| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1.前言 | 第10-17页 |
| ·南方水稻黑条矮缩病毒研究近况 | 第10-16页 |
| ·SRBSDV 的生物学特性 | 第10-13页 |
| ·病害流行学 | 第13页 |
| ·SRBSDV 的分类地位 | 第13-14页 |
| ·病毒粒体特性 | 第14页 |
| ·SRBSDV 的基因组结构、组成和功能 | 第14-15页 |
| ·SRBSDV 的防治策略 | 第15-16页 |
| ·本研究项目的内容、目的和意义 | 第16-17页 |
| 2. 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·病毒分离物 | 第17页 |
| ·菌株和载体 | 第17页 |
| ·酶类及化学试剂 | 第17页 |
| ·实验兔 | 第17页 |
| ·实验仪器 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-19页 |
| ·技术路线 | 第17-19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·选定研究对象 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·SRBSDV 病叶总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·RT-PCR 扩增 SRBSDV-P2、P8、P10 基因 | 第20-21页 |
| ·目的基因的电泳检测以及回收 | 第21-22页 |
| ·目的基因构建到中间载体（BP 反应） | 第22页 |
| ·BP 重组产物转化至感受态细胞 DH5α | 第22-23页 |
| ·阳性克隆菌的筛选 | 第23-25页 |
| ·目的载体的构建（与原核表达载体 pdest17 进行的 LR 反应） | 第25页 |
| ·LR 反应产物转化大肠杆菌 | 第25页 |
| ·阳性克隆菌的筛选 | 第25-26页 |
| ·目的载体转入表达菌株 Rosetta 宿主菌 | 第26页 |
| ·IPTG 诱导蛋白的表达及其检测 | 第26-27页 |
| ·蛋白诱导结果的检测 | 第27页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第27-28页 |
| ·ELISA 检测血清效价 | 第28页 |
| ·Western blot 检测抗体特异性 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·SRBSDV 总 RNA 电泳图 | 第29页 |
| ·RT-PCR 扩增 SRBSDV-P2、SRBSDV-P8、SRBSDV-P10 基因 | 第29-30页 |
| ·中间载体 PDONR221-SRBSDV-P2、 PDONR221- SRBSDV-P8、PDONR221- SRBSDV-P10 的 PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·中间载体 PDONR221-SRBSDV-P2、PDONR221-SRBSDV-P8、PDONR221- SRBSDV-P10 的测序分析 | 第31页 |
| ·目的载体 PDEST17-SRBSDV-P2、PDEST17-SRBSDV-P8、PDEST17- SRBSDV-P10 的 PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·ROSETTA菌液PCR结果 | 第32页 |
| ·P2、P8、P10 蛋白的诱导条件及其表达 | 第32-34页 |
| ·ELISA效价检测 | 第34-36页 |
| ·WESTERN BLOT特异性检测 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第38页 |
| ·诱导表达重组蛋白 | 第38页 |
| ·抗体的制备 | 第38-39页 |
| ·WESTERN BLOT和 ELISA检测 | 第39-41页 |
| 5 全文小结和展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
