摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-26页 |
·JOUBERT 综合症 | 第10-12页 |
·AHI1 基因和AHI1 蛋白 | 第12-13页 |
·SH3 结构域 | 第13-18页 |
·蛋白质结构研究主要方法 | 第18-21页 |
·HAP1 蛋白 | 第21-23页 |
·PULL-DOWN 实验 | 第23-26页 |
第2章 引言 | 第26-28页 |
第3章 材料与方法 | 第28-42页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·质粒,菌株与AHI1 基因 | 第28页 |
·仪器 | 第28-29页 |
·试剂及试剂盒 | 第29页 |
·溶液配制 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-42页 |
·SH3-pET28a(+)表达质粒的构建 | 第30-33页 |
·SH3 结构域的表达 | 第33-35页 |
·SH3 结构域的纯化 | 第35-37页 |
·动态光散射实验 | 第37页 |
·SH3 结构域的结晶 | 第37-38页 |
·SH3 结构域的晶体衍射 | 第38页 |
·晶体衍射数据处理 | 第38页 |
·hHAP1 片段-GST 融合蛋白表达质粒的构建 | 第38-39页 |
·GST-HAP1 肽段的表达 | 第39-40页 |
·GST-HAP1 肽段的纯化 | 第40页 |
·Pull-down 实验 | 第40-42页 |
第4章 结果与分析 | 第42-52页 |
·SH3-pET28a(+)表达质粒的构建 | 第42-43页 |
·SH3 结构域的表达 | 第43-44页 |
·Ni柱初步纯化 | 第44页 |
·分子筛纯化 | 第44-45页 |
·SH3 结构域的动态光散射实验 | 第45-46页 |
·SH3 结构域的晶体生长 | 第46-48页 |
·SH3 结构域晶体的衍射数据收集 | 第48页 |
·pGEX4T3 表达载体的构建 | 第48-50页 |
·小量表达 | 第50页 |
·纯化 | 第50-51页 |
·Pull-down 实验 | 第51-52页 |
第5章 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录 | 第64页 |