| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-34页 |
| 1.1 天然免疫系统的模式识别受体 | 第10-14页 |
| 1.1.1 天然免疫的模式识别受体理论 | 第10-11页 |
| 1.1.2 膜定位模式识别受体 | 第11-12页 |
| 1.1.3 细胞质定位模式识别受体 | 第12-14页 |
| 1.2 炎症小体的形成与激活 | 第14-19页 |
| 1.2.1 Caspase-4/5/11介导的炎症小体通路 | 第16页 |
| 1.2.2 Caspase-1介导的炎症小体通路 | 第16-19页 |
| 1.3 Pyrin蛋白与家族性地中海热 | 第19-21页 |
| 1.4 14-3-3与蛋白的磷酸化修饰 | 第21-24页 |
| 1.4.1 蛋白的磷酸化修饰 | 第21-22页 |
| 1.4.2 14-3-3蛋白的分类与结构 | 第22-23页 |
| 1.4.3 14-3-3蛋白对磷酸化蛋白的调控 | 第23-24页 |
| 1.5 细胞死亡研究进展 | 第24-28页 |
| 1.5.1 Caspase的分类与功能 | 第24-26页 |
| 1.5.2 细胞凋亡 | 第26页 |
| 1.5.3 程序性细胞坏死 | 第26-27页 |
| 1.5.4 细胞焦亡 | 第27-28页 |
| 1.6 DNA损伤化疗药物的作用原理 | 第28-32页 |
| 1.6.1 化疗药物对DNA的损伤原理 | 第28-30页 |
| 1.6.2 DNA损伤造成细胞死亡的研究进展 | 第30-32页 |
| 1.7 研究意义与目标 | 第32-34页 |
| 1.7.1 Pyrin炎症小体激活机制的研究 | 第32页 |
| 1.7.2 Gasdermin家族成员介导的细胞死亡的研究 | 第32-34页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第34-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 2.1.1 基因及质粒 | 第34页 |
| 2.1.2 小鼠品系 | 第34页 |
| 2.1.3 细胞系及细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.1.4 细菌菌株 | 第35页 |
| 2.1.5 抗体来源 | 第35页 |
| 2.1.6 实验所用试剂与试剂盒 | 第35-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-53页 |
| 2.2.1 常规分子生物学实验 | 第36-38页 |
| 2.2.2 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第38-39页 |
| 2.2.3 Phos-tag SDS-PAGE检测蛋白质磷酸化水平 | 第39页 |
| 2.2.4 细胞死亡与存活的检测 | 第39-40页 |
| 2.2.5 IL-1β ELISA检测 | 第40页 |
| 2.2.6 蛋白的表达与纯化 | 第40-42页 |
| 2.2.7 利用C3 toxin检测Rho蛋白修饰 | 第42-43页 |
| 2.2.8 细菌B.cenocepacia J2315的感染实验 | 第43页 |
| 2.2.9 蛋白质免疫沉淀检测蛋白质相互作用 | 第43-44页 |
| 2.2.10 细胞转染 | 第44页 |
| 2.2.11 慢病毒介导的稳定表达细胞系的建立 | 第44-45页 |
| 2.2.12 实时定量PCR(RT-PCR) | 第45-46页 |
| 2.2.13 酵母双杂交检测蛋白质相互作用 | 第46-47页 |
| 2.2.14 蛋白质共价交联实验 | 第47-48页 |
| 2.2.15 细胞免疫荧光染色 | 第48页 |
| 2.2.16 CRISPR-Cas9筛选系统的建立 | 第48-49页 |
| 2.2.17 基因敲除细胞系的建立 | 第49页 |
| 2.2.18 小鼠原代巨噬细胞BMDM的制备 | 第49-50页 |
| 2.2.19 流式细胞仪分析 | 第50页 |
| 2.2.20 siRNA介导的基因沉默 | 第50-51页 |
| 2.2.21 组织切片染色 | 第51-53页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第53-100页 |
| 3.1 Pyrin炎症小体激活机制的研究 | 第53-86页 |
| 3.1.1 Pyrin炎症小体激活刺激物的选择 | 第53-58页 |
| 3.1.2 针对Pyrin蛋白的单克隆抗体的制备 | 第58-59页 |
| 3.1.3 Pyrin与14-3-3的蛋白质相互作用 | 第59-62页 |
| 3.1.4 Pyrin与14-3-3通过磷酸化介导相互结合 | 第62-64页 |
| 3.1.5 Pyrin炎症小体激活时Pyrin蛋白发生去磷酸化反应 | 第64-66页 |
| 3.1.6 Pyrin蛋白位点特异性磷酸化介导Pyrin与14-3-3结合 | 第66-69页 |
| 3.1.7 针对pSer205、pSer241的特异性磷酸化抗体的制备 | 第69-70页 |
| 3.1.8 Pyrin炎症小体激活时Pyrin蛋白的位点特异性去磷酸化反应 | 第70-72页 |
| 3.1.9 Pyrin蛋白位点特异性去磷酸化是引起Pyrin炎症小体激活的原因 | 第72-76页 |
| 3.1.10 微管蛋白破坏性药物抑制Pyrin炎症小体的激活 | 第76-80页 |
| 3.1.11 微管破坏性药物在Pyrin蛋白招募ASC时起抑制作用 | 第80-82页 |
| 3.1.12 控制Pyrin蛋白磷酸化变化的磷酸激酶与磷酸酶的筛选 | 第82-86页 |
| 3.2 Gasdermin E介导的细胞焦亡的研究 | 第86-100页 |
| 3.2.1 Caspase-3切割并激活Gasdermin E引起细胞焦亡 | 第86-90页 |
| 3.2.2 Gasdermin E介导化疗药物引起的细胞焦亡 | 第90-93页 |
| 3.2.3 Gasdermin E介导化疗药物对机体组织损伤的研究 | 第93-100页 |
| 第四章 结论与展望 | 第100-104页 |
| 4.1 实验结论 | 第100-101页 |
| 4.2 讨论与展望 | 第101-104页 |
| 附录 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 个人简历 | 第113-114页 |
