| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-28页 |
| ·主要材料及试剂 | 第13-14页 |
| ·细胞株、质粒来源 | 第13页 |
| ·主要试剂和产地 | 第13-14页 |
| ·主要仪器设备和产地 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-28页 |
| ·HeLa 细胞的培养 | 第14-16页 |
| ·RT-PCR 方法克隆人野生型全长AE2 cDNA 序列 | 第16-20页 |
| ·质粒pcDNA3.1 的准备 | 第20-22页 |
| ·基因重组技术 | 第22-25页 |
| ·绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N2 转染HUVECs | 第25页 |
| ·重组体质粒pcDNA3.1-wt-AE2 转染HUVECs | 第25-26页 |
| ·PCR 法检测HUVECs AE2mRNA 的表达 | 第26页 |
| ·Western blotting 法检测HUVECs AE2 蛋白的表达 | 第26-28页 |
| 第三章 结果 | 第28-33页 |
| ·RT-PCR 扩增人AE2 CDNA | 第28页 |
| ·质粒PCDNA3.1 的提取纯化 | 第28页 |
| ·双酶切后质粒PCDNA3.1 和 AE2 CDNA 片段的纯化 | 第28页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1-WT-AE2 的酶切鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1-WT-AE2 的测序鉴定 | 第29页 |
| ·重组质粒PCDNA3.1-WT-AE2 在HUVECS 细胞中表达 | 第29-33页 |
| ·转染质粒pEGFP-N2 观察绿色荧光 | 第29-31页 |
| ·转染重组质粒pcDNA3.1-wt-AE2 上调HUVECs AE2 mRNA 的表达.. | 第31-32页 |
| ·转染重组质粒pcDNA3.1-wt-AE2 上调HUVECs AE2 蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 第4章 讨论 | 第33-37页 |
| ·AE2 蛋白在高糖诱导内皮细胞凋亡中的作用 | 第33-34页 |
| ·基因表达系统 | 第34-35页 |
| ·长链PCR | 第35-36页 |
| ·不足之处 | 第36-37页 |
| 第5章 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 综述 | 第42-49页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第49页 |
