中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-16页 |
引言 | 第16-38页 |
1 核基质结合区(MAR) | 第16-20页 |
·MAR 的发现 | 第16页 |
·MAR 的基因组学特征 | 第16-19页 |
·MAR 的分类 | 第19-20页 |
2 MAR 结合蛋白(MARBP ,MAR binding protein) | 第20-28页 |
·核基质蛋白 | 第21-24页 |
·转录体系组分 | 第24-25页 |
·转录因子 | 第25-27页 |
·其他MAR 结合蛋白 | 第27-28页 |
3 MAR 介导的调控功能的多样性 | 第28-31页 |
·MAR 提供活跃整合位点 | 第28页 |
·MAR 介导的转录水平调控 | 第28-30页 |
·MAR 介导的基因表达模式调控 | 第30页 |
·MAR 介导的染色质改构 | 第30-31页 |
4 MAR 增强基因表达的作用机制 | 第31-33页 |
·MAR 介导的DNA 甲基化调控 | 第31页 |
·MAR 介导的DNA loop 效应 | 第31-32页 |
·MAR 介导的DNA 解旋作用 | 第32-33页 |
·MAR 介导的核小体开放 | 第33页 |
5 MAR-MARBP 互作研究方法 | 第33-37页 |
·MAR 的分离方法 | 第33-35页 |
·MARBP 的分离方法 | 第35-36页 |
·MAR-MARBP 互作分析方法 | 第36-37页 |
6 研究目的与意义 | 第37-38页 |
第一章 TM2 在植物细胞核内表达调控机制的研究 | 第38-62页 |
1 材料与方法 | 第38-48页 |
·试验材料 | 第38-39页 |
·试验方法 | 第39-48页 |
2 结果与分析 | 第48-56页 |
·烟草TM2 序列分析 | 第48-49页 |
·TM2 串联重复对表达增强效应的影响 | 第49-50页 |
·TM2 增强转基因表达的位置效应和方向性 | 第50-52页 |
·TM2 功能对启动子的依赖性 | 第52-54页 |
·TM2 几个功能位点的突变分析 | 第54-55页 |
·TM2 对侧翼启动子区微球菌核酸酶敏感性的影响 | 第55-56页 |
·TM2 在植物瞬时表达调控中的功能 | 第56页 |
3 讨论 | 第56-60页 |
·TM2 对转基因的表达调控作用 | 第56-58页 |
·TM2 的类增强子作用 | 第58-60页 |
·TM2 的表达增强作用是一种综合效应 | 第60页 |
4 结论 | 第60-62页 |
第二章 TM2 在核外质粒表达系统中的异源表达调控研究 | 第62-73页 |
1 材料与方法 | 第62-65页 |
·试验材料 | 第62-63页 |
·试验方法 | 第63-65页 |
2 结果与分析 | 第65-71页 |
·TM2 对酵母质粒表达的调控作用 | 第65-66页 |
·TM2 对酵母质粒表达增强的位置效应 | 第66-67页 |
·TM2 在酵母质粒表达系统中的功能区段分析 | 第67-68页 |
·酵母质粒表达系统中 TM2 的位点缺失功能分析 | 第68-69页 |
·TM2 对大肠杆菌质粒表达的调控作用 | 第69-71页 |
3 讨论 | 第71-72页 |
·TM2 的功能与DNA 结构的关系 | 第71页 |
·TM2 是一种广谱的类增强子序列 | 第71-72页 |
4 结论 | 第72-73页 |
第三章 TM2 结合蛋白的分离鉴定 | 第73-94页 |
1 材料与方法 | 第73-82页 |
·试验材料 | 第73-74页 |
·试验方法 | 第74-82页 |
2 结果与分析 | 第82-92页 |
·烟草 TM2 序列的分段克隆及其酵母诱饵载体的构建 | 第82-83页 |
·载体烟草 cDNA pool 的获得及其酵母单杂交分析 | 第83-84页 |
·烟草NtRB 与TM2 的互作分析 | 第84-88页 |
·NtRB 基因的序列分析 | 第84-85页 |
·NtRB 蛋白的亚细胞定位分析 | 第85-86页 |
·NtRB 蛋白的原核表达及纯化 | 第86-87页 |
·TM2 和 NtRB 蛋白的体外互作分析 | 第87-88页 |
·烟草 NtMFP 与 TM2 的互作分析 | 第88-89页 |
·烟草 NtDB 与 TM2 的互作分析 | 第89-92页 |
·NtDB 基因的序列分析 | 第89-91页 |
·NtDB 的诱导表达及其与TM2 的体外互作分析 | 第91-92页 |
3 讨论 | 第92-93页 |
·TM2 结合蛋白的多样性 | 第92页 |
·酵母单杂交系统在MAR 功能研究中的应用 | 第92页 |
·酵母杂交系统分析中的假阳性问题 | 第92-93页 |
4 结论 | 第93-94页 |
第四章 植物高效表达载体的构建及其应用 | 第94-105页 |
1 材料与方法 | 第94-96页 |
·试验材料 | 第94-95页 |
·试验方法 | 第95-96页 |
2 结果与分析 | 第96-102页 |
·利用5′-MAR 提高转化效率 | 第96-97页 |
·植物转基因高效超表达载体的构建 | 第97-99页 |
·利用引导序列提高转基因表达水平 | 第97-98页 |
·利用融合MAR 序列提高转基因表达水平 | 第98-99页 |
·基于内源发夹结构的植物表达干涉载体的构建 | 第99-100页 |
·基于外源发夹结构的植物表达干涉载体的构建 | 第100-101页 |
·植物In-fusion Smart 表达载体构建 | 第101-102页 |
3 讨论 | 第102-104页 |
·植物高效表达载体在转基因表达调控中的应用 | 第102-103页 |
·TM2 序列在植物高效表达载体中的应用 | 第103页 |
·植物基因功能的高通量分析 | 第103-104页 |
4 结论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-125页 |
附录 | 第125-130页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第130-131页 |
致谢 | 第131页 |