研究进展第16-17页
     ·雷公藤甲素化学结构及理化性质第16页
     ·雷公藤甲素药理研究第16-17页
   ·细胞悬浮培养生产次生代谢产物研究进展第17-18页
   ·诱导子研究进展第18-21页
     ·非生物诱导子第18-19页
     ·内生真菌诱导子第19-21页
   ·本文研究意义及主要研究内容第21-22页
2 愈伤组织诱导及愈伤组织系建立第22-30页
   ·试验材料及仪器第22-23页
     ·植物材料与培养基第22页
     ·主要仪器、药品第22-23页
   ·试验方法第23-24页
     ·愈伤组织诱导第23页
     ·愈伤组织细胞活力测定第23页
     ·雷公藤甲素的测定第23-24页
       ·高效液相仪(HLPC)测定条件设定第23-24页
       ·雷公藤甲素样品的制备第24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·不同外植体愈伤组织诱导第24页
     ·雷公藤甲素标准品及样品 HPLC 检测图谱第24-25页
     ·不同外植体对雷公藤愈伤组织诱导研究第25页
     ·不同培养基对雷公藤叶外植体的诱导和生长影响第25-26页
     ·不同 pH 值对雷公藤外植体的诱导和生长的影响第26-27页
     ·雷公藤不同外植体愈伤组织生物量研究第27页
     ·雷公藤不同外植体愈伤组织细胞活力比较第27-28页
     ·雷公藤不同生长条件及培养形态下雷公藤甲素质量分数变异规律第28-29页
   ·小结第29-30页
3 细胞悬浮培养系的建立第30-36页
   ·材料与仪器第30页
   ·试验方法第30-31页
     ·悬浮细胞系的建立第30-31页
     ·高效液相仪(HLPC)测定条件设定第31页
       ·雷公藤甲素测定第31页
       ·细胞干质量的测定第31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·愈伤组织与悬浮细胞第31-32页
     ·雷公藤甲素标准品及样品 HPLC 检测图谱第32-33页
     ·不同培养基对雷公藤细胞生长量的影响第33页
     ·不同培养基对雷公藤悬浮细胞中雷公藤甲素质量分数的影响第33-34页
     ·雷公藤细胞悬浮培养对培养液 pH 的影响第34-35页
     ·雷公藤细胞培养悬浮液中甲素质量分数变化第35页
   ·小结第35-36页
4 非生物子诱导调控雷公藤悬浮细胞产甲素研究第36-47页
   ·试验材料与仪器第36-37页
   ·试验方法第37页
     ·外源诱导子 SA 和 Lacl3浓度控制及添加第37页
     ·悬浮细胞活性测定第37页
     ·悬浮细胞生物量测定第37页
     ·悬浮液总糖含量测定第37页
     ·细胞苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)测定第37页
     ·细胞胞内、胞外雷公藤甲素测定第37页
   ·结果与讨论第37-45页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对悬浮细胞活性的影响第37-39页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对悬浮细胞生物量的影响第39-41页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对悬浮培养液总糖含量的影响第41-42页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对细胞 PAL 的影响第42-43页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对细胞内雷公藤甲素的影响第43-44页
     ·不同浓度 SA 和 Lacl3对胞外雷公藤甲素的影响第44-45页
   ·小结第45-47页
5 生物诱导子调控下雷公藤悬浮细胞产甲素研究第47-62页
   ·试验材料与仪器第47页
     ·生物材料第47页
     ·培养基第47页
     ·仪器及试剂第47页
   ·试验方法第47-49页
     ·内生真菌菌丝体及菌液诱导子制备第47-48页
     ·细胞悬浮培养及处理第48页
     ·悬浮细胞生物量测定第48页
     ·悬浮细胞活性测定第48页
     ·悬浮液总糖含量测定第48页
     ·悬浮细胞 PAL 测定第48-49页
     ·细胞内过氧化物酶(Peroxidase,POD)、丙二醛(MDA)的测定第49页
     ·雷公藤悬浮细胞胞内、胞外雷公藤甲素测定第49页
   ·结果与讨论第49-60页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对悬浮细胞生物量的影响第49-51页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对悬浮细胞活性的影响第51-52页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对悬浮液总糖含量的影响第52-54页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对细胞 PAL 的影响第54-55页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对细胞 POD 活性的影响第55-57页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对细胞 MDA 的影响第57-58页
     ·内真生菌菌丝体和菌液诱导子对细胞内雷公藤甲素的影响第58-59页
     ·内生真菌菌丝体和菌液诱导子对胞外雷公藤甲素的影响第59-60页
   ·小结第60-62页
6 结论第62-65页
   ·研究主要结论第62-63页
   ·研究创新第63-64页
   ·研究展望第64-65页
参考文献第65-71页
研究生期间参加科研及发表论文情况第71-72页
致谢第72页

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