| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·启动子功能的研究进展 | 第7-8页 |
| ·启动子的基本结构及功能 | 第7页 |
| ·启动子的功能研究 | 第7页 |
| ·启动子功能的应用 | 第7-8页 |
| ·酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子 | 第8页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第8-12页 |
| ·简介 | 第8-9页 |
| ·毕赤酵母中的甲醇代谢 | 第9-10页 |
| ·重组表达系统的构建 | 第10-11页 |
| ·启动子的选择 | 第11-12页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第12页 |
| ·几丁质酶的研究概况 | 第12-14页 |
| ·几丁质的简介 | 第12-13页 |
| ·几丁质酶及其应用 | 第13页 |
| ·几丁质酶的克隆表达 | 第13-14页 |
| ·本论文的立题意义及研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-25页 |
| ·实验材料 | 第15-16页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·主要实验试剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·培养基和缓冲液的配置 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-25页 |
| ·酿酒酵母染色体的提取 | 第16页 |
| ·毕赤酵母染色体的提取[57] | 第16页 |
| ·引物设计与合成 | 第16-17页 |
| ·报告基因gfp 和启动子pScgpd 的克隆 | 第17页 |
| ·重组酿酒酵母S.cerevisiae W303-1A /pYX212-gfp 和 S.cerevisiae W303-1A/pYX-pScgpd-gfp（PG）的构建 | 第17-18页 |
| ·重组P.pastoris X33/pGAPZB-gfp 和X33/pGPDZB-gfp 的构建 | 第18页 |
| ·重组P.pastoris GS115/pPIC9K-gfp 和GS115/pPIC9K-PG 的构建 | 第18-19页 |
| ·绿色荧光蛋白GFP 的检测 | 第19-20页 |
| ·启动子在不同浓度高渗溶液中的功能比较 | 第20页 |
| ·酿酒酵母几丁质酶基因Sccts 在毕赤酵母中的表达 | 第20-22页 |
| ·重组毕赤酵母的培养条件优化 | 第22页 |
| ·5L 发酵罐实验 | 第22-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-47页 |
| ·含有两种启动子的重组酿酒酵母的功能比较 | 第25-28页 |
| ·重组表达载体pYX212-gfp 和pYX-pScgpd-gfp(PG)的构建 | 第25-27页 |
| ·重组酿酒酵母的构建及表型验证 | 第27页 |
| ·启动子在不同浓度高渗溶液中的功能比较 | 第27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| ·重组毕赤酵母P.pastoris X33/pGAPZB-gfp 和 P.pastoris X33/pGPDZB-gfp 的比较 | 第28-32页 |
| ·重组表达载体pGAPZB-gfp 和pGPDZB-gfp 的构建与酶切验证 | 第28-30页 |
| ·重组毕赤酵母X33 的构建与表型验证 | 第30页 |
| ·启动子在不同浓度高渗溶液中的功能比较 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| ·重组毕赤酵母P.pastoris GS115/pPIC9K-gfp 和 P.pastoris GS115/pPIC9K-PG 的功能比较 | 第32-36页 |
| ·重组表达载体pPIC9K-gfp 和pPIC9K-PG 的构建与酶切验证 | 第32-34页 |
| ·重组毕赤酵母GS115 的构建与表型验证 | 第34页 |
| ·启动子在不同浓度高渗溶液中的功能比较 | 第34-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·酿酒酵母几丁质酶基因Sccts 在毕赤酵母GS115 中的表达 | 第36-47页 |
| ·几丁质酶基因Sccts 的克隆和pPIC9K-Sccts 的构建 | 第36-37页 |
| ·重组P.pastoris GS115/pPIC9K-Sccts 的构建与转化子的鉴定 | 第37页 |
| ·重组菌的筛选及诱导表达 | 第37-38页 |
| ·重组毕赤酵母的培养条件优化 | 第38-42页 |
| ·5L 罐发酵实验 | 第42-45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 主要结论与展望 | 第47-49页 |
| 主要结论 | 第47页 |
| 展望 | 第47-49页 |
| 致谢 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |
