| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-20页 |
| 1. 哺乳动物性别鉴定研究简史 | 第12-13页 |
| 2. 哺乳动物性别决定机理 | 第13页 |
| 3. 早期胚胎性别鉴定主要方法 | 第13-17页 |
| ·细胞遗传学法 | 第13-14页 |
| ·免疫学方法 | 第14-15页 |
| ·间接免疫荧光分析法 | 第14页 |
| ·细胞毒性法 | 第14-15页 |
| ·囊胚形成抑制法 | 第15页 |
| ·生物化学方法 | 第15页 |
| ·分子生物学方法 | 第15-17页 |
| ·聚合酶链式反应法 | 第16页 |
| ·LAMP法 | 第16页 |
| ·DNA探针法 | 第16-17页 |
| 4. 小鼠附植前胚胎及成纤维细胞的双重PCR性别鉴定法 | 第17-19页 |
| ·小鼠附植前胚胎取样技术 | 第17-18页 |
| ·毛细管吹吸法 | 第17页 |
| ·显微手术法 | 第17页 |
| ·徒手分割法 | 第17页 |
| ·免疫手术法 | 第17页 |
| ·酸性溶液溶解透明带法 | 第17-18页 |
| ·成纤维细胞的形态特点 | 第18页 |
| ·小鼠成纤维细胞的研究及其应用MEF在胚胎移植的应用进展 | 第18-19页 |
| ·PCR性别鉴定法的类型 | 第19页 |
| 5. PCR法胚胎性别鉴定技术的应用前景 | 第19-20页 |
| 第二部分 试验部分 | 第20-38页 |
| 试验一 引物设计及其合理性检测 | 第20-27页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1. 实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·实验仪器与设备 | 第20页 |
| ·主要药品、试剂和溶液的配置 | 第20-22页 |
| ·主要药品与试剂 | 第20-21页 |
| ·主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 2. 试验方法 | 第22-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·小鼠基因组DNA的制备 | 第22-23页 |
| ·引物合理性检测 | 第23页 |
| 3. 结果与分析 | 第23-25页 |
| ·小鼠SRY基因引物设计合理性检测 | 第23-24页 |
| ·小鼠ZFX基因引物设计合理性检测 | 第24-25页 |
| ·双重PCR鉴定小鼠肝脏细胞性别的研究 | 第25页 |
| 4. 讨论 | 第25-26页 |
| ·引物设计合理性对双重PCR性别鉴定效果的影响 | 第25-26页 |
| ·以小鼠肝脏组织基因组为模板的双重PCR性别鉴定 | 第26页 |
| 5. 小结 | 第26-27页 |
| 试验二 小鼠8-细胞胚胎卵裂球的双重PCR性别鉴定方法的研究 | 第27-33页 |
| 前言 | 第27页 |
| 1. 实验材料 | 第27-29页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·实验仪器与设备 | 第27-28页 |
| ·主要药品、试剂和溶液配置 | 第28-29页 |
| ·主要药品与试剂 | 第28页 |
| ·主要溶液配制 | 第28-29页 |
| 2. 试验方法 | 第29-30页 |
| ·小鼠8-细胞胚胎的获取 | 第29-30页 |
| ·小鼠8-细胞胚胎卵裂球的获取 | 第30页 |
| ·小鼠早期胚胎DNA的提取 | 第30页 |
| ·小鼠8-细胞胚胎卵裂球的双重PCR性别鉴定 | 第30页 |
| 3. 结果与分析 | 第30-31页 |
| ·小鼠8-细胞胚胎卵裂球的体外培养 | 第30页 |
| ·小鼠8-细胞胚胎卵裂球的性别鉴定 | 第30-31页 |
| 4. 讨论 | 第31-32页 |
| ·PCR反应体系及反应条件对性别鉴定效果的影响 | 第31页 |
| ·胚胎因素对双重PCR性别鉴定效果的影响 | 第31-32页 |
| ·其他 | 第32页 |
| 5. 小结 | 第32-33页 |
| 试验三 MEFs的分离培养及SRY基因性别鉴定 | 第33-38页 |
| 前言 | 第33页 |
| 1. 实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·实验仪器与设备 | 第33页 |
| ·主要药品、试剂和溶液配置 | 第33-34页 |
| ·主要药品与试剂 | 第33-34页 |
| ·主要溶液配制 | 第34页 |
| 2. 试验方法 | 第34-35页 |
| ·13.5d小鼠胎儿的获取 | 第34页 |
| ·MEFs的分离培养 | 第34-35页 |
| ·MEFs的传代培养 | 第35页 |
| ·MEFs DNA的提取 | 第35页 |
| ·MEFs的性别鉴定 | 第35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-37页 |
| ·MEFs的分离、培养与传代 | 第35-36页 |
| ·MEFs的性别鉴定 | 第36-37页 |
| 4. 讨论 | 第37页 |
| 5. 小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录 缩略词表 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 发表论文一览表 | 第48页 |
