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壳聚糖纳米粒介导猪Ghrelin基因对小鼠生长的影响

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
英文缩写词汇表(Abbreviation)第10-11页
第一章 文献综述第11-26页
 1 Ghrelin基因的研究进展第11-18页
   ·Ghrelin的化学结构与分布定位第11-12页
   ·Ghrelin受体的化学结构与分布定位第12-13页
     ·Ghrelin的结构及功能第12-13页
     ·Ghrelin的合成与分布第13页
   ·Ghrelin的受体分布第13-14页
   ·Ghrelin的作用机制第14-15页
   ·Ghrelin的生理功能第15-17页
     ·促进GH的分泌、调节生长第15-16页
     ·增强食欲、调节能量代谢第16-17页
     ·对胃肠功能与胃肠道发育的影响第17页
     ·对心血管功能和活动能力的影响第17页
     ·增强机体免疫力与抗应激能力第17页
   ·Ghrelin的研究与其在畜牧业中的应用前景第17-18页
 2 壳聚糖纳米基因载体系统的研究进展第18-26页
   ·壳聚糖的发现第18-19页
   ·壳聚糖的分子结构与理化特性第19页
   ·壳聚糖的生物学特性第19-20页
   ·壳聚糖纳米控释系统在医药学方面的应用第20-21页
     ·DNA载体第21页
     ·蛋白类药物载体第21页
   ·壳聚糖载基因缓释系统的应用第21-24页
   ·壳聚糖衍生物的研究与应用第24页
   ·壳聚糖在其他领域的应用第24-25页
   ·壳聚糖研究的前景与意义第25-26页
第二章 研究内容第26-44页
 试验一 猪Ghrelin基因真核表达载体的构建第26-36页
  1 试验材料和方法第26-32页
   ·试验材料第26-29页
     ·样品来源第26页
     ·菌株及质粒第26页
     ·试验试剂第26-28页
     ·引物第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
   ·试验方法第29-32页
     ·猪胃底腺组织总RNA的提取第29页
     ·RT-PCR扩增猪Ghrelin基因片段第29-30页
     ·PCR产物的回收第30页
     ·猪Ghrelin基因的克隆与序列分析第30-31页
     ·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的构建第31页
     ·转染质粒的大量提取与纯化及DNA浓度的测定第31-32页
  2 结果第32-34页
   ·总RNA的提取与检验第32页
   ·RT-PCR扩增Ghrelin基因第32-33页
   ·PCR产物的基因克隆及酶切的结果第33页
   ·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的酶切鉴定第33-34页
   ·pcDNA3.1(+)-Ghrelin重组质粒的测序验证结果第34页
  3 讨论第34-35页
   ·克隆技术的选择第34-35页
   ·真核表达载体的选择第35页
  4 小结第35-36页
 试验二 壳聚糖Ghrelin基因纳米粒的制备及其对小鼠生长的影响第36-44页
  1 试验材料与方法第36-39页
   ·试验材料第36-37页
     ·试验动物第36页
     ·试验试剂第36页
     ·主要仪器设备第36-37页
   ·试验方法第37-39页
     ·质粒含量的测定第37页
     ·N/P比的确定第37页
     ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒和空纳米粒的制备第37页
     ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒的粒径与形态测定第37页
     ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒包封率和载药量的检测第37-38页
     ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对Ghrelin基因的保护作用第38页
     ·壳聚糖纳米粒包裹质粒DNA的动物试验第38页
     ·称重、血样的采集及GH含量的测定第38-39页
  2 结果第39-42页
   ·质粒DNA的鉴定第39页
   ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒的粒径与形态测定第39页
   ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒包封率和载药量的检测第39-40页
   ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对Ghrelin基因的保护作用结果第40页
   ·各组小鼠在注射后各时间段的平均累积增重第40-41页
   ·小鼠血清GH浓度的检测第41-42页
  3 讨论第42-43页
   ·纳米粒介导基因转移技术第42-43页
   ·CS-pcDNA3.1(+)-Ghrelin纳米粒对小鼠生长的影响第43页
  4 小结第43-44页
参考文献第44-52页
致谢第52-53页
附录第53页

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