| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-13页 |
| ·真核启动子的一般特点 | 第8-9页 |
| ·核心启动子 | 第8-9页 |
| ·上游启动子元件 | 第9页 |
| ·植物基因工程启动子研究进展 | 第9-12页 |
| ·组成型启动子 | 第9-10页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第10-11页 |
| ·诱导型启动子 | 第11-12页 |
| ·基因工程在茶学研究的应用现状及展望 | 第12-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| ·研究目的与意义 | 第13页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第13-15页 |
| ·研究内容 | 第13-14页 |
| ·技术路线 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-29页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·宿主菌与质粒 | 第15页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·生化与分子生物学试剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15-16页 |
| ·培养基和溶液配制 | 第16-18页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·常用基本溶液 | 第17页 |
| ·基因组DNA 提取缓冲液 | 第17页 |
| ·GUS 组织化学染色溶液 | 第17页 |
| ·GUS 瞬时定量检测所需溶液 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-29页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·植物总DNA 的提取方法 | 第19-20页 |
| ·基因组DNA 的检测 | 第20页 |
| ·特异片段的回收、克隆与测序 | 第20-22页 |
| ·真核表达载体 pBI121-Cpcp 转化农杆菌 EHA105(工程菌株的构建) | 第22-24页 |
| ·影响农杆菌有效侵染相关因素的研究 | 第24页 |
| ·用表达组织化学染色法检测GUS 基因瞬时表达 | 第24-25页 |
| ·花粉粒及花粉管萌发后的瞬时表达检测 | 第25页 |
| ·GUS 瞬时表达定量检测 | 第25-26页 |
| ·茶树种子在干旱胁迫条件下的GUS 活性检测 | 第26-27页 |
| ·转基因烟草的获得及PCR 检测 | 第27-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-48页 |
| ·茶树PCP 基因内含子的克隆与序列分析 | 第29-30页 |
| ·茶树叶片基因组DNA 的提取与质量检测 | 第29页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第29-30页 |
| ·序列测定结果 | 第30页 |
| ·茶树PCP 内含子结果分析 | 第30页 |
| ·茶树花特异表达启动子-花粉壁蛋白基因启动子的克隆与功能分析 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增片段的测序与序列分析 | 第31页 |
| ·工程菌的构建 | 第31-34页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·pBI121-Cpcp 表达载体转化农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
| ·影响农杆菌有效侵染相关因素的研究 | 第34-36页 |
| ·农杆菌菌液浓度对花粉离体培养的影响 | 第34-35页 |
| ·乙酰丁香酮对农杆菌诱导效率的影响 | 第35页 |
| ·共培养时间对农杆菌转化的影响 | 第35-36页 |
| ·农杆菌转化参数的确定 | 第36页 |
| ·化学组织染色分析 Cpcp 启动子在不同植株不同组织的表达 | 第36-44页 |
| ·茶树GUS 瞬时表达检测结果 | 第36-38页 |
| ·丝瓜GUS 瞬时表达检测结果 | 第38-39页 |
| ·一串红GUS 瞬时表达检测结果 | 第39-41页 |
| ·木槿GUS 瞬时表达检测结果 | 第41-42页 |
| ·油菜 GUS 瞬时表达检测结果 | 第42-43页 |
| ·花粉粒及花粉管萌发后的瞬时表达检测 | 第43-44页 |
| ·Cpcp 启动子在油菜不同器官的瞬时表达活性比较 | 第44-45页 |
| ·Cpcp 启动子在干旱胁迫条件下的瞬时表达活性比较 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草的获得及PCR 检测 | 第46-48页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-51页 |
| ·茶树PCP 基因内含子的功能分析 | 第48页 |
| ·农杆菌转化法的影响因素 | 第48-49页 |
| ·化学组织染色分析 Cpcp 启动子在不同植株不同组织的表达 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导的茶树 Cpcp 启动子瞬时表达 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| ·茶树PCP 基因内含子的克隆与序列分析 | 第51页 |
| ·茶树 Cpcp 启动子真核表达载体的构建 | 第51页 |
| ·茶树 Cpcp 启动子功能的研究 | 第51页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 英文缩写词表 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
