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鱼类IL-1R及相关家族成员的分子克隆与功能研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-11页
1 绪论第11-29页
   ·IL-1R家族成员第11-20页
     ·TIR结构域第11-12页
     ·IL-1RI第12-13页
     ·IL-1RII第13-14页
     ·IL-1RAcP第14-15页
     ·IL-1Rrp第15页
     ·TIGIRR第15-16页
     ·IL-18R受体复合物第16页
     ·T1/ST2第16-17页
     ·IL-1R受体信号转导第17-18页
     ·IL-1R/TIR超家族的进化第18-20页
   ·SIGIRR/TIR8第20-27页
     ·SIGIRR基因的进化与蛋白结构第21页
     ·SIGIRR的组织表达与调控第21-22页
     ·SIGIRR调控IL-1R/TLR的信号第22-23页
     ·SIGIRR与疾病的关系第23-27页
   ·IL-1R家族的研究意义第27-29页
2 鱼类IL-1RI的实验研究第29-57页
   ·材料与方法第29-42页
     ·实验鱼第29页
     ·菌株与试剂第29-30页
     ·数据库及软件第30页
     ·基因预测第30-31页
     ·总RNA提取及cDNA合成第31-32页
     ·河豚鱼IL-1RI的克隆第32页
     ·PCR产物的纯化第32页
     ·T-A克隆第32-35页
     ·原核表达质粒构建第35页
     ·蛋白原核表达第35-38页
     ·亚细胞定位第38-39页
     ·IL-1RI的组织表达第39-40页
     ·荧光定量分析第40页
     ·直接夹心法ELISA测定受体与配体的结合第40-42页
   ·结果与讨论第42-57页
     ·河豚IL-IR1的鉴定第42-49页
     ·IL-1RI家族进化分析第49-51页
     ·IL-1R与IL-1协同进化第51-52页
     ·河豚IL-1RI原核表达第52-53页
     ·直接夹心法ELISA测定受体与配体的结合第53页
     ·IL-1RI细胞定位第53-54页
     ·IL-1RI的组织表达第54页
     ·抗体封闭实验第54-57页
3 鱼类DIGIRR的实验研究第57-87页
   ·材料与方法第57-63页
     ·材料与方法分子鉴定、细胞转染、白细胞分离同第2章第57页
     ·DIGIRR组织分布第57-58页
     ·质粒构建第58页
     ·报告基因检测第58页
     ·斑马鱼胚胎NF-κB报告基因检测模型的建立第58-59页
     ·DIGIRR siRNA的筛选第59页
     ·慢病毒包装第59-60页
     ·siRNA抑制DIGIRR的表达第60页
     ·DIGIRR在炎症信号中的作用第60-63页
   ·结果第63-81页
     ·DIGIRR的鉴定第63-68页
     ·DIGIRR基因的结构第68页
     ·DIGIRR蛋白结构特征第68-70页
     ·序列比对及进化分析第70-72页
     ·功能结构域分析第72-73页
     ·DIGIRR组织分布第73-75页
     ·DIGIRR亚细胞定位第75-77页
     ·DIGIRR负调NF-κB信号第77-78页
     ·siRNA抑制DIGIRR表达第78-80页
     ·DIGIRR负调节IL-1介导的免疫反应第80页
     ·DIGIRR胞内TIR结构域Ser/Ala-Leu信号转导功能检测第80-81页
   ·讨论第81-87页
4 鱼类SIGIRR的实验研究第87-99页
   ·材料与方法第88-89页
   ·结果第89-97页
     ·斑马鱼SIGIRR的鉴定第89-90页
     ·斑马鱼SIGIRR基因结构特征第90-92页
     ·SIGIRR遗传进化分析第92-94页
     ·SIGIRR原核表达与抗体制备第94-95页
     ·斑马鱼SIGIRR细胞定位第95页
     ·斑马鱼SIGIRR组织分布第95-96页
     ·SIGIRR负调节NF-κB信号通路第96-97页
   ·讨论第97-99页
5 结论第99-100页
参考文献第100-110页
作者简历第110页

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