| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-26页 |
| ·前言 | 第11页 |
| ·食物过敏 | 第11-14页 |
| ·食物过敏的概念 | 第11-12页 |
| ·食物过敏机理 | 第12-13页 |
| ·食物过敏的主要影响因素 | 第13页 |
| ·主要过敏性食物 | 第13-14页 |
| ·小麦过敏 | 第14-22页 |
| ·小麦中的蛋白组成 | 第15-16页 |
| ·小麦主要过敏原及其过敏性的研究概况 | 第16-20页 |
| ·乳糜泻 | 第20-22页 |
| ·小麦过敏原的检测方法 | 第22-23页 |
| ·立题背景与研究内容 | 第23-26页 |
| ·立题背景 | 第23-24页 |
| ·研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 A-醇溶蛋白基因的克隆及序列分析 | 第26-45页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株、质粒 | 第26页 |
| ·工具酶、分子量Marker及主要生化试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器与设备 | 第27-28页 |
| ·PCR引物 | 第28页 |
| ·常规培养基及溶液的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·小麦种子基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·用紫外分光光度计检测基因组DNA质量 | 第30页 |
| ·琼脂糖电泳鉴定DNA | 第30页 |
| ·从基因组中扩增α-gliadin基因组 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的割胶回收纯化 | 第31页 |
| ·目的基因的T/A克隆、筛选和鉴定 | 第31-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-44页 |
| ·小麦基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·α-gliadin基因的PCR | 第35-36页 |
| ·重组克隆质粒pMD19-T-α-gli的构建 | 第36-38页 |
| ·克隆重组质粒的鉴定 | 第38-41页 |
| ·测序及同源性分析 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 A-醇溶蛋白的基因在原核系统中的表达 | 第45-64页 |
| ·引言 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·菌株、质粒 | 第45-46页 |
| ·工具酶、分子量Marker及主要生化试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器与设备 | 第46页 |
| ·PCR引物 | 第46页 |
| ·常规培养基及溶液的配制 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-54页 |
| ·菌株培养 | 第48页 |
| ·高纯度质粒小量提取方法 | 第48页 |
| ·质粒的限制性双酶切 | 第48-49页 |
| ·回收酶切后的DNA片段 | 第49页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第49页 |
| ·大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pLysS感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第50-51页 |
| ·表达载体pGEX-4T-1-α-gli的鉴定 | 第51-52页 |
| ·目的基因的诱导表达及SDS-PAGE法检测表达蛋白 | 第52-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-63页 |
| ·表达载体的构建 | 第54-56页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第56-60页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE检测分析 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第四章 A-醇溶蛋白的B细胞抗原表位的预测 | 第64-71页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·α-gliadin氨基酸序列 | 第64页 |
| ·计算机分析软件及服务器 | 第64-65页 |
| ·二级结构预测及分析 | 第65页 |
| ·单因素预测 | 第65页 |
| ·B细胞表位的确定 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-70页 |
| ·α-gliadin的二级结构的预测 | 第65-67页 |
| ·α-gliadin的亲水性预测 | 第67页 |
| ·α-gliadin的表面可及性预测 | 第67-68页 |
| ·α-gliadin的柔韧性预测 | 第68页 |
| ·α-gliadin的抗原性指数预测 | 第68-69页 |
| ·B细胞表位预测结果 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第五章 结论 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 附录 | 第77-81页 |
| 简历及发表的论文 | 第81页 |