提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩写词表 | 第12-13页 |
第1章 引言 | 第13-21页 |
·SDRs 家族的结构特征 | 第13-14页 |
·SDRs 家族的生理功能 | 第14-15页 |
·SDRs 家族的分类及主要成员 | 第15-21页 |
·SDRs 家族的分类 | 第15页 |
·SDRs 家族主要成员 | 第15-20页 |
·DHRS7 的研究现状及其与肿瘤的关系 | 第20-21页 |
第2章 材料和方法 | 第21-38页 |
·材料 | 第21-24页 |
·乳腺癌组织标本和细胞株来源 | 第21页 |
·实验仪器 | 第21-22页 |
·主要试剂及溶液配方 | 第22-24页 |
·质粒和菌株 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-31页 |
·DHSRS7 克隆载体的构建 | 第24-29页 |
·pcDNA3.1-DHRS7 真核表达载体的构建 | 第29-31页 |
·实验分组 | 第31页 |
·pcDNA3.1-DHRS7 表达质粒和 DHRS7 干扰质粒在 MCF-7 细胞株中的表达及鉴定 | 第31-34页 |
·各组质粒转染 MCF-7 细胞 | 第31页 |
·RT-PCR 检测染细胞中 DHRS7 基因 mRNA 转录水平 | 第31-32页 |
·Western blot 法检测转染细胞中 DHRS7 蛋白表达水平 | 第32-34页 |
·流式细胞仪检测 DHRS7 对 MCF-7 细胞周期的影响 | 第34-35页 |
·各组质粒转染 MCF-7 细胞 | 第34页 |
·PI 染液处理细胞 | 第34-35页 |
·免疫组织化学 SP 法检测 DHRS7 在乳腺癌组织中的表达 | 第35-37页 |
·石蜡切片苏木精-伊红染色法(HE 染色) | 第35-36页 |
·免疫组织化学方法(SP 法) | 第36-37页 |
·染色结果的判定 | 第37页 |
·统计学分析 | 第37-38页 |
第3章 结果 | 第38-45页 |
·DHRS7 基因的扩增及克隆载体的鉴定 | 第38-39页 |
·DHRS7 基因的扩增 | 第38页 |
·pMD18-DHRS7 克隆质粒经 PCR 和双酶切鉴定 | 第38-39页 |
·DHRS7 表达载体的鉴定 | 第39-41页 |
·pcDNA3.1 的双酶切 | 第39页 |
·pcDNA3.1-DHRS7 重组表达质粒双酶切和 PCR 鉴定 | 第39-41页 |
·转染后 DHRS7 在 MCF-7 细胞中的表达 | 第41-42页 |
·转染细胞后各组细胞中 DHRS7mRNA 表达水平的检测 | 第41页 |
·转染后各组细胞中 DHRS7 蛋白水平表达的检测 | 第41-42页 |
·转染后 MCF-7 细胞周期的变化 | 第42-43页 |
·DHRS7 在乳腺癌组织中的免疫组化染色结果 | 第43-45页 |
第4章 讨论 | 第45-51页 |
·DHRS-7 真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
·DHRS7 对人乳腺癌细胞 MCF-7 细胞周期的影响 | 第46-48页 |
·DHRS7 蛋白的表达与乳腺癌浸润的关系 | 第48-51页 |
第5章 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |