| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-17页 |
| 第1章 引言 | 第17-40页 |
| ·概述 | 第17-18页 |
| ·青钱柳的主要活性成分 | 第18-24页 |
| ·三萜化合物 | 第18-22页 |
| ·黄酮化合物 | 第22-23页 |
| ·多糖 | 第23页 |
| ·其它活性成分 | 第23-24页 |
| ·青钱柳的主要功能作用 | 第24-26页 |
| ·降血糖 | 第24页 |
| ·降血脂 | 第24-25页 |
| ·降血压 | 第25页 |
| ·增强免疫 | 第25-26页 |
| ·抗氧化与防衰老 | 第26页 |
| ·植物细胞培养与次生代谢产物生产 | 第26-28页 |
| ·植物细胞培养的概况 | 第26-27页 |
| ·植物细胞培养生产次生代谢产物现状 | 第27页 |
| ·植物细胞培养生产次生代谢产物的优势及问题 | 第27-28页 |
| ·青钱柳组织培养与次生代谢产物生产 | 第28-29页 |
| ·糖尿病与胰岛素信号转导 | 第29-36页 |
| ·胰岛素信号转导途径 | 第30-32页 |
| ·胰岛素信号转导关键靶点 | 第32-35页 |
| ·胰岛素抵抗细胞模型 | 第35-36页 |
| ·本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第36-40页 |
| ·课题来源 | 第36页 |
| ·研究价值和意义 | 第36-37页 |
| ·研究的技术路线 | 第37-38页 |
| ·主要研究内容 | 第38-40页 |
| 第2章 青钱柳细胞悬浮培养及三萜酸积累 | 第40-59页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·试验材料与设备 | 第40-41页 |
| ·原料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·标准品 | 第41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-44页 |
| ·愈伤组织的继代培养及改良 | 第41-42页 |
| ·悬浮培养细胞系的初步建立 | 第42页 |
| ·悬浮培养细胞生长曲线及总三萜酸积累曲线的建立 | 第42页 |
| ·宏量元素对总三萜酸产量的影响 | 第42-43页 |
| ·诱导子三氯化铈和水杨酸对总三萜酸产量的影响 | 第43页 |
| ·总三萜酸的提取及测定 | 第43-44页 |
| ·熊果酸和齐墩果酸测定 | 第44页 |
| ·总三萜酸薄层层析方法 | 第44页 |
| ·悬浮培养细胞鲜、干重测定 | 第44页 |
| ·数据分析及计算 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-54页 |
| ·愈伤组织的诱导、继代培养及优良愈伤组织的获得 | 第44-46页 |
| ·细胞悬浮培养体系的建立 | 第46-47页 |
| ·悬浮培养细胞生长曲线及总三萜酸积累曲线的建立 | 第47-48页 |
| ·宏量元素对总三萜酸产量的影响 | 第48-50页 |
| ·诱导子三氯化铈和水杨酸对总三萜酸产量的影响 | 第50-51页 |
| ·悬浮培养细胞、愈伤组织和叶片总三萜酸比较 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·愈伤组织的改良 | 第54-55页 |
| ·建立悬浮培养细胞系的关键 | 第55页 |
| ·培养基中宏量元素的调整 | 第55-57页 |
| ·稀土元素铈和水杨酸对次级代谢的促进作用 | 第57页 |
| ·青钱柳细胞悬浮培养生产三萜酸的可行性 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第3章 青钱柳悬浮培养细胞三萜酸提取分离及结构鉴定 | 第59-80页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·试验材料与设备 | 第59-60页 |
| ·原料 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59-60页 |
| ·试验方法 | 第60-63页 |
| ·总三萜酸提取 | 第60-61页 |
| ·三萜酸分离纯化流程 | 第61-63页 |
| ·RRLC-TOF/MS检测 | 第63页 |
| ·半制备高效液相色谱分离 | 第63页 |
| ·数据分析及计算 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-77页 |
| ·总三萜酸的提取 | 第63-66页 |
| ·化合物Ⅰ-Ⅴ纯度鉴定 | 第66-69页 |
| ·化合物Ⅰ-Ⅴ结构鉴定 | 第69-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·总三萜酸的提取 | 第77-78页 |
| ·总三萜酸的大孔树脂及凝胶纯化 | 第78页 |
| ·总三萜酸的鉴定 | 第78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| 第4章 青钱柳悬浮细胞三萜酸降糖作用研究 | 第80-103页 |
| ·引言 | 第80页 |
