中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩写词汇表(Abbreviation) | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1 Ghrelin基因的研究进展 | 第11-18页 |
·Ghrelin的化学结构与分布定位 | 第11-12页 |
·Ghrelin受体的化学结构与分布定位 | 第12-13页 |
·Ghrelin的结构及功能 | 第12-13页 |
·Ghrelin的合成与分布 | 第13页 |
·Ghrelin的受体分布 | 第13-14页 |
·Ghrelin的作用机制 | 第14-15页 |
·Ghrelin的生理功能 | 第15-17页 |
·促进GH的分泌、调节生长 | 第15-16页 |
·增强食欲、调节能量代谢 | 第16-17页 |
·对胃肠功能与胃肠道发育的影响 | 第17页 |
·对心血管功能和活动能力的影响 | 第17页 |
·增强机体免疫力与抗应激能力 | 第17页 |
·Ghrelin的研究与其在畜牧业中的应用前景 | 第17-18页 |
2 壳聚糖纳米基因载体系统的研究进展 | 第18-26页 |
·壳聚糖的发现 | 第18-19页 |
·壳聚糖的分子结构与理化特性 | 第19页 |
·壳聚糖的生物学特性 | 第19-20页 |
·壳聚糖纳米控释系统在医药学方面的应用 | 第20-21页 |
·DNA载体 | 第21页 |
·蛋白类药物载体 | 第21页 |
·壳聚糖载基因缓释系统的应用 | 第21-24页 |
·壳聚糖衍生物的研究与应用 | 第24页 |
·壳聚糖在其他领域的应用 | 第24-25页 |
·壳聚糖研究的前景与意义 | 第25-26页 |
第二章 研究内容 | 第26-44页 |
试验一 猪Ghrelin基因真核表达载体的构建 | 第26-36页 |
1 试验材料和方法 | 第26-32页 |
·试验材料 | 第26-29页 |
·样品来源 | 第26页 |
·菌株及质粒 | 第26页 |
·试验试剂 | 第26-28页 |
·引物 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-32页 |
·猪胃底腺组织总RNA的提取 | 第29页 |
·RT-PCR扩增猪Ghrelin基因片段 | 第29-30页 |
·PCR产物的回收 | 第30页 |
·猪Ghrelin基因的克隆与序列分析 | 第30-31页 |
·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的构建 | 第31页 |
·转染质粒的大量提取与纯化及DNA浓度的测定 | 第31-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
·总RNA的提取与检验 | 第32页 |
·RT-PCR扩增Ghrelin基因 | 第32-33页 |
·PCR产物的基因克隆及酶切的结果 | 第33页 |
·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的酶切鉴定 | 第33-34页 |
·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的测序验证结果 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
·克隆技术的选择 | 第34-35页 |
·真核表达载体的选择 | 第35页 |
4 小结 | 第35-36页 |
试验二 壳聚糖Ghrelin基因纳米粒的制备及其对小鼠生长的影响 | 第36-44页 |
1 试验材料与方法 | 第36-39页 |
·试验材料 | 第36-37页 |
·试验动物 | 第36页 |
·试验试剂 | 第36页 |
·主要仪器设备 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-39页 |
·质粒含量的测定 | 第37页 |
·N/P比的确定 | 第37页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒和空纳米粒的制备 | 第37页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒的粒径与形态测定 | 第37页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒包封率和载药量的检测 | 第37-38页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对Ghrelin基因的保护作用 | 第38页 |
·壳聚糖纳米粒包裹质粒DNA的动物试验 | 第38页 |
·称重、血样的采集及GH含量的测定 | 第38-39页 |
2 结果 | 第39-42页 |
·质粒DNA的鉴定 | 第39页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒的粒径与形态测定 | 第39页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒包封率和载药量的检测 | 第39-40页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对Ghrelin基因的保护作用结果 | 第40页 |
·各组小鼠在注射后各时间段的平均累积增重 | 第40-41页 |
·小鼠血清GH浓度的检测 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
·纳米粒介导基因转移技术 | 第42-43页 |
·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对小鼠生长的影响 | 第43页 |
4 小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录 | 第53页 |