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大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆及其功能分析

摘要第1-7页
 Abstract第7-12页
第一章 引言第12-21页
   ·维生素 E 的分子结构第12-13页
   ·维生素 E 生物合成途径和关键酶基因克隆第13-16页
     ·对羟甲基丙酮酸双加氧酶(HPPD)第14页
     ·尿黑酸叶绿醇转移酶(HPT)第14-15页
     ·尿黑酸拢牛儿拢牛儿基转移酶(HGGT)第15页
     ·2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ-MT)第15页
     ·生育酚环化酶(TC)第15-16页
     ·γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT)第16页
   ·维生素 E 在植物体内的功能研究进展第16-18页
     ·维生素 E 与脂肪酸代谢和糖类运输第16-17页
     ·维生素 E 与信号转导第17页
     ·维生素 E 与种子萌发和种子寿命第17页
     ·维生素 E 与抗旱,抗高光照强度,抗衰老第17-18页
     ·维生素在植物体内的功能总结第18页
   ·植物代谢工程研究进展第18-19页
     ·提高现存代谢途径中天然产物的产量第19页
     ·构建新的代谢途径第19页
   ·天然维生素 E 对人体的作用及在工业中的应用第19-20页
   ·本研究的目的意义第20-21页
第二章 大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆第21-29页
   ·实验材料第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌种和载体第21页
     ·工具酶、试剂和试剂盒第21页
     ·测序和引物合成第21页
     ·试剂及其配制方法第21-22页
   ·实验方法第22-24页
     ·大豆叶片总 RNA 的提取(Trizol 法)第22页
     ·大豆总 RNA 反转录第22-23页
     ·大豆 MPBQ-MT CDNA 的获得第23页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和电击转化第23-24页
     ·大肠杆菌质粒的提取和鉴定第24页
   ·结果与分析第24-29页
     ·GmMPBQ-MT 基因的获得和检测第24-25页
     ·GmMPBQ-MT 基因序列分析第25-29页
第三章 大豆 MPBQ-MT 基因转拟南芥的获得及功能分析第29-41页
   ·实验材料第29-30页
     ·植物材料第29页
     ·菌种和载体第29页
     ·工具酶、试剂和试剂盒第29页
     ·测序和引物合成第29页
     ·实验仪器第29-30页
   ·实验方法第30-34页
     ·植物表达载体pZP212 改-MPBQ MT 的构建第30页
     ·农杆菌 LBA4404 电击感受态细胞的制备第30页
     ·农杆菌的电击转化第30页
     ·农杆菌质粒 DNA 的提取和转化子的检测第30-31页
     ·拟南芥转化(蘸花法)第31-32页
     ·转基因植株的抗性筛选第32页
     ·转基因拟南芥植株 PCR 检测第32-33页
     ·转基因纯系拟南芥的植株的 RT-PCR 分析第33页
     ·转基因拟南芥生育酚的提取和测定第33-34页
   ·结果与分析第34-41页
     ·植物转化表达载体pZP212 改-MPBQ MT 的构建第34页
     ·农杆菌转化子的 PCR 鉴定第34-35页
     ·拟南芥转化第35-36页
     ·转基因拟南芥 RT-PCR 分析第36页
     ·转基因拟南芥种子中维生素 E 含量分析第36-41页
第四章 大豆 MPBQ-MT 基因转烟草的获得及功能分析第41-49页
   ·实验材料第41页
     ·植物和菌种材料第41页
     ·工具酶和试剂盒第41页
     ·测序和引物合成第41页
     ·实验仪器第41页
   ·实验方法第41-46页
     ·农杆菌介导的叶盘法烟草转化第41-42页
     ·转基因烟草叶片总 RNA 的提取第42-43页
     ·RNA TBE 电泳第43页
     ·Northern 杂交第43-46页
     ·转基因烟草生育酚的提取和测定第46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·转 GmMPBQ-MT 基因烟草阳性植株的获得第46页
     ·转 GmMPBQ-MT 基因烟草阳性植株的 Northern 杂交分析第46-47页
     ·转 GmMPBQ-MT 基因烟草种子中维生素 E 含量分析第47-49页
第五章 结论第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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