| ·试验材料与设备 | 第80-81页 |
| ·材料 | 第80页 |
| ·试剂 | 第80-81页 |
| ·实验仪器 | 第81页 |
| ·试验方法 | 第81-88页 |
| ·研究路线 | 第81-82页 |
| ·试剂配制 | 第82-83页 |
| ·3T3-L1前脂肪细胞复苏 | 第83页 |
| ·3T3-L1前脂肪细胞培养及传代 | 第83页 |
| ·3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化 | 第83-84页 |
| ·成熟脂肪细胞的鉴定 | 第84页 |
| ·三萜酸对脂肪细胞增殖、分化及葡萄糖消耗的影响 | 第84-87页 |
| ·葡萄糖消耗检测 | 第87页 |
| ·细胞内甘油三酯检测 | 第87-88页 |
| ·培养上清液游离脂肪酸测定 | 第88页 |
| ·数据分析及计算 | 第88页 |
| ·结果与分析 | 第88-98页 |
| ·三萜酸对前脂肪细胞增殖的影响 | 第88-89页 |
| ·三萜酸对前脂肪细胞葡萄糖消耗的影响 | 第89-90页 |
| ·三萜酸对前脂肪细胞分化的影响 | 第90-93页 |
| ·三萜酸对成熟脂肪细胞葡萄糖消耗的影响 | 第93-94页 |
| ·3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的建立 | 第94-95页 |
| ·三萜酸对脂肪细胞胰岛素抵抗形成的影响 | 第95-96页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗的影响 | 第96-97页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗细胞游离脂肪酸释放的影响 | 第97-98页 |
| ·讨论 | 第98-101页 |
| ·前脂肪细胞增殖、分化与降糖作用的关系 | 第99-100页 |
| ·检测三萜酸对前脂肪细胞分化影响的时间选择 | 第100页 |
| ·三萜酸在增进葡萄糖消耗及胰岛素敏感性上的差异分析 | 第100-101页 |
| ·游离脂肪酸的释放与胰岛素抵抗 | 第101页 |
| ·小结 | 第101-103页 |
| 第5章 三萜酸改善胰岛素抵抗的作用机制 | 第103-118页 |
| ·引言 | 第103页 |
| ·试验材料与设备 | 第103-104页 |
| ·原料 | 第103页 |
| ·试剂 | 第103-104页 |
| ·实验仪器设备 | 第104页 |
| ·试验方法 | 第104-108页 |
| ·主要试剂配制 | 第104-105页 |
| ·试验分组设置 | 第105页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第105-106页 |
| ·总RNA纯度鉴定及定量 | 第106页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第106页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第106-107页 |
| ·凝胶成像及数据分析 | 第107-108页 |
| ·数据分析及计算 | 第108页 |
| ·结果与分析 | 第108-113页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞PPARγmRNA表达的影响 | 第108-109页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞CAP mRNA表达的影响 | 第109-110页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞Glut4 mRNA表达的影响 | 第110-111页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞Resistin mRNA表达的影响 | 第111-112页 |
| ·三萜酸对胰岛素抵抗脂肪细胞IRS-1 mRNA表达的影响 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-116页 |
| ·降糖试验模型的选择 | 第113-114页 |
| ·作用靶点的选择 | 第114-115页 |
| ·PPARγ激活与降糖 | 第115-116页 |
| ·青钱柳三萜酸降糖作用机制探讨 | 第116页 |
| ·小结 | 第116-118页 |
| 第6章 结论与展望 | 第118-121页 |
| ·结论 | 第118-120页 |
| ·青钱柳细胞悬浮培养及三萜酸积累 | 第118页 |
| ·青钱柳悬浮培养细胞三萜酸提取分离与结构鉴定 | 第118-119页 |
| ·青钱柳悬浮细胞三萜酸降糖作用研究 | 第119页 |
| ·青钱柳悬浮细胞三萜酸改善胰岛素抵抗的作用机制 | 第119-120页 |
| ·进一步研究的方向 | 第120-121页 |
| 创新之处 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-137页 |
| 附录A:附图 | 第137-147页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第147页 |
