摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
·食管癌相关基因研究进展 | 第13-15页 |
·肺癌相关基因研究进展 | 第15-17页 |
·荧光差异显示技术的研究进展 | 第17-21页 |
·mRNA差异显示技术的基本原理和基本过程 | 第18-19页 |
·mRNA差异显示技术的优缺点 | 第19-20页 |
·mRNA差异显示技术在肿瘤研究中的应用 | 第20-21页 |
·实时荧光定量PCR研究进展 | 第21-24页 |
·实时荧光定量PCR的优缺点 | 第21-22页 |
·实时荧光定量PCR的荧光标记 | 第22-23页 |
·荧光定量PCR在肿瘤研究中的作用 | 第23-24页 |
·昆虫杆状病毒表达系统 | 第24-26页 |
·杆状病毒表达载体系统的原理 | 第25页 |
·杆状病毒表达载体系统的优缺点 | 第25-26页 |
·杆状病毒表达载体系统应用前景 | 第26页 |
·本研究的目的意义和内容 | 第26-28页 |
·研究的背景、意义 | 第26-27页 |
·主要研究内容 | 第27页 |
·实验流程图 | 第27-28页 |
第二章 食管癌及其相应癌旁组织mRNA差异显示研究 | 第28-40页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·试验所需材料的选取 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要试验仪器 | 第29页 |
·试验方法 | 第29-35页 |
·RNA的制备 | 第29-30页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第30页 |
·FDD-PCR | 第30-31页 |
·制胶 | 第31页 |
·上样 | 第31页 |
·差异片段的回收 | 第31-32页 |
·差异片段的再扩增 | 第32页 |
·差异片段的克隆及鉴定 | 第32-35页 |
·测序 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-38页 |
·RNA质量的检测 | 第35-36页 |
·荧光差显结果 | 第36-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 STAT2和C3ORF1基因在食管癌及肺癌组织中表达鉴定 | 第40-52页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·试验材料的获取 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要试验仪器 | 第40-41页 |
·试验方法 | 第41-43页 |
·RNA的制备 | 第41页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第41-42页 |
·RT-PCR | 第42页 |
·实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·RNA质量的检测 | 第43-44页 |
·star2基因在食管癌及其癌旁组织中的表达比较 | 第44-46页 |
·stat2基因在肺癌及其癌旁组织中的表达比较 | 第46页 |
·stat2基因全长ORF的克隆 | 第46-47页 |
·c3orf1基因在肺癌及其癌旁组织中的表达比较 | 第47-48页 |
·c3orf1基因在食管癌及其癌旁组织中的表达比较 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
第四章 C3orf1基因在杆状病毒表达系统中的表达 | 第52-61页 |
·试验材料 | 第52-53页 |
·菌种、载体和细胞 | 第52页 |
·主要试剂 | 第52页 |
·主要仪器 | 第52页 |
·主要溶液的配制 | 第52-53页 |
·重组杆状病毒转座载体的构建 | 第53-56页 |
·重组杆状病毒转座载体的构建 | 第53页 |
·Bacmid穿梭载体的构建 | 第53-54页 |
·重组杆粒(Bacmid)的验证 | 第54页 |
·转染家蚕细胞 | 第54-55页 |
·杆状病毒rBac C3orf1的PCR验证 | 第55页 |
·SDS—PAGE电泳 | 第55-56页 |
·Western Blotting | 第56页 |
·结果分析 | 第56-60页 |
·重组杆状病毒转座载体的构建 | 第56页 |
·重组转座载体的酶切鉴定 | 第56-57页 |
·重组穿梭载体的PCR鉴定 | 第57-58页 |
·重组穿梭杆粒转染家蚕细胞 | 第58-59页 |
·杆状病毒rBac C3orf1的PCR验证 | 第59页 |
·Western Blotting分析 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
第五章 结论与展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68-69页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第69页 |