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烟草TM2 MAR序列作用机理研究及其应用

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-16页
引言第16-38页
 1 核基质结合区(MAR)第16-20页
   ·MAR 的发现第16页
   ·MAR 的基因组学特征第16-19页
   ·MAR 的分类第19-20页
 2 MAR 结合蛋白(MARBP ,MAR binding protein)第20-28页
   ·核基质蛋白第21-24页
   ·转录体系组分第24-25页
   ·转录因子第25-27页
   ·其他MAR 结合蛋白第27-28页
 3 MAR 介导的调控功能的多样性第28-31页
   ·MAR 提供活跃整合位点第28页
   ·MAR 介导的转录水平调控第28-30页
   ·MAR 介导的基因表达模式调控第30页
   ·MAR 介导的染色质改构第30-31页
 4 MAR 增强基因表达的作用机制第31-33页
   ·MAR 介导的DNA 甲基化调控第31页
   ·MAR 介导的DNA loop 效应第31-32页
   ·MAR 介导的DNA 解旋作用第32-33页
   ·MAR 介导的核小体开放第33页
 5 MAR-MARBP 互作研究方法第33-37页
   ·MAR 的分离方法第33-35页
   ·MARBP 的分离方法第35-36页
   ·MAR-MARBP 互作分析方法第36-37页
 6 研究目的与意义第37-38页
第一章 TM2 在植物细胞核内表达调控机制的研究第38-62页
 1 材料与方法第38-48页
   ·试验材料第38-39页
   ·试验方法第39-48页
 2 结果与分析第48-56页
   ·烟草TM2 序列分析第48-49页
   ·TM2 串联重复对表达增强效应的影响第49-50页
   ·TM2 增强转基因表达的位置效应和方向性第50-52页
   ·TM2 功能对启动子的依赖性第52-54页
   ·TM2 几个功能位点的突变分析第54-55页
   ·TM2 对侧翼启动子区微球菌核酸酶敏感性的影响第55-56页
   ·TM2 在植物瞬时表达调控中的功能第56页
 3 讨论第56-60页
   ·TM2 对转基因的表达调控作用第56-58页
   ·TM2 的类增强子作用第58-60页
   ·TM2 的表达增强作用是一种综合效应第60页
 4 结论第60-62页
第二章 TM2 在核外质粒表达系统中的异源表达调控研究第62-73页
 1 材料与方法第62-65页
   ·试验材料第62-63页
   ·试验方法第63-65页
 2 结果与分析第65-71页
   ·TM2 对酵母质粒表达的调控作用第65-66页
   ·TM2 对酵母质粒表达增强的位置效应第66-67页
   ·TM2 在酵母质粒表达系统中的功能区段分析第67-68页
   ·酵母质粒表达系统中 TM2 的位点缺失功能分析第68-69页
   ·TM2 对大肠杆菌质粒表达的调控作用第69-71页
 3 讨论第71-72页
   ·TM2 的功能与DNA 结构的关系第71页
   ·TM2 是一种广谱的类增强子序列第71-72页
 4 结论第72-73页
第三章 TM2 结合蛋白的分离鉴定第73-94页
 1 材料与方法第73-82页
   ·试验材料第73-74页
   ·试验方法第74-82页
 2 结果与分析第82-92页
   ·烟草 TM2 序列的分段克隆及其酵母诱饵载体的构建第82-83页
   ·载体烟草 cDNA pool 的获得及其酵母单杂交分析第83-84页
   ·烟草NtRB 与TM2 的互作分析第84-88页
     ·NtRB 基因的序列分析第84-85页
     ·NtRB 蛋白的亚细胞定位分析第85-86页
     ·NtRB 蛋白的原核表达及纯化第86-87页
     ·TM2 和 NtRB 蛋白的体外互作分析第87-88页
   ·烟草 NtMFP 与 TM2 的互作分析第88-89页
   ·烟草 NtDB 与 TM2 的互作分析第89-92页
     ·NtDB 基因的序列分析第89-91页
     ·NtDB 的诱导表达及其与TM2 的体外互作分析第91-92页
 3 讨论第92-93页
   ·TM2 结合蛋白的多样性第92页
   ·酵母单杂交系统在MAR 功能研究中的应用第92页
   ·酵母杂交系统分析中的假阳性问题第92-93页
 4 结论第93-94页
第四章 植物高效表达载体的构建及其应用第94-105页
 1 材料与方法第94-96页
   ·试验材料第94-95页
   ·试验方法第95-96页
 2 结果与分析第96-102页
   ·利用5′-MAR 提高转化效率第96-97页
   ·植物转基因高效超表达载体的构建第97-99页
     ·利用引导序列提高转基因表达水平第97-98页
     ·利用融合MAR 序列提高转基因表达水平第98-99页
   ·基于内源发夹结构的植物表达干涉载体的构建第99-100页
   ·基于外源发夹结构的植物表达干涉载体的构建第100-101页
   ·植物In-fusion Smart 表达载体构建第101-102页
 3 讨论第102-104页
   ·植物高效表达载体在转基因表达调控中的应用第102-103页
   ·TM2 序列在植物高效表达载体中的应用第103页
   ·植物基因功能的高通量分析第103-104页
 4 结论第104-105页
参考文献第105-125页
附录第125-130页
攻读学位期间发表论文情况第130-131页
致谢第131页

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