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短小芽孢杆菌BSH-4抗菌蛋白的理化性质分析及初步分离

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-26页
   ·黄瓜菌核病防治现状第13-14页
   ·生物防治研究概况第14-17页
     ·生防菌应用的种类第14-16页
     ·短小芽孢杆菌的研究现状第16-17页
   ·拮抗微生物产生拮抗物质的研究进展第17-19页
     ·拮抗物质的种类第17页
     ·芽孢杆菌产生的拮抗物质第17-18页
     ·抗菌物质的应用第18-19页
   ·生防菌的主要作用机制第19-21页
     ·竞争作用第19页
     ·拮抗作用第19-20页
     ·寄生作用第20-21页
     ·诱导植物产生抗病性第21页
   ·拮抗细菌在植物病害防治中的优势及主要应用途径第21-22页
     ·拮抗细菌在植物病害防治中的优势第21页
     ·拮抗细菌在植物病害防治中的主要应用途径第21-22页
   ·生物防治存在问题与展望第22-26页
     ·生物防治存在的问题第22-24页
     ·生物防治前景展望第24-26页
2 材料与方法第26-39页
   ·材料第26-27页
     ·供试菌株第26页
     ·供试培养基第26页
     ·供试黄瓜品种第26页
     ·主要仪器与试剂第26-27页
       ·仪器第26-27页
       ·化学及生化试剂第27页
   ·拮抗菌株及其抗菌蛋白抑菌活性测定方法第27-29页
     ·平板对峙法第27-28页
     ·生长速率法第28页
     ·平板打孔法第28页
     ·蛋白含量测定方法第28-29页
       ·试剂第28页
       ·方法第28-29页
   ·拮抗菌株及其抗菌蛋白的活性测定第29页
     ·拮抗菌株及其抗菌蛋白的抑菌谱第29页
     ·不同转接次数的拮抗菌株的抑菌活性第29页
   ·无菌发酵液的制备方法第29页
   ·抗菌蛋白的提取及最适硫酸铵饱和度的确定第29-30页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 发酵条件的优化第30-31页
     ·培养方法第30页
     ·培养基的优化第30-31页
       ·单因素试验第30页
       ·正交试验第30-31页
     ·发酵条件的优化第31页
     ·测定方法第31页
   ·抗菌蛋白粗提液理化特性测定第31-32页
     ·热稳定性第31页
     ·pH 稳定性第31页
     ·紫外照射稳定性第31-32页
     ·对有机溶剂的稳定性第32页
     ·金属离子稳定性第32页
     ·蛋白酶稳定性第32页
     ·抗菌蛋白粗提液的底物特异性第32页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 抗菌蛋白对核盘菌的抑菌机制研究第32-34页
     ·对核盘菌菌丝生长的影响第32-33页
     ·对核盘菌菌丝形态的影响第33页
     ·对核盘菌菌核形成及单重的影响第33页
     ·对核盘菌菌核萌发的影响第33页
     ·对核盘菌菌丝体细胞膜渗透势的影响第33-34页
   ·抗菌蛋白的初步分离第34-39页
     ·Sephadex G-100 凝胶层析第34-36页
       ·Sephadex G-100 凝胶的预处理第34页
       ·装柱第34-35页
       ·平衡第35页
       ·样品上样与洗脱第35-36页
     ·纯度检测及分子量的测定第36-38页
       ·SDS-PAGE 贮液制备第36页
       ·凝胶板制备及电泳第36-38页
     ·电泳条带的活性测定第38-39页
3 结果与分析第39-57页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 及其抗菌蛋白的活性测定第39页
     ·短小芽孢杆菌BSH-4 及其抗菌蛋白的抑菌谱第39页
     ·不同转接次数的短小芽孢杆菌BSH-4 的抑菌活性第39页
   ·BSH-4 菌株抗菌蛋白最适硫酸铵饱和度的确定第39-40页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 发酵条件的优化第40-47页
     ·培养基的优化第40-43页
       ·碳源对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第40-41页
       ·氮源对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第41页
       ·无机盐对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第41-42页
       ·碳源、氮源和无机盐的正交优化第42-43页
     ·发酵条件的优化第43-47页
       ·不同发酵时间对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第43-44页
       ·不同摇瓶转速对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第44-45页
       ·不同培养温度对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第45页
       ·不同初始 pH 值对 BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第45-46页
       ·不同接种量对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第46-47页
       ·不同装液量对BSH-4 菌株发酵液拮抗活性的影响第47页
       ·抗菌蛋白的提取产量第47页
   ·抗菌蛋白粗提液的理化特性第47-50页
     ·热稳定性第47-48页
     ·酸碱稳定性第48页
     ·紫外照射稳定性第48-49页
     ·有机溶剂稳定性第49页
     ·对金属离子稳定性第49-50页
     ·对蛋白酶稳定性第50页
     ·抗菌蛋白粗提液的底物特异性第50页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 抗菌蛋白对核盘菌的抑菌机制第50-55页
     ·对核盘菌菌丝生长的影响第50-51页
     ·对核盘菌菌丝形态的影响第51页
     ·对核盘菌菌核形成及单重的影响第51-53页
     ·对核盘菌菌核萌发的影响第53页
     ·对核盘菌菌丝体细胞膜渗透势的影响第53-55页
   ·抗菌蛋白的初步分离第55-57页
     ·Sephadex G-100 凝胶层析第55页
     ·SDS-PAGE 电泳第55-57页
4 讨论第57-61页
   ·抗菌蛋白的生防应用第57页
   ·BSH-4 菌株发酵条件优化的目的意义第57-58页
   ·抗菌蛋白的理化特性第58页
   ·抗菌蛋白对核盘菌的初步作用机制第58-59页
   ·抗菌蛋白的初步分离第59-61页
5 结论第61-62页
   ·短小芽孢杆菌BSH-4 的发酵条件第61页
   ·抗菌蛋白的理化特性第61页
   ·抗菌蛋白对核盘菌的作用机制第61页
   ·抗菌蛋白的初步分离第61-62页
6 参考文献第62-71页
7 致谢第71-72页
8 攻读学位期间发表论文第72页

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