摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-26页 |
·引言 | 第7页 |
·胞外障碍及对策 | 第7-11页 |
·胞内障碍及对策 | 第11-16页 |
·细胞摄入 | 第11-13页 |
·内涵体和溶酶体逃脱 | 第13-15页 |
·质粒DNA 进核的障碍 | 第15-16页 |
·基因与载体解离障碍 | 第16-24页 |
·阳离子载体改性 | 第18-22页 |
·基于非静电相互作用转基因载体的尝试 | 第22-24页 |
·裂皱菌多糖(SPG)转基因载体 | 第22-23页 |
·大环结构糖类转基因载体 | 第23页 |
·PVDT基聚合物转基因载体 | 第23-24页 |
·本论文拟开展的工作 | 第24-26页 |
第二章 PVDT基聚合物/pDNA复合物的制备与表征 | 第26-38页 |
·引言 | 第26页 |
·实验部分 | 第26-30页 |
·实验药品 | 第26-27页 |
·实验仪器 | 第27页 |
·PVDT基转基因载体的制备 | 第27-28页 |
·合成均聚PVDT | 第27页 |
·合成均聚PVP | 第27页 |
·合成PVDT-PVP共聚物 | 第27-28页 |
·PVDT基转基因载体的表征 | 第28页 |
·核磁共振氢谱表征(~1H NMR) | 第28页 |
·紫外分光光度计定量PVDT基聚合物浓度 | 第28页 |
·菌体的培养与质粒的提取 | 第28-30页 |
·液体培养基(LB)配制 | 第28-29页 |
·菌体培养(摇菌) | 第29页 |
·质粒提取 | 第29-30页 |
·PVDT基聚合物/pDNA复合物的制备 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
·Zeta电位和粒子尺寸测量 | 第30页 |
·结果与讨论 | 第30-37页 |
·核磁共振氢谱(1H NMR)确定共聚物共聚比 | 第30-32页 |
·未知PVDT基聚合物浓度定量 | 第32-34页 |
·凝胶电泳考察PVDT基载体与pDNA的复合 | 第34-36页 |
·PVDT基聚合物/pDNA复合物的表面电荷及粒子尺寸 | 第36-37页 |
·结论 | 第37-38页 |
第三章 PVDT基聚合物/pDNA复合物的体外细胞转染机理研究 | 第38-56页 |
·引言 | 第38页 |
·实验部分 | 第38-45页 |
·试剂耗材 | 第38-39页 |
·实验仪器 | 第39-40页 |
·COS-1 细胞的培养 | 第40-41页 |
·培养液的制备 | 第40-41页 |
·细胞培养 | 第41页 |
·体外转染COS-1 细胞 | 第41-42页 |
·荧光素酶(Luciferase)活性的测定 | 第42页 |
·BCA法测总蛋白 | 第42-43页 |
·MTT法考察载体的细胞毒性 | 第43页 |
·流式细胞仪和荧光显微镜观察 | 第43-44页 |
·荧光报告基因表达 | 第44页 |
·药物抑制实验 | 第44-45页 |
·结果与讨论 | 第45-55页 |
·PVDT基聚合物/pDNA复合物的细胞吸收 | 第45-48页 |
·药物和温度抑制实验 | 第48-52页 |
·PVDT基聚合物控制的基因转染的动力学研究 | 第52-55页 |
·结论 | 第55-56页 |
第四章 全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |