| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-30页 |
| 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第12-27页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的研究概况 | 第12-15页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的发现及其命名 | 第12-13页 |
| ·对虾白斑综合症的症状与组织病理学 | 第13-14页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的大小和形态结构 | 第14页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及感染动物模型 | 第14-15页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第15-16页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第16-18页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第18-27页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第19-24页 |
| ·对虾白斑综合症病毒功能酶类 | 第24-26页 |
| ·对虾白斑病毒的其他功能基因 | 第26-27页 |
| 2 本论文研究的内容、目的和意义 | 第27-30页 |
| 第一部分 对虾白斑综合症病毒vp52B基因的鉴定及功能研究 | 第30-47页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-38页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-38页 |
| ·WSSV完整病毒粒子以及膜蛋白和核衣壳蛋白的制备 | 第32-33页 |
| ·vp52B基因的克隆表达和蛋白质的纯化 | 第33-34页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第34-35页 |
| ·Western blotting分析 | 第35页 |
| ·GST pull-down分析 | 第35-36页 |
| ·VP26蛋白质分段缺失突变体重组质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·VP26蛋白质分段缺失突变体的表达 | 第37页 |
| ·GST pull-down进一步分析VP52B与VP26的相互作用区域 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-45页 |
| ·pGEX-2T-vp52B-(6His)重组表达质粒的构建 | 第38页 |
| ·GST-VP52B的表达和可溶蛋白纯化 | 第38-39页 |
| ·western blot分析 | 第39-40页 |
| ·VP52B与VP26相互作用的鉴定 | 第40-42页 |
| ·VP26蛋白质分段缺失突变体的设计 | 第42-43页 |
| ·突变体蛋白重组载体的扩增 | 第43-44页 |
| ·VP26蛋白质分段缺失突变体的表达 | 第44页 |
| ·VP52B与VP26相互作用区域的分析 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第二部分 对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子筛选文库构建 | 第47-54页 |
| 1 前言 | 第47页 |
| 2 材料和方法 | 第47-49页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·WSSV基因组DNA随机片段的准备 | 第48页 |
| ·PIZ△IE/V5-EGFP-His载体的准备 | 第48页 |
| ·极早期基因启动子筛选文库的构建 | 第48-49页 |
| ·菌落PCR检测文库插入片段的大小 | 第49页 |
| ·转染昆虫细胞检测文库的可行性 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-52页 |
| ·建库载体的改造与WSSV基因组随机片段的准备 | 第49-51页 |
| ·极早期基因启动子筛选文库的构建 | 第51页 |
| ·插入片段随机性的检测 | 第51页 |
| ·文库可行性的初步测定 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第三部分 对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子的鉴定 | 第54-62页 |
| 1 前言 | 第54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-58页 |
| ·材料 | 第54-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·检测可能为WSSV极早期基因启动子片段的重组质粒的构建 | 第56-57页 |
| ·重组质粒转染昆虫细胞 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-60页 |
| ·预测可能为WSSV极早期基因启动子片段的PCR扩增 | 第58页 |
| ·检测启动子的重组质粒的双酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·昆虫细胞内验证启动子活性 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 缩略词 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-71页 |
| 1 主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 2 常用溶液及培养基的配制 | 第64-67页 |
| 3 常规实验方法 | 第67-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
