中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-21页 |
·转座子的分类与特征 | 第11-15页 |
·转座子的应用 | 第15-18页 |
·转座子标签法 | 第15-17页 |
·转座子标签法的优势 | 第15页 |
·转座子标签法克隆基因的步骤 | 第15页 |
·转座子标签法的应用 | 第15-17页 |
·利用转座元件开发分子标记 | 第15-17页 |
·利用转座子标签法克隆未知基因 | 第17页 |
·利用转座子构建真核生物基因表达系统或载体 | 第17-18页 |
·PIF 转座子的研究现状 | 第18-20页 |
·本研究的目的与策略 | 第20-21页 |
2 竹子中 PIF-like 转座子多样性的初步研究和毛竹 PIF-like 转座子基因的克隆 | 第21-52页 |
(一) 实验材料 | 第21页 |
(二) 试剂 | 第21-22页 |
(三) 仪器设备 | 第22页 |
(四) 研究方法 | 第22-31页 |
1 竹子中 PIF-like 转座子多样性的初步研究 | 第22-25页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第23页 |
·PCR 扩增 PIF-like 转座酶 | 第23-25页 |
·PCR 引物的设计 | 第23-24页 |
·PCR扩增及扩增后片段获取 | 第24页 |
·连接与转化 | 第24-25页 |
·感受态细胞制备 | 第24页 |
·转化 | 第24-25页 |
·质粒提取 | 第25页 |
·测序 | 第25页 |
·序列分析 | 第25页 |
2 毛竹PIF-like转座子长片段基因的克隆 | 第25-31页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第25页 |
·基因组 DNA 的超声波处理 | 第25-26页 |
·目的基因组片段的获取 | 第26页 |
·探针设计 | 第26页 |
·用磁珠法获取基因组片断 | 第26页 |
·DNA 片段末端平滑化 | 第26-27页 |
·载体制备 | 第27页 |
·连接 | 第27页 |
·转化 | 第27-28页 |
·电转化感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·转化 | 第28页 |
·Southern blotting杂交 | 第28-30页 |
·菌斑转移 | 第28页 |
·菌斑固定 | 第28-29页 |
·探针的标记 | 第29页 |
·杂交与清洗 | 第29页 |
·杂交信号的检测 | 第29-30页 |
·质粒提取 | 第30页 |
·测序与序列分析 | 第30-31页 |
(五) 结果与分析 | 第31-48页 |
1 竹子中 PIF-like 转座子多样性的初步研究 | 第31-38页 |
·基因组 DNA 提取的结果与分析 | 第31页 |
·PCR扩增PIF-like转座子基因结果与分析 | 第31-33页 |
·测序结果与序列分析 | 第33-35页 |
·竹子PIF-like转座酶演化分析 | 第35页 |
·竹子 PIF-like 转座酶多样性分析 | 第35-38页 |
2 毛竹 PIF-like 转座子长片段基因的克隆 | 第38-48页 |
·毛竹总基因组制备和超声波处理后的结果与分析 | 第38-39页 |
·质粒载体 Puc19 制备和处理后的结果与分析 | 第39页 |
·连接的结果与分析 | 第39-40页 |
·转化结果与分析 | 第40页 |
·Southern Blotting烤膜和杂交时间结果与分析 | 第40-41页 |
·southern杂交结果与分析 | 第41页 |
·质粒提取结果与分析 | 第41-48页 |
(六) 讨论 | 第48-51页 |
1 实验方法讨论 | 第48-49页 |
·基因组 DNA 片段获取的讨论 | 第48页 |
·插入片段的补平 | 第48页 |
·载体去磷酸化的控制 | 第48-49页 |
·电转化 | 第49页 |
2 实验结果讨论 | 第49-51页 |
·竹子中 PIF-like 转座子多样性的初步研究结果讨论 | 第49-50页 |
·毛竹 PIF-like 转座子基因克隆的结果讨论 | 第50-51页 |
(七) 主要结论与展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
个人简介 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |