| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 微生物源碱性蛋白酶的研究进展 | 第10-22页 |
| ·碱性蛋白酶概况 | 第10页 |
| ·产碱性蛋白酶的主要菌株 | 第10-11页 |
| ·碱性蛋白酶的菌种的选育 | 第11-13页 |
| ·菌株的筛选 | 第11页 |
| ·菌株的改造 | 第11-12页 |
| ·原生质体融合技术 | 第11-12页 |
| ·基因工程和蛋白质技术 | 第12页 |
| ·培养基及发酵条件的优化 | 第12-13页 |
| ·碱性蛋白酶的部分酶学性质 | 第13-18页 |
| ·碱性蛋白酶的最适pH及pH稳定性 | 第13-14页 |
| ·碱性蛋白酶的最适温度及热稳定性 | 第14-16页 |
| ·耐热碱性蛋白酶 | 第14-15页 |
| ·提高碱性蛋白酶的热稳定性 | 第15页 |
| ·低温蛋白酶 | 第15-16页 |
| ·金属离子及抑制剂对碱性蛋白酶酶活性的影响 | 第16-17页 |
| ·胰蛋白酶丝氨酸碱性蛋白酶 | 第16页 |
| ·金属碱性蛋白酶 | 第16-17页 |
| ·表面活性剂,氧化剂,去污剂对碱性蛋白酶酶活性的影响 | 第17-18页 |
| ·碱性蛋白酶的应用 | 第18-20页 |
| ·碱性蛋白酶在洗涤工业中的应用 | 第18页 |
| ·碱性蛋白酶在皮革工业中的应用 | 第18页 |
| ·碱性蛋白酶在胶片银回收中的应用 | 第18-19页 |
| ·碱性蛋白酶在医药行业中的应用 | 第19页 |
| ·碱性蛋白酶在食品工业中的应用 | 第19页 |
| ·碱性蛋白酶在污水处理中的应用 | 第19-20页 |
| ·碱性蛋白酶基因工程 | 第20-22页 |
| ·以酵母菌为宿主菌 | 第20页 |
| ·以大肠杆菌为宿主菌 | 第20-21页 |
| ·以芽孢杆菌为宿主菌 | 第21-22页 |
| 2 产碱性蛋白酶条件的优化及部分酶学性质的研究 | 第22-40页 |
| ·材料与方法 | 第22-28页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·常用溶液及配制方法 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·碱性蛋白酶酶活性的测定方法 | 第24-26页 |
| ·菌株的培养及酶液的制备 | 第26页 |
| ·发酵产酶培养基的优化 | 第26-27页 |
| ·发酵产酶条件的优化 | 第27页 |
| ·碱性蛋白酶部分酶学性质的研究 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-38页 |
| ·发酵产酶培养基的优化 | 第28-31页 |
| ·不同碳源对产酶的影响 | 第28-29页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第29-30页 |
| ·碳氮比对产酶的影响 | 第30页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第30页 |
| ·起始pH对产酶的影响 | 第30-31页 |
| ·发酵产酶条件的优化 | 第31-34页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第31-32页 |
| ·通气量对产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·发酵时间对产酶的影响 | 第34页 |
| ·碱性蛋白酶部分酶学性质的研究 | 第34-38页 |
| ·碱性蛋白酶的最适作用温度 | 第34-35页 |
| ·碱性蛋白酶的最适作用pH | 第35页 |
| ·碱性蛋白酶的热稳定性 | 第35-36页 |
| ·碱性蛋白酶的pH的稳定性 | 第36页 |
| ·不同离子对酶活的影响 | 第36-37页 |
| ·抑制剂与蛋白酶的酶活 | 第37页 |
| ·洗涤剂组分对酶活的影响 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·产碱性蛋白酶条件的优化 | 第38页 |
| ·碱性蛋白酶的部分酶学性质 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 3 枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶sap基因的克隆及表达 | 第40-60页 |
| ·材料与方法 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·载体 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·常用溶液及配方 | 第41-42页 |
| ·仪器设备 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-48页 |
| ·表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·测序及序列分析 | 第44页 |
| ·常用分子生物学方法 | 第44-47页 |
| ·sap在大肠杆菌中的诱导表达 | 第47-48页 |
| ·碱性蛋白酶的活性检测 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-58页 |
| ·PCR扩增获得目的片段 | 第48-49页 |
| ·目的片段sap与pMD-20T的连接 | 第49页 |
| ·酶切鉴定pMD-20T-sap | 第49-50页 |
| ·测序与蛋白质序列分析 | 第50-56页 |
| ·表达载体pET-25b-sap的构建 | 第56-57页 |
| ·碱性蛋白酶的活性检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58页 |
| ·碱性蛋白酶基因sap的克隆 | 第58页 |
| ·碱性蛋白酶基因sap的诱导表达 | 第58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 4 结论及展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 微生物源碱性蛋白酶的研究进展 | 第62-68页 |
| 产碱性蛋白酶条件的优化及部分酶学性质的研究 | 第68-69页 |
| 枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶sap基因的克隆及表达 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第71页 |