| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| ·研究背景及研究意义 | 第12-13页 |
| ·蛋白质巯基亚硝基化修饰的研究进展 | 第13-14页 |
| ·心肌缺血再灌注损伤产生机制的研究现状 | 第14-15页 |
| ·蛋白质巯基亚硝基化修饰与心肌缺血再灌注损伤的关系 | 第15-18页 |
| ·氧自由基损伤 | 第16页 |
| ·心肌细胞内的Ca~(2+)超载 | 第16页 |
| ·能量代谢障碍 | 第16-17页 |
| ·心肌细胞凋亡 | 第17-18页 |
| ·参麦方在抗心肌缺血再灌注损伤方面的研究进展 | 第18页 |
| ·蛋白质组学的研究技术简介 | 第18-20页 |
| ·巯基亚硝基化蛋白的检测、纯化方法的研究简介 | 第20-22页 |
| ·紫外分光光度法 | 第20页 |
| ·化学发光法 | 第20页 |
| ·Saville-Griess法 | 第20页 |
| ·DAN荧光法 | 第20-21页 |
| ·蛋白质免疫印迹法 | 第21页 |
| ·Biotin switch法 | 第21-22页 |
| ·本文研究工作简介 | 第22-23页 |
| 第二章 体外大鼠心肌蛋白巯基亚硝基化修饰的研究 | 第23-35页 |
| ·仪器与材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23-24页 |
| ·实验试剂 | 第24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·大鼠心脏组织均浆的制备 | 第25页 |
| ·一氧化氮供体GSNO的合成及与心肌组织样品的体外孵育 | 第25页 |
| ·Biotin switch法纯化发生S-亚硝基化修饰的心肌蛋白 | 第25-26页 |
| ·双向电泳(2-DE)分离蛋白 | 第26-27页 |
| ·胶银染法显示蛋白点 | 第27页 |
| ·蛋白点的质谱鉴定 | 第27-28页 |
| ·Western-blot法检测纯化后的心肌组织样品 | 第28页 |
| ·腺苷酸激酶的活性分析 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-32页 |
| ·GSNO孵育后有大量心肌蛋白发生了亚硝基化修饰 | 第28-29页 |
| ·MALDI-TOF-MS-MS法鉴定到9个蛋白 | 第29-30页 |
| ·Western-blot法验证GAPDH发生了亚硝基化修饰 | 第30页 |
| ·Western-blot法发现Hsp27是一个亚硝基化修饰的蛋白靶点 | 第30-31页 |
| ·GSNO能抑制AK1活性并可被DTT逆转 | 第31-32页 |
| ·讨论与总结 | 第32-35页 |
| 第三章 硝酸甘油诱导大鼠心肌蛋白巯基亚硝基化修饰的研究 | 第35-43页 |
| ·材料与仪器 | 第35-36页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36页 |
| ·硝酸甘油诱发大鼠心肌蛋白的S-亚硝酰化修饰 | 第36页 |
| ·Biotin switch法纯化大鼠心肌的S-亚硝酰化修饰蛋白 | 第36页 |
| ·大鼠心肌的S-亚硝酰化修饰蛋白的双向分离及质谱鉴定 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-39页 |
| ·硝酸甘油能引起大量心肌蛋白发生S-亚硝酰化 | 第36-38页 |
| ·质谱鉴定结果分析 | 第38-39页 |
| ·讨论与总结 | 第39-43页 |
| 第四章 参麦方对大鼠心肌蛋白巯基亚硝基化修饰的影响 | 第43-51页 |
| ·仪器与材料 | 第43-44页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·参麦方总提液 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·实验分组与缺血再灌注模型 | 第44页 |
| ·血清中LDH、CK活性测定 | 第44-45页 |
| ·Griess法测定血清中的NO含量 | 第45页 |
| ·DAN荧光法测定心脏组织中的蛋白质S-NO含量 | 第45页 |
| ·Biotin switch法检测整体心肌蛋白的S-亚硝酰化修饰 | 第45-46页 |
| ·Western-blot法检测组织中eNOS表达 | 第46页 |
| ·统计学处理 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-49页 |
| ·参麦方对血清中LDH,CK含量的影响 | 第46-47页 |
| ·参麦方对血清NO含量和心肌蛋白S-NO含量变化的影响 | 第47-48页 |
| ·参麦方对大鼠心肌组织中eNOS表达的影响 | 第48-49页 |
| ·参麦方对心脏组织蛋白S-亚硝基化修饰的影响 | 第49页 |
| ·讨论与小结 | 第49-51页 |
| 第五章 总结与展望 | 第51-53页 |
| ·总结 | 第51-52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 硕士期间发表相关文章 | 第63页 |
