| 致谢 | 第1-6页 |
| 缩写 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第1章 论文综述 | 第12-34页 |
| 前言 | 第12页 |
| ·活性氧的种类与来源 | 第12-13页 |
| ·种类 | 第12页 |
| ·来源 | 第12-13页 |
| ·活性氧的清除 | 第13-16页 |
| ·生物抗氧化酶 | 第13-14页 |
| ·生物抗氧化剂 | 第14-16页 |
| ·活性氧对细胞的调控作用 | 第16-22页 |
| ·ROS对细胞内氧化还原状态的调控 | 第16-17页 |
| ·ROS对细胞周期的调节作用 | 第17-18页 |
| ·ROS对蛋白的氧化修饰 | 第18-19页 |
| ·ROS调控细胞凋亡 | 第19-20页 |
| ·ROS对转录因子活化的刺激作用 | 第20页 |
| ·活性氧对不同信号分子的影响总结如下 | 第20-22页 |
| ·活性氧在细胞内的动态平衡 | 第22-23页 |
| ·MN-SOD对活性氧的清除作用 | 第23-28页 |
| ·Mn-SOD结构与功能 | 第23-24页 |
| ·自由基损伤理论 | 第24-25页 |
| ·Mn-SOD和活性氧的平衡 | 第25-27页 |
| ·Mn-SOD的应用 | 第27-28页 |
| ·AKT信号通路 | 第28-29页 |
| ·参考文献 | 第29-34页 |
| 第2章 高表达MNSOD肝细胞模型的构建 | 第34-50页 |
| 前言 | 第34-35页 |
| ·实验材料及试剂 | 第35-38页 |
| ·质粒菌种 | 第35-36页 |
| ·酶与抗体 | 第36页 |
| ·分子量标准 | 第36页 |
| ·试剂盒来源 | 第36页 |
| ·缓冲液及其他溶液配方 | 第36-37页 |
| ·其他主要试剂和商品来源 | 第37-38页 |
| ·实验主要仪器 | 第38-39页 |
| ·实验方法和步骤 | 第39-45页 |
| ·细胞培养 | 第39页 |
| ·质粒转化及扩增 | 第39-41页 |
| ·脂质体2000转染 | 第41页 |
| ·G418筛选 | 第41-42页 |
| ·单克隆挑取 | 第42页 |
| ·半定量RT-PCR鉴定MnSOD表达差异 | 第42-43页 |
| ·Western blotting检测细胞内Mn-SOD含量的变化 | 第43-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-47页 |
| ·MnSOD在mRNA水平的表达差异 | 第45-46页 |
| ·Mn-SOD在蛋白水平的表达变化 | 第46-47页 |
| ·实验讨论 | 第47-48页 |
| ·参考文献 | 第48-50页 |
| 第3章 高表达MNSOD肝细胞模型的应用 | 第50-64页 |
| 前言 | 第50-51页 |
| ·实验材料和仪器 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要实验仪器 | 第51-52页 |
| ·实验方法和步骤 | 第52-54页 |
| ·流式细胞术(FCM)检测细胞ROS变化 | 第52页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期变化 | 第52-53页 |
| ·MTT法测定H_2O_2处理下肿瘤细胞生长抑制率与增殖率。 | 第53页 |
| ·Western blotting测细胞内cyt c的释放 | 第53页 |
| ·半定量RT-PCR检测转录因子的变化 | 第53-54页 |
| ·统计学处理 | 第54页 |
| ·实验结果与分析 | 第54-60页 |
| ·高表达MnSOD对HepG2内ROS水平的调控 | 第54-55页 |
| ·高表达Mn-SOD升高HepG2在G1期内的比例 | 第55-56页 |
| ·高表达Mn-SOD提高HepG2对双氧水的耐受能力 | 第56页 |
| ·高表达Mn-SOD减少细胞色素c在细胞内的释放 | 第56-57页 |
| ·Mn-SOD对Akt的磷酸化的调节 | 第57-58页 |
| ·高表达Mn-SOD下调转录因子AP-1和NF-κB表达 | 第58-60页 |
| ·实验讨论 | 第60页 |
| ·参考文献 | 第60-64页 |
| 第4章 实验总结 | 第64-65页 |
| ·创新点 | 第64页 |
| ·总结和展望 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65页 |
| 研究生期间论文情况 | 第65页 |
| 参与完成课题 | 第65页 |
