摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第1章 绪论 | 第13-32页 |
·脂联素研究进展 | 第13-24页 |
·脂联素的来源 | 第13-14页 |
·脂联素基因的结构 | 第14-15页 |
·脂联素水平及其影响因素 | 第15-17页 |
·脂联素的作用机制 | 第17-20页 |
·脂联素的生理作用 | 第20-24页 |
·脂联素受体研究进展 | 第24-27页 |
·脂联素受体的发现 | 第24-26页 |
·脂联素受体的调控 | 第26-27页 |
·脂联素假说 | 第27-28页 |
·脂联素和脂联素受体作为治疗靶标 | 第28-30页 |
·本研究的目的意义 | 第30页 |
·主要研究内容和技术路线 | 第30-32页 |
·主要研究内容 | 第30-31页 |
·主要技术路线 | 第31-32页 |
第2章 家蚕脂联素受体基因的克隆与生物信息学分析 | 第32-48页 |
·材料 | 第32-34页 |
·主要实验仪器设备 | 第32页 |
·主要实验试剂和药品 | 第32-34页 |
·载体、菌株、数据库及主要软件 | 第34页 |
·方法 | 第34-40页 |
·电子克隆 | 第34-35页 |
·家蚕总RNA的提取及cDNA反转录合成 | 第35页 |
·引物设计与合成 | 第35-36页 |
·BmAdipoR基因的PCR反应 | 第36页 |
·PCR产物的回收 | 第36-37页 |
·连接反应 | 第37页 |
·感受态细胞制备 | 第37-38页 |
·质粒DNA转化 | 第38页 |
·SDS-碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第38-39页 |
·质粒DNA酶切鉴定 | 第39页 |
·测序验证 | 第39-40页 |
·生物信息学分析 | 第40页 |
·结果 | 第40-46页 |
·序列分析 | 第40-42页 |
·BmAdipoR基因PCR分析 | 第42-43页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第43-44页 |
·BmAdipoR的跨膜结构预测 | 第44页 |
·BmAdipoR蛋白序列同源性比较 | 第44-45页 |
·BmAdipoR蛋白序列进化树分析 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
本章小结 | 第47-48页 |
第3章 家蚕脂联素受体蛋白的真核表达与亚细胞定位 | 第48-57页 |
·材料 | 第48-49页 |
·主要实验仪器设备 | 第48页 |
·主要实验试剂和药品 | 第48-49页 |
·质粒和菌株 | 第49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·PCR反应扩增pMD18-T-EGFP | 第49页 |
·转移载体pFastBacHTb-BmAdipoR-EGFP的构建 | 第49-50页 |
·重组Bacmid穿梭载体的构建 | 第50页 |
·重组Bacmid的提取 | 第50-51页 |
·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第51页 |
·昆虫细胞的培养 | 第51页 |
·重组病毒vBm-BmAdipoR-EGFP的获得 | 第51-52页 |
·重组病毒vBm-BmAdipoR-EGFP转染昆虫细胞 | 第52页 |
·激光共聚焦显微镜下观察染色细胞和转染细胞 | 第52页 |
·结果 | 第52-55页 |
·pFastBacHTb-EGFP的构建 | 第52-53页 |
·转移载体pFastBacHTb-BmAdipoR-EGFP的构建 | 第53-54页 |
·重组Bacmid-BmAdipoR-EGFP和Bacmid-EGFP的获得 | 第54-55页 |
·重组杆状病毒vBm-BmAdipoR-EGFP和vBm-EGFP的收集 | 第55页 |
·激光共聚焦显微镜观察 | 第55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
本章小结 | 第56-57页 |
第4章 家蚕脂联素受体的表达分析 | 第57-64页 |
·材料 | 第57-58页 |
·主要实验仪器设备 | 第57页 |
·主要实验试剂和药品 | 第57页 |
·家蚕及病毒 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·蚕各组织总RNA的提取 | 第58页 |
·引物设计 | 第58页 |
·反转录反应 | 第58-59页 |
·组织表达RT-PCR分析 | 第59页 |
·BmAdipoR在各组织中的表达分析 | 第59-60页 |
·接种病毒后,BmAdipoR在家蚕中肠组织中的表达分析 | 第60页 |
·结果 | 第60-62页 |
·RT-PCR反应 | 第60页 |
·BmAdipoR在各组织中的荧光定量反应 | 第60-61页 |
·接种病毒后,BmAdipoR在家蚕中肠组织中的表达分析 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
本章小结 | 第63-64页 |
第5章 主要工作总结及工作展望 | 第64-65页 |
·主要总结 | 第64页 |
·工作展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
硕士期间发表的论文 | 第72页 |