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人类AHI1蛋白SH3结构域的初级晶体学研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第1章 文献综述第10-26页
   ·JOUBERT 综合症第10-12页
   ·AHI1 基因和AHI1 蛋白第12-13页
   ·SH3 结构域第13-18页
   ·蛋白质结构研究主要方法第18-21页
   ·HAP1 蛋白第21-23页
   ·PULL-DOWN 实验第23-26页
第2章 引言第26-28页
第3章 材料与方法第28-42页
   ·实验材料第28-29页
     ·质粒,菌株与AHI1 基因第28页
     ·仪器第28-29页
     ·试剂及试剂盒第29页
   ·溶液配制第29-30页
   ·实验方法第30-42页
     ·SH3-pET28a(+)表达质粒的构建第30-33页
     ·SH3 结构域的表达第33-35页
     ·SH3 结构域的纯化第35-37页
     ·动态光散射实验第37页
     ·SH3 结构域的结晶第37-38页
     ·SH3 结构域的晶体衍射第38页
     ·晶体衍射数据处理第38页
     ·hHAP1 片段-GST 融合蛋白表达质粒的构建第38-39页
     ·GST-HAP1 肽段的表达第39-40页
     ·GST-HAP1 肽段的纯化第40页
     ·Pull-down 实验第40-42页
第4章 结果与分析第42-52页
   ·SH3-pET28a(+)表达质粒的构建第42-43页
   ·SH3 结构域的表达第43-44页
   ·Ni柱初步纯化第44页
   ·分子筛纯化第44-45页
   ·SH3 结构域的动态光散射实验第45-46页
   ·SH3 结构域的晶体生长第46-48页
   ·SH3 结构域晶体的衍射数据收集第48页
   ·pGEX4T3 表达载体的构建第48-50页
   ·小量表达第50页
   ·纯化第50-51页
   ·Pull-down 实验第51-52页
第5章 讨论第52-54页
参考文献第54-63页
致谢第63-64页
附录第64页

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