| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-34页 |
| ·牧草生物技术研究进展 | 第14-22页 |
| ·国内外牧草生物技术的研究现状 | 第14-15页 |
| ·转基因牧草研究现状与进展 | 第15-16页 |
| ·豆科牧草基因转化的研究 | 第16-21页 |
| ·牧草基因工程存在的问题 | 第21-22页 |
| ·展望 | 第22页 |
| ·植物转基因技术简介 | 第22-30页 |
| ·植物转基因技术原理 | 第23页 |
| ·植物转基因的方法 | 第23-29页 |
| ·植物转基因技术的应用 | 第29页 |
| ·问题与展望 | 第29-30页 |
| ·羊柴研究进展简介 | 第30-32页 |
| ·本文的研究意义和主要内容 | 第32-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-41页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·菌株及质粒 | 第34页 |
| ·酶与试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-41页 |
| ·培养基 | 第34-37页 |
| ·羊柴种子的消毒 | 第37页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第37页 |
| ·卡那霉素(Kanamycin，Kan)抗性检测 | 第37页 |
| ·甘油预处理 | 第37页 |
| ·离子束注入羊柴种子和愈伤组织 | 第37页 |
| ·离子注入羊柴种子后发芽率和存活率的统计 | 第37页 |
| ·离子注入愈伤组织后失水率、愈伤组织重量增长倍数的统计 | 第37-38页 |
| ·离子注入愈伤组织后细胞活力的测定 | 第38页 |
| ·质粒 DNA的提取 | 第38页 |
| ·质粒 DNA直接转化羊柴种子 | 第38页 |
| ·质粒 DNA转化愈伤组织 | 第38页 |
| ·农杆菌的培养 | 第38页 |
| ·离子束辅助农杆菌转染羊柴愈伤组织 | 第38-39页 |
| ·组织化学染色 | 第39页 |
| ·基因组 DNA的提取 | 第39页 |
| ·PCR检测 | 第39-41页 |
| 第三章 离子束注入羊柴种子和愈伤组织体系的建立 | 第41-55页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第41-46页 |
| ·培养基的配制 | 第41-42页 |
| ·诱导方法 | 第42页 |
| ·不同植物生长调节剂对出愈率的影响 | 第42-44页 |
| ·卡那霉素(Kanamycin，Kan)敏感性检测 | 第44-46页 |
| ·离子束注入羊柴成熟种子 | 第46-50页 |
| ·离子束注入干种子 | 第46页 |
| ·发芽率的测定 | 第46页 |
| ·离子束注入剂量-存活率曲线 | 第46-48页 |
| ·差异显著性分析 | 第48-49页 |
| ·正交多项式回归分析 | 第49-50页 |
| ·离子束注入愈伤组织 | 第50-53页 |
| ·离子注入愈伤组织后失水率的统计 | 第50-51页 |
| ·愈伤组织重量增长倍数的统计 | 第51-52页 |
| ·细胞存活力的测定 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-55页 |
| 第四章 离子束介导质粒 DNA转化羊柴种子及愈伤组织的研究 | 第55-64页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·实验材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-59页 |
| ·质粒的中量提取 | 第55-56页 |
| ·离子束介导质粒 DNA转化羊柴干种子 | 第56-57页 |
| ·离子束介导质粒 DNA转化羊柴愈伤组织 | 第57页 |
| ·GUS染色 | 第57-58页 |
| ·转化受体的抗性筛选 | 第58页 |
| ·转化体的 PCR检测 | 第58-59页 |
| ·实验结果分析 | 第59-62页 |
| ·干种子转化结果 | 第59-60页 |
| ·愈伤组织的转化结果 | 第60页 |
| ·卡那霉素抗性筛选结果 | 第60-61页 |
| ·转化体的 PCR检测结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 离子束辅助农杆菌转染羊柴愈伤组织的研究 | 第64-68页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64-65页 |
| ·感受态细胞制备 | 第65页 |
| ·冻融法转化农杆菌 LBA4404感受态细胞 | 第65页 |
| ·离子束辅助农杆菌介导的羊柴愈伤组织的遗传转化 | 第65-66页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第65页 |
| ·转化方法 | 第65-66页 |
| ·PCR检测 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第六章 总结 | 第68-71页 |
| ·离子束注入羊柴种子体系的建立 | 第68页 |
| ·离子束注入羊柴愈伤组织体系的建立 | 第68-69页 |
| ·离子束介导质粒 DNA转化羊柴种子及愈伤组织体系的建立 | 第69页 |
| ·离子束辅助农杆菌转染羊柴愈伤组织 | 第69页 |
| ·PCR检测 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 英文符号缩写注释 | 第78-79页 |
| 撰写的论文 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
