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聚乙烯二氨三嗪基氢键型基因转染系统的细胞内化研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 绪论第7-26页
   ·引言第7页
   ·胞外障碍及对策第7-11页
   ·胞内障碍及对策第11-16页
     ·细胞摄入第11-13页
     ·内涵体和溶酶体逃脱第13-15页
     ·质粒DNA 进核的障碍第15-16页
   ·基因与载体解离障碍第16-24页
     ·阳离子载体改性第18-22页
     ·基于非静电相互作用转基因载体的尝试第22-24页
       ·裂皱菌多糖(SPG)转基因载体第22-23页
       ·大环结构糖类转基因载体第23页
       ·PVDT基聚合物转基因载体第23-24页
   ·本论文拟开展的工作第24-26页
第二章 PVDT基聚合物/pDNA复合物的制备与表征第26-38页
   ·引言第26页
   ·实验部分第26-30页
     ·实验药品第26-27页
     ·实验仪器第27页
     ·PVDT基转基因载体的制备第27-28页
       ·合成均聚PVDT第27页
       ·合成均聚PVP第27页
       ·合成PVDT-PVP共聚物第27-28页
     ·PVDT基转基因载体的表征第28页
       ·核磁共振氢谱表征(~1H NMR)第28页
       ·紫外分光光度计定量PVDT基聚合物浓度第28页
     ·菌体的培养与质粒的提取第28-30页
       ·液体培养基(LB)配制第28-29页
       ·菌体培养(摇菌)第29页
       ·质粒提取第29-30页
     ·PVDT基聚合物/pDNA复合物的制备第30页
     ·琼脂糖凝胶电泳第30页
     ·Zeta电位和粒子尺寸测量第30页
   ·结果与讨论第30-37页
     ·核磁共振氢谱(1H NMR)确定共聚物共聚比第30-32页
     ·未知PVDT基聚合物浓度定量第32-34页
     ·凝胶电泳考察PVDT基载体与pDNA的复合第34-36页
     ·PVDT基聚合物/pDNA复合物的表面电荷及粒子尺寸第36-37页
   ·结论第37-38页
第三章 PVDT基聚合物/pDNA复合物的体外细胞转染机理研究第38-56页
   ·引言第38页
   ·实验部分第38-45页
     ·试剂耗材第38-39页
     ·实验仪器第39-40页
     ·COS-1 细胞的培养第40-41页
       ·培养液的制备第40-41页
       ·细胞培养第41页
     ·体外转染COS-1 细胞第41-42页
     ·荧光素酶(Luciferase)活性的测定第42页
     ·BCA法测总蛋白第42-43页
     ·MTT法考察载体的细胞毒性第43页
     ·流式细胞仪和荧光显微镜观察第43-44页
     ·荧光报告基因表达第44页
     ·药物抑制实验第44-45页
   ·结果与讨论第45-55页
     ·PVDT基聚合物/pDNA复合物的细胞吸收第45-48页
     ·药物和温度抑制实验第48-52页
     ·PVDT基聚合物控制的基因转染的动力学研究第52-55页
   ·结论第55-56页
第四章 全文结论第56-57页
参考文献第57-62页
发表论文和参加科研情况说明第62-63页
致谢第63页

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