| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 MEKK2概述 | 第9-10页 |
| 2 筛选相互作用蛋白方法 | 第10-15页 |
| ·酵母双杂交 | 第11-12页 |
| ·串联亲和纯化 | 第12-14页 |
| ·蛋白质芯片技术 | 第14页 |
| ·基于生物信息学的分析方法 | 第14-15页 |
| ·其他方法 | 第15页 |
| 3 质谱在蛋白质相互作用分析中的应用 | 第15-16页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 酵母双杂交筛选MEKK2相互作用蛋白 | 第17-28页 |
| 1 材料与方法 | 第17-24页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-26页 |
| ·PCR产物鉴定 | 第24-25页 |
| ·pGBKT7-MEKK2重组质粒的鉴定 | 第25页 |
| ·酵母双杂交筛选结果 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| ·酵母双杂交转化效率 | 第26页 |
| ·酵母双杂交筛选 | 第26页 |
| ·酵母双杂交的优点与缺点 | 第26-28页 |
| 第三章 串联亲和纯化(TAP)筛选MEKK2相互作用蛋白 | 第28-47页 |
| 1 材料与方法 | 第28-36页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·方法 | 第30-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-43页 |
| ·PCR产物的鉴定 | 第36-37页 |
| ·pCTAP-MEKK2酶切鉴定 | 第37页 |
| ·pCTAP-MEKK2在HEK293细胞中表达 | 第37-38页 |
| ·稳定细胞系表达 | 第38页 |
| ·TAP纯化电泳鉴定 | 第38-39页 |
| ·纯化蛋白复合物银染鉴定 | 第39页 |
| ·纯化蛋白复合物质谱鉴定 | 第39-43页 |
| 3 讨论 | 第43-47页 |
| ·TAP技术的标签 | 第43页 |
| ·稳定转染建立细胞系 | 第43-44页 |
| ·质谱鉴定 | 第44-45页 |
| ·TAP技术的优点与弊端 | 第45页 |
| ·TAP技术的应用 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54页 |