| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第1章 综述 | 第13-16页 |
| 第2章 AKR1B10 基因过表达载体构建及鉴定 | 第16-25页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·实验主要设备和仪器 | 第16页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第16-17页 |
| ·实验中主要试剂配制方法 | 第17页 |
| ·LB 液体培养基配制 | 第17页 |
| ·LB 固体培养基配制 | 第17页 |
| ·氨苄青霉素(Amp 100mg/mL)配制 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-21页 |
| ·目的片段扩增引物设计和合成 | 第17-18页 |
| ·AKR1B10 基因获取 | 第18页 |
| ·扩增产物与 T 载体连接 | 第18-19页 |
| ·重组质粒转化 | 第19-20页 |
| ·T 载体-AKR1B10 连接产物双酶切，目的片段胶回收 | 第20页 |
| ·pcDNA3.1(+)载体双酶切回收 | 第20页 |
| ·目的片段和酶切载体连接 | 第20页 |
| ·表达载体的双酶切鉴定 | 第20-21页 |
| ·瞬时转染 MCF-7 细胞 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-24页 |
| ·目的片段 PCR 扩增 | 第21-22页 |
| ·目的片段与 T 载体连接经双酶切鉴定 | 第22页 |
| ·真核表达载体 pcDNA3.1(+)-AKR1B10 双酶切鉴定 | 第22-23页 |
| ·转染不同载体的 MCF-7 荧光观察结果 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第3章 AKR1B10 在乳腺癌细胞 MCF-7 中的功能验证 | 第25-37页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·实验主要设备和仪器 | 第25页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第25-26页 |
| ·实验用乳腺癌细胞 | 第26页 |
| ·AKR1B10 基因 RNAi 载体 | 第26页 |
| ·实验中主要试剂配制方法 | 第26-28页 |
| ·细胞培养试剂制备方法 | 第26页 |
| ·PBS 缓冲液配制 | 第26-27页 |
| ·Western blotting 试剂制备方法 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-32页 |
| ·冻存 MCF-7 细胞复苏 | 第28页 |
| ·MCF-7 细胞 cDNA 提取 | 第28-29页 |
| ·AKR1B10 基因荧光定量 PCR 检测 | 第29页 |
| ·AKR1B10 基因表达量 Western blotting 分析 | 第29-31页 |
| ·Transwell 小室实验 | 第31-32页 |
| ·统计学处理 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-35页 |
| ·总 RNA 提取 | 第32-33页 |
| ·转染不同载体 MCF-7 细胞 AKR1B10 基因 RT-PCR 检测 | 第33-34页 |
| ·表达不同载体细胞内 AKR1B10 基因表达量 Western blotting 分析 | 第34页 |
| ·Transwell 小室侵袭实验结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 AKR1B10 蛋白在乳腺癌中的表达与 Her-2 的相关性研究 | 第37-44页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·实验主要设备和仪器 | 第37页 |
| ·试剂盒和试剂 | 第37页 |
| ·实验中主要试剂配制方法 | 第37-38页 |
| ·柠檬酸盐缓冲液配制方法 | 第37-38页 |
| ·DAB 显色液配制方法 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·取材 | 第38页 |
| ·制备蜡块与切片 | 第38-39页 |
| ·脱蜡、染色、脱水透明、封片 | 第39页 |
| ·免疫组化染色方法 | 第39页 |
| ·结果判定 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-42页 |
| ·乳腺导管内癌 AKR1B10、ER 和 Her-2 染色结果 | 第40-41页 |
| ·乳腺良性病变 AKR1B10 免疫组化染色结果 | 第41-42页 |
| ·乳腺浸润性癌 AKR1B10 免疫组化染色结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第5章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 作者简介及在学期间所取得科研成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
