摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
·维生素 E 的分子结构 | 第12-13页 |
·维生素 E 生物合成途径和关键酶基因克隆 | 第13-16页 |
·对羟甲基丙酮酸双加氧酶(HPPD) | 第14页 |
·尿黑酸叶绿醇转移酶(HPT) | 第14-15页 |
·尿黑酸拢牛儿拢牛儿基转移酶(HGGT) | 第15页 |
·2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ-MT) | 第15页 |
·生育酚环化酶(TC) | 第15-16页 |
·γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT) | 第16页 |
·维生素 E 在植物体内的功能研究进展 | 第16-18页 |
·维生素 E 与脂肪酸代谢和糖类运输 | 第16-17页 |
·维生素 E 与信号转导 | 第17页 |
·维生素 E 与种子萌发和种子寿命 | 第17页 |
·维生素 E 与抗旱,抗高光照强度,抗衰老 | 第17-18页 |
·维生素在植物体内的功能总结 | 第18页 |
·植物代谢工程研究进展 | 第18-19页 |
·提高现存代谢途径中天然产物的产量 | 第19页 |
·构建新的代谢途径 | 第19页 |
·天然维生素 E 对人体的作用及在工业中的应用 | 第19-20页 |
·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 大豆2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆 | 第21-29页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌种和载体 | 第21页 |
·工具酶、试剂和试剂盒 | 第21页 |
·测序和引物合成 | 第21页 |
·试剂及其配制方法 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-24页 |
·大豆叶片总 RNA 的提取(Trizol 法) | 第22页 |
·大豆总 RNA 反转录 | 第22-23页 |
·大豆 MPBQ-MT CDNA 的获得 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和电击转化 | 第23-24页 |
·大肠杆菌质粒的提取和鉴定 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-29页 |
·GmMPBQ-MT 基因的获得和检测 | 第24-25页 |
·GmMPBQ-MT 基因序列分析 | 第25-29页 |
第三章 大豆 MPBQ-MT 基因转拟南芥的获得及功能分析 | 第29-41页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·菌种和载体 | 第29页 |
·工具酶、试剂和试剂盒 | 第29页 |
·测序和引物合成 | 第29页 |
·实验仪器 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-34页 |
·植物表达载体pZP212 改-MPBQ MT 的构建 | 第30页 |
·农杆菌 LBA4404 电击感受态细胞的制备 | 第30页 |
·农杆菌的电击转化 | 第30页 |
·农杆菌质粒 DNA 的提取和转化子的检测 | 第30-31页 |
·拟南芥转化(蘸花法) | 第31-32页 |
·转基因植株的抗性筛选 | 第32页 |
·转基因拟南芥植株 PCR 检测 | 第32-33页 |
·转基因纯系拟南芥的植株的 RT-PCR 分析 | 第33页 |
·转基因拟南芥生育酚的提取和测定 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-41页 |
·植物转化表达载体pZP212 改-MPBQ MT 的构建 | 第34页 |
·农杆菌转化子的 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
·拟南芥转化 | 第35-36页 |
·转基因拟南芥 RT-PCR 分析 | 第36页 |
·转基因拟南芥种子中维生素 E 含量分析 | 第36-41页 |
第四章 大豆 MPBQ-MT 基因转烟草的获得及功能分析 | 第41-49页 |
·实验材料 | 第41页 |
·植物和菌种材料 | 第41页 |
·工具酶和试剂盒 | 第41页 |
·测序和引物合成 | 第41页 |
·实验仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-46页 |
·农杆菌介导的叶盘法烟草转化 | 第41-42页 |
·转基因烟草叶片总 RNA 的提取 | 第42-43页 |
·RNA TBE 电泳 | 第43页 |
·Northern 杂交 | 第43-46页 |
·转基因烟草生育酚的提取和测定 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·转 GmMPBQ-MT 基因烟草阳性植株的获得 | 第46页 |
·转 GmMPBQ-MT 基因烟草阳性植株的 Northern 杂交分析 | 第46-47页 |
·转 GmMPBQ-MT 基因烟草种子中维生素 E 含量分析 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简历 | 第57页 |