| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第15-18页 |
| 第1章 文献综述 | 第18-61页 |
| 1 禽流感的研究进展 | 第18-26页 |
| ·病原 | 第18页 |
| ·流行病学 | 第18-19页 |
| ·宿主范围 | 第18-19页 |
| ·禽流感的流行病学特点 | 第19页 |
| ·AIV凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白 | 第19-21页 |
| ·禽流感检测方法的研究进展 | 第21-26页 |
| ·病原学的诊断方法 | 第21-22页 |
| ·血清学诊断方法 | 第22-24页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第24-26页 |
| 2 新城疫的研究进展 | 第26-32页 |
| ·病原 | 第26页 |
| ·病原的分类 | 第26页 |
| ·血清型 | 第26页 |
| ·血凝素神经氨酸酶蛋白结构与功能 | 第26-27页 |
| ·新城疫的传播与危害 | 第27-28页 |
| ·新城疫检测方法的研究进展 | 第28-32页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第28-29页 |
| ·清学诊断技术 | 第29-30页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第30-32页 |
| 3 鸡传染性支气管炎的研究进展 | 第32-37页 |
| ·病原 | 第32-33页 |
| ·病原的分类 | 第32页 |
| ·清型 | 第32-33页 |
| ·IBV的N蛋白研究 | 第33页 |
| ·流行病学 | 第33-34页 |
| ·鸡传染性支气管炎检测方法 | 第34-37页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第34页 |
| ·IBV血清学检测技术 | 第34-36页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第36-37页 |
| 4 鸡传染性法氏囊的研究进展 | 第37-43页 |
| ·病原 | 第38-40页 |
| ·病毒学分类、形态及理化特性 | 第38页 |
| ·病毒培养特性 | 第38-39页 |
| ·病毒血清型 | 第39页 |
| ·IBDV的基因组结构和编码的蛋白 | 第39-40页 |
| ·流行病学 | 第40-41页 |
| ·自然宿主与传播媒介 | 第40-41页 |
| ·流行特点 | 第41页 |
| ·鸡传染性法氏囊检测方法的研究进展 | 第41-43页 |
| ·病毒分离 | 第41-42页 |
| ·清学方法 | 第42-43页 |
| ·分子生物学方法 | 第43页 |
| 5 鸡毒霉形体的研究进展 | 第43-49页 |
| ·病原 | 第44-47页 |
| ·病原及发病特点 | 第44-45页 |
| ·MG的基因组结构和结构蛋白的研究 | 第45-47页 |
| ·流行病学 | 第47页 |
| ·鸡毒霉形体的检测方法 | 第47-49页 |
| ·病原的分离鉴定 | 第47-48页 |
| ·清学方法 | 第48页 |
| ·分子生物学方法 | 第48-49页 |
| 6 胶体金免疫层析技术的研究进展 | 第49-59页 |
| ·胶体金的特性及其制备 | 第49-53页 |
| ·胶体金的特性 | 第49页 |
| ·胶体金的制备方法 | 第49-53页 |
| ·免疫胶体金的制备及其应用 | 第53-56页 |
| ·免疫胶体金的制备原理 | 第53页 |
| ·免疫胶体金的应用 | 第53-56页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理及其优势 | 第56-58页 |
| ·胶体金免疫层析技术的原理 | 第56-57页 |
| ·胶体金免疫层析技术的优势 | 第57-58页 |
| ·胶体金免疫层析技术的研究趋势 | 第58-59页 |
| ·提高胶体金免疫层析产品的性能 | 第58-59页 |
| ·实现多元检测 | 第59页 |
| ·实现半定量或定量测定 | 第59页 |
| 7 研究目的与意义 | 第59-61页 |
| 第2章 AIV-HA1 NDV-HN IBV-N IBDV-VP2 MG-V1hA1.2重组蛋白的表达与纯化 | 第61-72页 |
| 1 研究目的与意义 | 第61页 |
| 2 材料与方法 | 第61-66页 |
| ·材料 | 第61-64页 |
| ·质粒、菌株及试剂 | 第61-62页 |
| ·相关溶液的配制 | 第62-64页 |
| ·方法 | 第64-66页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第64页 |
| ·重组表达质粒的转化 | 第64-65页 |
| ·诱导表达 | 第65页 |
| ·包涵体的纯化与复性 | 第65页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第65-66页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第66页 |
| ·Western blot | 第66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-67页 |
| ·重组菌诱导条件及目标蛋白纯化的SDS-PAGE电泳结果 | 第66页 |
| ·Western blot分析 | 第66-67页 |
| ·纯化蛋白浓度测定 | 第67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| ·表达载体与表达菌的选择 | 第67-70页 |
| ·诱导条件和纯化方法 | 第70页 |
| ·对HN、N蛋白表达形式的分析 | 第70-71页 |
