| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| ·微生物冶金概述 | 第11-16页 |
| ·生物冶金产业化进展 | 第12-15页 |
| ·细菌学研究进展 | 第15-16页 |
| ·微生物抗重金属研究进展 | 第16-19页 |
| ·微生物抗重金属的机理概述 | 第16-18页 |
| ·铜的生理作用及毒性 | 第18-19页 |
| ·实时定量PCR(Real-time PCR) | 第19-22页 |
| ·基本原理 | 第20页 |
| ·检测系统及荧光染料 | 第20-21页 |
| ·管家基因(Housekeeping gene)的确定 | 第21-22页 |
| ·Real-time PCR技术的应用 | 第22页 |
| ·课题的研究目的和研究内容 | 第22-24页 |
| ·依据和目的 | 第23页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第23页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 两株A.ferrooxidans菌对五种重金属离子的耐受能力 | 第24-32页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料和方法 | 第24-26页 |
| ·菌株和培养基 | 第24-25页 |
| ·Fe~(2+)氧化率的测定方法和原理 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26页 |
| ·结果和讨论 | 第26-31页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对Cu~(2+)的耐受能力 | 第26-27页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对zn~(2+)的耐受能力 | 第27页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对Cd~(2+)的耐受能力 | 第27-29页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对pb~(2+)的耐受能力 | 第29页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对Ag~+的耐受能力 | 第29-30页 |
| ·A.ferrooxidans菌株DC和26~#对五种重金属离子的最高耐受能力比较 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 抗铜基因的克隆及序列分析 | 第32-43页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·菌株、质粒、引物和培养条件 | 第32-33页 |
| ·DNA提取 | 第33-34页 |
| ·抗铜基因Afe1073的鉴定 | 第34页 |
| ·PCR产物回收 | 第34-35页 |
| ·抗铜基因Afe1073的克隆 | 第35-36页 |
| ·抗铜基因序列分析 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-38页 |
| ·PCR扩增产物鉴定 | 第36-37页 |
| ·克隆子鉴定 | 第37-38页 |
| ·抗铜基因序列分析结果 | 第38页 |
| ·本章小结 | 第38-43页 |
| 第四章 不同铜环境下抗铜基因的差异表达 | 第43-56页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-50页 |
| ·菌株、引物和培养条件 | 第43-44页 |
| ·不同铜环境下Fe~(2+)氧化率和细菌的生长曲线测定 | 第44-45页 |
| ·RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·RNA纯化 | 第46-47页 |
| ·cDNA合成 | 第47页 |
| ·实时定量(Real-time)PCR检测 | 第47-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·不同铜环境中A.ferrooxidans菌株DC和26~#的生长情况 | 第50-51页 |
| ·引物质量评估 | 第51-52页 |
| ·基因Afe1073和16s rDNA的标准曲线和熔解曲线 | 第52-54页 |
| ·不同铜环境中A.ferrooxidans菌株DC和26~#抗铜基因Afe1073的差异表达 | 第54-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 抗铜基因及所表达的蛋白质的生物信息学分析 | 第56-62页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56-57页 |
| ·AFE1073蛋白序列的一般性分析 | 第56页 |
| ·AFE1073蛋白的三维分子模建 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-59页 |
| ·AFE1073蛋白序列的一般性分析 | 第57-59页 |
| ·AFE1073蛋白的三维分子模建 | 第59页 |
| ·本章小结 | 第59-62页 |
| 第六章 银离子环境中抗铜基因的差异表达 | 第62-70页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料和方法 | 第62-64页 |
| ·菌株、引物和培养条件 | 第62-63页 |
| ·重铬酸钾容量法滴定Fe~(2+)氧化率 | 第63页 |
| ·血细胞计数板计数测定细菌的生长曲线 | 第63页 |
| ·RNA的提取 | 第63-64页 |
| ·RNA纯化 | 第64页 |
| ·cDNA合成 | 第64页 |
| ·实时定量(Real-time)PCR检测 | 第64页 |
| ·结果和讨论 | 第64-69页 |
| ·Ag~+对A.ferrooxidans菌株DC和26~#铜抗性能力的影响 | 第64-66页 |
| ·不同银环境中A.ferrooxidans菌株DC和26~#的生长情况 | 第66-67页 |
| ·不同银环境中A.ferrooxidans菌株DC和26~#抗铜基因Afe1073的差异表达 | 第67-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 第七章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 研究成果 | 第81页 |