| ·对HN、VP2、VlhA1.2蛋白表达量和表达状态的分析 | 第71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 第3章 AIV、NDV、IBV、IBDV、MG血清抗体快速检测试纸条的研制 | 第72-95页 |
| 1 研究的目的与意义 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-80页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·仪器 | 第72页 |
| ·生物材料、化学试剂及其它 | 第72-73页 |
| ·溶液的配制 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-80页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的制备与纯化 | 第73-75页 |
| ·胶体金的制备 | 第75页 |
| ·胶体金颗粒的鉴定 | 第75页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值的确定 | 第75页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 | 第75-76页 |
| ·金标单抗复合物的制备与纯化 | 第76页 |
| ·封闭液的选择 | 第76-77页 |
| ·样品垫、金标垫的制备 | 第77页 |
| ·质控线与检测线的包被 | 第77页 |
| ·试纸条的组装及结果判定标准 | 第77-78页 |
| ·样品稀释液与样品稀释倍数的确定 | 第78页 |
| ·试纸条交叉反应试验 | 第78页 |
| ·试纸条检测下限的确定 | 第78-79页 |
| ·快速检测血清抗体试剂盒组装及初步应用 | 第79-80页 |
| 3 结果与分析 | 第80-91页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的纯化 | 第80页 |
| ·胶体金的制备 | 第80-81页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值的确定 | 第81-82页 |
| ·抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 | 第82-83页 |
| ·金标单抗复合物的鉴定 | 第83页 |
| ·封闭液的选择 | 第83-84页 |
| ·检测线和质控线的包被条件 | 第84页 |
| ·样品稀释液与样品稀释倍数的确定 | 第84页 |
| ·试纸条交叉反应试验 | 第84-87页 |
| ·试纸条检测下限的确定 | 第87-88页 |
| ·试剂盒的重复性试验和保存期试验 | 第88-89页 |
| ·几种试剂盒的临床应用 | 第89-91页 |
| 4 讨论 | 第91-94页 |
| ·胶体金颗粒制备及鉴定 | 第91-92页 |
| ·胶体金标记的单克隆抗体的制备 | 第92-93页 |
| ·胶体金标记物抗鸡IgG Fc段单克隆抗体 | 第93页 |
| ·封闭液的选择 | 第93页 |
| ·检测线和质控线包被条件 | 第93页 |
| ·样品稀释液与稀释倍数的确定 | 第93页 |
| ·试纸条检测下限的确定 | 第93-94页 |
| ·几种试剂盒的临床应用 | 第94页 |
| 5 结论 | 第94-95页 |
| 第4章 AIV、IBV、IBDV抗体快速联检试纸条的研制 | 第95-100页 |
| 1 研究的目的与意义 | 第95页 |
| 2 材料与方法 | 第95-97页 |
| ·材料 | 第95-96页 |
| ·仪器 | 第95页 |
| ·生物材料、化学试剂及其它 | 第95页 |
| ·溶液的配制 | 第95-96页 |
| ·方法 | 第96-97页 |
| ·试纸条的构建 | 第96页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第96-97页 |
| ·试纸条的特异性试验 | 第97页 |
| ·试纸条的敏感性试验 | 第97页 |
| 3 结果与分析 | 第97-98页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第97-98页 |
| ·试纸条的特异性试验 | 第98页 |
| ·试纸条的敏感性试验 | 第98页 |
| 4 讨论 | 第98-99页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第98-99页 |
| 5 结论 | 第99-100页 |
| 第5章 IBV抗体效价快速检测试纸条的研制 | 第100-104页 |
| 1 研究的目的与意义 | 第100页 |
| 2 材料与方法 | 第100-102页 |
| ·材料 | 第100-101页 |
| ·仪器 | 第100页 |
| ·生物材料、化学试剂及其它 | 第100页 |
| ·溶液的配制 | 第100-101页 |
| ·方法 | 第101-102页 |
| ·试纸条的构建 | 第101-102页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第102页 |
| ·试纸条的特异性试验 | 第102页 |
| ·试纸条的敏感性试验 | 第102页 |
| 3 结果与分析 | 第102-103页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第102页 |
| ·试纸条的特异性试验 | 第102页 |
| ·试纸条的敏感性试验 | 第102-103页 |
| 4 讨论 | 第103页 |
| ·最佳反应条件的选择 | 第103页 |
| ·试纸条测定界限的选择 | 第103页 |
| 5 结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-134页 |
| 研究生期间发表的主要论文和专利申请 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
